鼻咽分泌物EB病毒抗體聯(lián)合檢測在鼻咽癌早期診斷中的作用

李哲　劉樹佳　陳加家　周國強　翁玉玲　趙毅

【摘要】 目的：探討鼻咽分泌物EB病毒抗體聯(lián)合檢測在鼻咽癌早期診斷中的作用。方法：課題組于2015年1月-2016年6月收治的鼻咽癌患者中選取60例作為研究對象，所有患者均給予對癥治療，并在治療前后分別收集患者的鼻咽分泌物，再采用EB病毒抗體聯(lián)合檢測方法對其VCA-IgA、EA-IgG、NA1-IgA、Rta-IgG表達水平進行檢測，以分析其早期診斷價值。結(jié)果：治療后，患者的VCA-IgA、EA-IgG、Rta-IgG表達水平均明顯下降，且隨治療時間的延長逐漸下降，與治療前相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。但治療前后NA1-IgA表達水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。4項指標(biāo)聯(lián)合檢測的陽性檢出率的準(zhǔn)確性為90.00%，明顯高于VCA-IgA、EA-IgG、NA1-IgA、Rta-IgG單一檢測的準(zhǔn)確性81.67%、83.33%、78.33%、80.00%，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：鼻咽分泌物EB病毒抗體聯(lián)合檢測在鼻咽癌早期診斷中，陽性檢出率準(zhǔn)確性較高，與單一檢測指標(biāo)相比，臨床優(yōu)勢顯著，值得推廣。

【關(guān)鍵詞】 鼻咽分泌物； EB病毒抗體； 聯(lián)合檢測； 鼻咽癌； 早期診斷

Combined Detection of EB Virus Antibodies in Nasopharyngeal Secretions and Its Role in Early Diagnosis of Nasopharyngeal Carcinoma/LI Zhe，LIU Shu-jia，CHEN Jia-jia，et al.//Medical Innovation of China，2017，14（30）：001-004

【Abstract】 Objective：To investigate the role of combined detection of EB virus antibodies in nasopharyngeal secretions in the early diagnosis of nasopharyngeal carcinoma（NPC）.Method：60 patients with NPC treated from January 2015 to June 2016 were selected by the research group as research targets，and all the patients were given corresponding treatment according to their specific symptoms.The patients nasopharyngeal secretions before and after treatment were collected and a joint assay of nasopharyngeal secretions EB virus antibody were carried out in terms of their expressive levels in VCA-IgA，EA-IgG，NA1-IgA and Rta-IgG to analyze its clinical value in the early diagnosis of NPC.Result：After treatment，the expression levels of VCA-IgA，EA-IgG and Rta-IgG in patients decreased significantly，and gradually decreased with the extension of treatment time，compared with before treatment，the differences were statistically significant（P<0.05）.However，there was no significant difference in the expression level of NA1-IgA between before and after treatment（P>0.05）.The accuracy of the positive detection rate of 4 indicators was 90.00%，significantly higher than 81.67%，83.33%，78.33%，80.00% of VCA-IgA，EA-IgG，NA1-IgA，Rta-IgG，the differences were statistically significant（P<0.05）.Conclusion：Nasopharyngeal secretion EB virus antibody combined detection in the early diagnosis of nasopharyngeal carcinoma，the positive rate of accuracy is higher，compared with the single detection index，the clinical advantages are significant，it is worth promoting.

【Key words】 Nasopharyngeal secretions； EB virus antibody； Joint detection； NPC； Early diagnosis

First-authors address：Wanjiang Hospital of Dongguan City，Dongguan 523040，Chinaendprint

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.30.001

迄今為止，鼻咽癌的具體發(fā)病原因及致病機制尚未完全闡明，但其發(fā)病率卻呈逐年上升趨勢[1]。越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，鼻咽癌患者中的EB病毒感染率較高，甚至普遍[2-3]。對此，有學(xué)者認(rèn)為，EB病毒或許與鼻咽癌的發(fā)生、進展及預(yù)后有關(guān)[4]。并且，關(guān)于EB病毒與鼻咽癌的關(guān)系已引起了人們的廣泛關(guān)注，是目前此領(lǐng)域的研究熱點[5]。鑒于此，本研究在“EB病毒感染或可誘發(fā)鼻咽癌”論點的基礎(chǔ)上，采用EB病毒抗體聯(lián)合檢測60例鼻咽癌患者的鼻咽分泌物，進而探討其鼻咽分泌物EB病毒抗體聯(lián)合檢測在鼻咽癌早期診斷的作用。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究所選的60例研究對象，均為2015年1月-2016年6月收治的鼻咽癌患者，納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）所有患者均經(jīng)病理證實為鼻咽癌患者[6]；（2）所有患者均給予對癥治療，即根治性放療；（3）排除其他不宜研究的特殊患者，如合并有其他鼻咽部疾病者、認(rèn)知障礙者、依從性較差者等。其中男35例，女25例；年齡24～70歲，平均（48.16±4.75）歲；臨床分期Ⅰ期9例，Ⅱ期36例，Ⅲ期15例。告知患者及家屬研究實情，并使患者自愿簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 依據(jù)患者的實際病情給予患者有針對性的治療，首選放射治療，將對周圍正常組織具有較小的損傷、較好的療效的放射線選取出來。對患者的心理進行調(diào)適，給予患者對癥支持治療。采用新近放療新技術(shù)，給予患者腔內(nèi)近距離放療（22例）、伽馬刀治療（16例）、三維適行放療（13例）、適形強調(diào)放療（9例），促進患者生存率的提升。晚期可運用全身療法對患者進行治療，讓患者口服或給予患者靜脈注射或肌肉注射環(huán)磷酰胺、塞替派、氟尿嘧啶等抗癌藥物。依據(jù)患者的具體情況在放療前后給予患者中醫(yī)中藥治療或免疫療法治療等。療程為2個月。

1.2.2 檢測方法 治療前及治療后7、30、60 d時，分別收集患者的鼻咽分泌物，取得分泌物樣品后立即送實驗室檢測，再采用酶聯(lián)免疫吸附劑測定法（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）對其鼻咽分泌物EB病毒VCA-IgA、EA-IgG、NA1-IgA、Rta-IgG表達水平進行檢測。檢驗所用設(shè)備酶標(biāo)儀是Thermo，型號MK3；洗板機為鄭州基波新科技有限公司生產(chǎn)，型號JIBO；檢測試劑為北京貝爾生物工程有限公司生產(chǎn)EB病毒檢查試劑，生產(chǎn)批號20161201，所有操作均嚴(yán)格按照試劑說明書進行規(guī)范操作，且經(jīng)多年臨床實踐，未發(fā)現(xiàn)有潛在風(fēng)險。

1.3 觀察指標(biāo) VCA-IgA、EA-IgG、NA1-IgA、Rta-IgG的表達水平均采用相對A值（rA值）進行表示[7]，并對其檢測結(jié)果予以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

1.4 診斷標(biāo)準(zhǔn) 詳細(xì)記錄所有患者的鼻咽分泌物EB病毒抗體檢測結(jié)果，以病理診斷為“金標(biāo)準(zhǔn)”來計算其陽性檢出率的準(zhǔn)確性。準(zhǔn)確性=（陽性檢出例數(shù)/病理確診例數(shù)）×100%。其中，陽性診斷標(biāo)準(zhǔn)：（1）若VCA-IgA>0.2、EA-IgG>0.2、NA1-IgA>0.5、Rta-IgG>0.06，即視為單一指標(biāo)陽性；（2）若聯(lián)合檢測4項指標(biāo)中有1項或多項呈陽性，則視為聯(lián)合檢測陽性[8]。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行處理。計量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗；計數(shù)資料用（%）表示，比較采用 字2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療前后VCA-IgA、EA-IgG、NA1-IgA、Rta-IgG

表達水平比較 治療后，患者的VCA-IgA、EA-IgG、Rta-IgG表達水平均明顯下降，且隨治療時間的延長逐漸下降，與治療前相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。但治療前后NA1-IgA的表達水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2.2 聯(lián)合檢測與單一檢測的準(zhǔn)確性比較 VCA-IgA、EA-IgG、NA1-IgA、Rta-IgG聯(lián)合檢測的準(zhǔn)確性明顯高于單一檢測指標(biāo)，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表2。

3 討論

鼻咽癌（Carcinoma of nasopharynx）是一種發(fā)生于人體鼻咽黏膜的惡性腫瘤，男性發(fā)病率是女性的2～3倍[9]，且以40～50歲中年人為主要高發(fā)群體，近年來有呈年輕化的發(fā)展趨勢。目前認(rèn)為，其病因與種族易感性、遺傳及EB病毒感染等有關(guān)[10]。然而，由于鼻咽部位置隱蔽，且早期癥狀不具典型性，多以鼻塞、流鼻涕、涕中帶血、聽力下降為主要癥狀，故往往無法引起患者的重視，加之早期診斷不易，從而容易造成診斷延誤或漏診。

文獻[11]研究顯示，EB病毒感染是鼻咽癌的重要誘因之一，而絕大多數(shù)鼻咽癌患者體內(nèi)都存在EB病毒抗體。因此，有學(xué)者認(rèn)為，定量測定患者或疑似患者的血清EB病毒抗體可作為早期診斷或篩查鼻咽癌的手段之一[12]。文獻[13]明確指出：血清EB病毒抗體對鼻咽癌早期篩查有積極作用。但是，也有報道稱，人體鼻咽分泌物（唾液、咽拭子等）中也檢測到EB病毒抗體[14]，而關(guān)于“鼻咽分泌物EB病毒抗體與鼻咽癌診斷”方面卻鮮有報道。

對此，本研究通過采集鼻咽癌患者治療前后的鼻咽分泌物，并應(yīng)用ELISA法對其EB病毒抗體VCA-IgA、EA-IgG、NA1-IgA、Rta-IgG的表達水平進行測定，結(jié)果顯示：治療前，EB病毒抗體的4項指標(biāo)均高于正常值，但隨著治療時間延長，VCA-IgA、EA-IgG、Rta-IgG表達水平均明顯下降（P<0.05），而NA1-IgA則無明顯變化（P>0.05）；并且在陽性檢出率的準(zhǔn)確性方面，4項指標(biāo)聯(lián)合檢測明顯優(yōu)于單一指標(biāo)（P<0.05），和文獻[15-16]研究結(jié)果一致。這說明，鼻咽分泌物EB病毒抗體VCA-IgA、EA-IgG、Rta-IgG、NA1-IgA聯(lián)合檢測在鼻咽癌的早期診斷與治療預(yù)后方面，有著積極的作用，值得進一步研究、探索。endprint

然而，在實際應(yīng)用中，臨床對EB病毒抗體用于評估鼻咽癌患者的治療預(yù)后，仍存在較大的爭議，至今尚無統(tǒng)一定論[17-20]。但不可否認(rèn)的是，聯(lián)合檢測鼻咽分泌物EB病毒抗體有助于提高鼻咽癌早期診斷的陽性檢出率，準(zhǔn)確性較高，這不失為一條切之可行、行之有效的優(yōu)秀篩查方法。

綜上所述，早期診斷或篩查鼻咽癌，可優(yōu)先考慮鼻咽分泌物EB病毒抗體聯(lián)合檢測的方法，不僅檢出率高、安全可靠，而且對患者無創(chuàng)傷性，更容易被患者所接受。同時，還能為臨床醫(yī)生的早期診斷、治療效果、預(yù)后評估提供參考依據(jù)，從而使其患者能夠得到更好診治，保障患者預(yù)后。

參考文獻

[1]張曉琍，周建林，曹穎平，等.鼻咽癌篩查中三種EB病毒抗體檢測的應(yīng)用[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2015，38（2）：111-114.

[2]巫翠云，邱梅花.Rta-IgG：鼻咽癌診斷新指標(biāo)[C]//第九屆粵桂瓊檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議暨海南省醫(yī)學(xué)會檢驗醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會2015年學(xué)術(shù)年會論文集，2015：153-156.

[3]王盼盼，季明芳，吳標(biāo)華，等.鼻咽癌高發(fā)區(qū)人群患鼻咽癌風(fēng)險率的動態(tài)觀察[J].中華腫瘤防治雜志，2014，21（15）：1144-1147.

[4]蘇年華，季明芳，馮謙謹(jǐn)，等.鼻咽癌高發(fā)區(qū)胃癌患者血清中 EB 病毒抗體水平分析[J].右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2016，38（2）：146-149.

[5]譚珍連，王勇利，麥稚平，等.IgA/EBV-VCA陽性人群和鼻咽癌患者的EB病毒潛伏膜蛋白2特異性細(xì)胞免疫及EBV DNA載量檢測[J].中華實驗和臨床病毒學(xué)雜志，2016，30（5）：493-495.

[6]鄒喜，張緯建，洪金省，等.EBV VCA-IgA抗體在局部晚期鼻咽癌治療前后檢測的意義及與患者臨床特征的關(guān)系[J].保健醫(yī)學(xué)研究與實踐，2015，12（6）：36-39.

[7]連仕鋒，季明芳，吳標(biāo)華，等.EB病毒血清學(xué)篩查鼻咽癌高、中危人群的隨訪研究[J].中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2015，49（1）：26-30.

[8]許鎰洧，謝秀連，翟田田，等.Bmi-1自身抗體與EB病毒衣殼抗原IgA抗體聯(lián)合檢測診斷鼻咽癌的價值[J].中華實用診斷與治療雜志，2015，29（8）：812-814.

[9]鄧卓霞，翁敬錦，司勇鋒，等.廣西鼻咽癌高發(fā)區(qū)人群初篩后2年隨訪結(jié)果分析[J].廣西醫(yī)學(xué)，2016，38（4）：517-520.

[10]潘繼釗，黃海深，朱苑霞，等.探討三種EB病毒抗體檢測在鼻咽癌篩查中的臨床價值[J].中國醫(yī)藥科學(xué)，2016，6（19）：225-228.

[11]李仕偉，林艷麗，瞿衛(wèi)，等.探討EB病毒抗體對鼻咽癌篩查和療效的臨床價值[J].標(biāo)記免疫分析與臨床，2016，23（1）：113-114.

[12]王春陽，鄒學(xué)森.聯(lián)合檢測三種抗EB病毒抗體在鼻咽癌血清學(xué)診斷中的意義[J].吉林醫(yī)學(xué)，2016，37（7）：1739-1740.

[13] Liu Z，Ji M F，Huang Q H，et al.Two Epstein-Barr Virus-Related Serologic Antibody Tests in Nasopharyngeal Carcinoma Screening： Results From the Initial Phase of a Cluster Randomized Controlled Trial in Southern China[J].American Journal of Epidemiology，2013，177（3）：242-250.

[14]黃小顏，許琳，溫本，等.動態(tài)監(jiān)測EB病毒抗體對鼻咽癌的診治價值[J].中華實用診斷與治療雜志，2014，28（5）：498-499.

[15]婁雪菡.檢測血清EB病毒抗體對鼻咽癌的診斷價值[J].河南外科學(xué)雜志，2016，22（1）：54-55.

[16] Sasaki M M，Skol A D，Bao R，et al.Integrated Genomic Analysis Suggests MLL3 is a Novel Candidate Susceptibility Gene for Familial Nasopharyngeal Carcinoma[J].Cancer Epidemiology Biomarkers & Prevention，2015，24（8）：1222-1228.

[17] Xu T，Shen C，Zhu G，et al.Omission of Chemotherapy in Early Stage Nasopharyngeal Carcinoma Treated with IMRT： A Paired Cohort Study[J].Medicine，2015，94（39）：e1457.

[18] Zhang H F，Qin J J，Ren P F，et al.A panel of autoantibodies against multiple tumor-associated antigens in the immunodiagnosis of esophageal squamous cell cancer[J].Cancer Immunology Immunotherapy Cii，2016，65（10）：1233-1242.

[19] Zarzar M，Razak E，Htike Z Z，et al.Early Diagnosis of Non-Small-Cell Lung Carcinoma from Gene Expression Using t-Distributed Stochastic Neighbor Embedding[J].Advanced Science Letters，2015，21（11）：3550-3553.

[20] Kontny U，F(xiàn)ranzen S，Behrends U，et al.Diagnosis and Treatment of Nasopharyngeal Carcinoma in Children and Adolescents-Recommendations of the GPOH-NPC Study Group[J].Klinische Padiatrie，2016，228（3）：105-112.

（收稿日期：2017-08-04） （本文編輯：張爽）endprint