HPV DNA檢測在宮頸病變篩查中的價值

彭端亮，劉成桂，鄧 耀，鐘浩宇，孔 婷

(1.四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院/四川省人民醫(yī)院城東病區(qū)檢驗科,成都 610101；2.成都市婦女兒童中心醫(yī)院檢驗科 610091)

HPV DNA檢測在宮頸病變篩查中的價值

彭端亮1，劉成桂2，鄧 耀2，鐘浩宇1，孔 婷1

(1.四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院/四川省人民醫(yī)院城東病區(qū)檢驗科,成都 610101；2.成都市婦女兒童中心醫(yī)院檢驗科 610091)

宮頸腫瘤；人乳頭狀瘤病毒；宮頸病變；癌變前期；篩查

宮頸癌是我國常見的女性生殖道惡性腫瘤，具有發(fā)病率和病死率較高的特點(diǎn)。調(diào)查研究顯示，宮頸癌的發(fā)病率位于女性惡性腫瘤的第2位，僅次于乳腺癌，我國每年新發(fā)病例約13萬，發(fā)病率逐年增加并且向低齡化發(fā)展，嚴(yán)重危及女性生殖功能和生命[1]。近年來研究顯示，宮頸癌的發(fā)病機(jī)制繁雜，與人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染、營養(yǎng)不良和不良性行為等因素有關(guān)。其中HPV感染是引起宮頸癌變的一個重要誘因，及早檢測和發(fā)現(xiàn)HPV是防治宮頸癌的重要手段。有關(guān)報道顯示，患者處于宮頸癌的癌前病變期時可以進(jìn)行有效治療，而且越早發(fā)現(xiàn)疾病治療效果越好。因此，堅持早診斷、早預(yù)防、早治療的原則，有利于控制宮頸癌的發(fā)展，降低癌癥患者的病死率[2]。目前HPV DNA檢測技術(shù)已逐步應(yīng)用于宮頸病變的篩查，并取得良好的應(yīng)用效果。因此，本研究主要對HPV DNA檢測在宮頸病變篩查中的應(yīng)用價值進(jìn)行分析，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 本研究選擇2014年1月至2016年12月到四川省人民醫(yī)院接受宮頸病變篩查的2 852例患者為研究對象，年齡18～58歲，平均(43.25±5.60)歲；患者就診原因為宮頸糜爛、陰道炎、盆腔炎、陰道不規(guī)則出血等。所有研究對象均無子宮頸切除或其他手術(shù)的病史，無盆腔放射治療史等。所有患者在就診后均進(jìn)行HPV DNA檢測，再行陰道病理檢查以確診。研究對象均簽署知情同意書，本研究經(jīng)該院倫理委員會審核并通過。

1.2方法

1.2.1HPV DNA檢測 使用HPV DNA檢測專用的采樣刷在患者宮頸口內(nèi)采集樣品，將樣品刷保存于標(biāo)本瓶中儲存，并立即送檢。送檢樣品提取DNA后，使用上海之江生物科技公司生產(chǎn)的HPV DNA試劑盒進(jìn)行檢測，該試劑含有4組寡核苷酸混合物，可檢測13種高危型HPV，即A/E可對16、56、31亞型進(jìn)行檢測，B/F可對18、52、58、68亞型進(jìn)行檢測，C/G可對45、33、35亞型進(jìn)行檢測，D/H可對39、51、59亞型進(jìn)行檢測。使用美國ABI7500實(shí)時熒光定量PCR儀，應(yīng)用PCR結(jié)合Taqman技術(shù)，對特異性DNA核酸片段進(jìn)行分型定性檢測，所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書的要求進(jìn)行。高危型HPV DNA檢測陽性病例以高于1×104copies/mL為標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.2病理活檢 所有患者均進(jìn)行常規(guī)取材活檢，送病理科進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。如果陰道鏡檢查時，患者宮頸內(nèi)未發(fā)現(xiàn)可疑病變，則于患者宮頸轉(zhuǎn)化區(qū)實(shí)施多點(diǎn)活檢，送病理組織學(xué)檢查，并以此結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)。病理結(jié)果可分為：(1)不典型鱗狀細(xì)胞(ASCUS)；(2)低度鱗狀上皮內(nèi)病變(LSIL)，主要包括HPV感染引起的細(xì)胞改變及輕度不典型增生病變(CINⅠ)；(3)高度鱗狀上皮內(nèi)病變(LSIL)，主要包括中度不典型增生(CINⅡ)、重度不典型增生(CINⅢ)、鱗癌(SCC)。其中，CINⅠ及以上判定為病理組織學(xué)陽性。

2 結(jié) 果

2.1不同年齡組HPV DNA篩查結(jié)果 18～<35歲組患者的HPV陽性率明顯高于35～<50歲組和50～58歲組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=89.32、21.32，P<0.05)；而35～<50歲組患者的HPV陽性率與50～58歲組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=3.21，P>0.05)，見表1。

表1 不同年齡組HPV DNA篩查結(jié)果[n(%)]

*：P<0.05，與18～<35歲組比較

2.2不同區(qū)域(城市和農(nóng)村)HPV DNA篩查結(jié)果 城市組患者的HPV陽性率明顯低于農(nóng)村組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=85.48，P<0.05)，見表2。

表2 不同區(qū)域(城市和農(nóng)村)HPV DNA篩查結(jié)果[n(%)]

2.3不同體質(zhì)量(正常體質(zhì)量和體質(zhì)量超標(biāo))HPV DNA篩查結(jié)果 正常體質(zhì)量組和體質(zhì)量超標(biāo)組HPV陽性率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=1.39，P>0.05)，見表3。

表3 不同體質(zhì)量HPV DNA篩查結(jié)果[n(%)]

2.4HPV陽性患者的病理檢查結(jié)果 500例HPV DNA篩查陽性病例進(jìn)行組織病理學(xué)檢查，其中有349例(56.40%)為炎癥，143例(28.60%)為癌變前期；8例(1.60%)為癌癥。通過病理組織檢查HPV DNA陰性患者，其中2 331例(99.11%)為炎癥；21例(0.89%)為癌變前期；未在HPV陰性患者中檢出癌癥病例。對于病理組織學(xué)檢查檢出的172例癌變前期或癌癥患者，HPV DNA篩查宮頸病變的靈敏度為87.79%(151/172)，特異度為86.98%(2 331/2 680)，陽性預(yù)測值為30.20%(218/500)，陰性預(yù)測值為99.11%(2 331/2 352)，漏診率為12.21%(21/172)，見表4。

表4 HPV陽性患者的病理檢查結(jié)果(n)

3 討 論

宮頸癌是我國常見的女性生殖道惡性腫瘤。目前流行病學(xué)調(diào)查和生物學(xué)研究表明，HPV病毒感染是宮頸癌及其癌前病變的一個重要的誘發(fā)條件，并認(rèn)為其是宮頸癌的主要病因和風(fēng)險標(biāo)志物。研究表明，從CINⅠ開始到發(fā)展為宮頸癌是一個較為漫長的過程，一般情況下，這一致癌過程約有20年，即使發(fā)展為浸潤癌也要8～12年[3]。因此，宮頸病變的早期診斷對于減少宮頸癌發(fā)病和死亡，提高患者生命安全具有重要的意義。目前研究表明，HPV是一種嗜鱗狀上皮性病毒群，屬于乳頭瘤空泡病毒A屬的球形DNA病毒，約有35種亞型，其中20種與腫瘤密切相關(guān)，13種為腫瘤高危亞型人乳頭狀瘤病毒(high risk-human papilloma virus，HR-HPV)，包括16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68亞型，這些亞型與宮頸癌變及宮頸上皮病變密切相關(guān)。已有研究證實(shí)，HR-HPV是引起宮頸癌及CIN的主要病因[4]。吸煙、不當(dāng)?shù)男陨睢m頸炎癥、荷爾蒙分泌異常、HPV感染等是發(fā)生宮頸病變的主要誘因；患者宮頸創(chuàng)傷，引起宮頸移行鱗狀上皮化增生；此外，宮頸在修復(fù)過程中受到HPV等不良因素的刺激，細(xì)胞分化不良，細(xì)胞核異常，導(dǎo)致宮頸上皮內(nèi)瘤變，逐漸發(fā)展成宮頸癌[5]。因此，通過檢測HR-HPV將有利于及早發(fā)現(xiàn)誘癌病毒，及早治療，使患者在最大程度上避免癌癥的發(fā)生。同樣慢性宮頸炎的致癌風(fēng)險也不容忽視。本研究結(jié)果表明，HPV DNA篩查宮頸病變的靈敏度為87.79%，特異度為86.98%，陽性預(yù)測值為30.20%，陰性預(yù)測值為99.11%，漏診率為12.21%。因此，HPV DNA篩查宮頸病變方法有效可行。

正常情況下，患者機(jī)體可以識別并清除感染的HPV，但隨著感染頻次的增多，宮頸病變的風(fēng)險也隨之增加。目前研究表明，HPV感染與患者的年齡、生活區(qū)域及身體狀況具有一定的關(guān)系，且該病毒具有較強(qiáng)的傳染性，HPV感染者及其攜帶者是主要的傳染源[6]。本研究篩查18～58周歲的宮頸糜爛、陰道炎、盆腔炎、陰道不規(guī)則出血等患者，探討不同年齡患者HPV陽性檢出率的差異，發(fā)現(xiàn)18～<35歲組患者的HPV陽性率明顯高于35～<50歲組和50～58歲組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；而35～<50歲組患者的HPV陽性率與50～58歲組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。18～<35歲組患者HPV陽性率達(dá)37.78%，而35～<50歲組和50～58歲組分別為12.57%和16.49%，表明HPV感染具有低齡化的趨勢，這與歐美國家HPV感染峰在低齡段(20歲)出現(xiàn)高峰后又下降，再隨年齡增加又上升的現(xiàn)象類似[7]。而本研究發(fā)現(xiàn)，城市組患者的HPV陽性率明顯低于農(nóng)村組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，可能與農(nóng)村婦女結(jié)婚較早、生育較多密切相關(guān)。有報道指出，女性過早性生活、懷孕次數(shù)多及生產(chǎn)較多等均能增加患者感染HR-HPV的風(fēng)險。也有報道指出，肥胖是癌癥的又一重要誘因，但是本研究并未發(fā)現(xiàn)肥胖與HR-HPV感染之間的關(guān)系[8]。年齡較小、居住農(nóng)村者是HPV感染高危人群。但是也有研究指出，過早性行為、性行為紊亂及宮頸糜爛等是導(dǎo)致宮頸癌的高發(fā)因素[9]。

有關(guān)研究表明，HPV DNA檢測能為宮頸病變的及時診治提供重要依據(jù)，因為其比宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢測更為靈敏，更為準(zhǔn)確，即使患者宮頸有少量的病毒存在也能被檢測，具有早期警示和方便跟蹤檢測的意義，此外對患者不造成宮頸損傷[10]。目前關(guān)于HPV DNA檢測的靈敏度和特異度并未達(dá)成一致的評定，但是就文獻(xiàn)報道和本研究結(jié)果表明，HPV DNA檢測的靈敏度可能在80%～95%，特異度可能在80%～95%，高于巴氏涂片的靈敏度(50%左右)，但不及其特異度(約為94%)[11]。因此，歐美發(fā)達(dá)國家常建議將HPV DNA檢測和巴氏涂片結(jié)合作為宮頸病變篩查的方案。但最終的確診仍以病理組織學(xué)結(jié)果為準(zhǔn)。

宮頸癌變是一個可以預(yù)防的過程，其病因為HR-HPV持續(xù)感染。因此，在疾病普查中醫(yī)生做到認(rèn)真普查和隨診，積極阻斷宮頸癌前病變早期的炎癥，可以有效地阻斷病程，降低癌癥的發(fā)病風(fēng)險[12]。患者應(yīng)注意積極配合醫(yī)生治療，注重個人衛(wèi)生與健康，有效地遏制癌前病變的發(fā)展，早期診斷、早期干預(yù)，這是世界衛(wèi)生組織腫瘤防治的宗旨。對于有3年以上性行為或21歲之前有性行為或?qū)m頸糜爛的女性應(yīng)該接受宮頸病變篩查，以預(yù)防宮頸癌的發(fā)生；通過有效的性措施避免感染，如使用避孕套等；也可以通過攝入富含維生素和葉酸的食物來預(yù)防；同樣也可以通過注射HPV疫苗進(jìn)行預(yù)防。在臨床治療過程中，患者應(yīng)避免性生活和大量的運(yùn)動，以防引起創(chuàng)面出血；同時在患者物理治療后也要避免性生活并使用陰道栓劑等藥物繼續(xù)治療，直到宮頸病變創(chuàng)面完全愈合。

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StudyonthevalueofHPVDNAdetectioninthescreeningofcervicallesions*

PengDuanliang1,LiuChenggui2,DenYao2,ZhongHaoyu1,KongTing1

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,EastBranch,SichuanAcademyofMedicalSciences&SichuanProvincialPeople′sHospital，Chengdu,Sichuan610101,China;2.DepartmentofClinicalLaboratory,Chengdu,SichuanWomen′s&Children′sCentralHospital,Chengdu,Sichuan610091,China)

[Abstract]ObjectiveTo investigate the effect of human papilloma virus (HPV) DNA detection on cervical cancer and its precancerous lesions screening.MethodsA total of 2 852 patients participated in cervical screening in Sichuan Provincial People′s Hospital from January 2014 to December 2016 were enrolled.The HPV DNA testing and pathological biopsy were conducted in all patients,and the pathological examination results were defined as the gold standard.The influences of age,regions of residence (rural and urban) and obesity on the positive rate of HPV DNA were analysed.The results of HPV DNA testing in different pathological types were compared,and the sensitivity,specificity,positive predictive value,negative predictive value of of HPV DNA testing were analysed,as well.ResultsThe positive rate of HPV DNA in the 18-<35 age group was significantly higher than that in the 35-<50 age group and 50-58 age group,the differences were statistically significant (P<0.05).There was no statistically significant difference in positive rate of HPV DNA between the 35-<50 age group and 50-58 age group (P>0.05).The positive rate of HPV DNA of patients in urban areas was significantly lower than that of those patients in rural areas (P<0.05),while no statistically significant difference was found in the positive rate of HPV DNA between patients with normal weight and patients whose weight exceeded the standard (P>0.05).Among patients with positive HPV DNA testing results,the detection rate of cervical cancer and its precancerous lesions based on pathological examination was 1.60% and 28.60%,respectively.The sensitivity,specificity,positive predictive value,negative predictive value and missed diagnosis rate of HPV DNA testing was 87.79%,86.98%,30.20%,99.11% and 12.21%,respectively.ConclusionHPV DNA detection has a high sensitivity and specificity in cervical screening.

uterine cervical neoplasms;human papilloma virus;cervical lesions;precancerous lesions;screening

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.29.011

四川省衛(wèi)生和計劃生育委員會科研課題資助項目(16PJ472)。

彭端亮(1977-)，主管技師，本科，主要從事臨床分子生物學(xué)檢驗的研究。

目的探究人乳頭狀瘤病毒(HPV) DNA檢測對宮頸癌及其癌變前期的篩查效果。方法對2014年1月至2016年12月到四川省人民醫(yī)院接受宮頸病變篩查的2 852例患者進(jìn)行HPV DNA檢測，同時進(jìn)行病理活檢，并以病理檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)。考察不同年齡、區(qū)域(農(nóng)村和城市)和肥胖對HPV DNA陽性檢出率的影響，同時比較不同病理分型HPV DNA檢測結(jié)果，分析HPV DNA檢測的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值及漏診率。結(jié)果18～<35歲組患者的HPV陽性率明顯高于35～<50歲組和50～58歲組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；35～<50歲組患者的HPV陽性率與50～58歲組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。城市組患者的HPV陽性率明顯低于農(nóng)村組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；正常體質(zhì)量組和體質(zhì)量超標(biāo)組HPV陽性率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。HPV DNA篩查陽性患者病理檢查癌變前期檢出率為28.60%，癌癥檢出率為1.60%；HPV DNA檢測靈敏度為87.79%，特異度為86.98%，陽性預(yù)測值為30.20%，陰性預(yù)測值為99.11%，漏診率為12.21%。結(jié)論HPV DNA檢測對于宮頸病變篩查具有較高的靈敏度和特異度。

R737.33

A

1671-8348(2017)29-4067-03

2017-01-18

2017-04-06)