泰山野生白蘇葉揮發油成分GC-MS分析與抑菌活性的研究

鐘 穎

（湖南省湘西自治州人民醫院藥劑科，湖南 湘西 416000）

泰山野生白蘇葉揮發油成分GC-MS分析與抑菌活性的研究

鐘 穎

（湖南省湘西自治州人民醫院藥劑科，湖南 湘西 416000）

目的 研究泰山野生白蘇葉揮發油成分和抑菌的活性。方法 提取白蘇葉揮發油進行GC-MS分析，選取幾種常見的細菌和真菌，用平板打孔法測定揮發油的抑菌活性。結果 認定40種化合物共占揮發油總量的98.46%，含量最多的5種化合物分別為2，6-二甲基-6-（4-甲基-3-戊烯基）-雙環[3.1.1]庚-2-烯、紫蘇酮、戊基苯酚、石竹烯、芳樟醇，分別占到了18.22%、18.15%、17.31%、14.78%、7.68%，白蘇葉揮發油對4中菌的活性都具有一定的抑制作用，其中對紅色毛癬菌的抑制效果最大。結論 白蘇葉揮發油對細菌和真菌都有抑制作用，對紅色毛癬菌的抑制效果顯著。

白蘇葉；揮發油；GC-MS分析；抑菌活性

白蘇是唇形科紫蘇屬一年生草本植物，對于風寒感冒、咳嗽等病癥，能夠起到很好的效果[1-3]，由于白蘇受到季節影響較大，提取方法和環境的不同，都會影響白蘇的活性和成分。

1 實驗部分

1.1 材料和儀器：本文選取204年9月份采自泰山的野生白蘇，經過相關專家鑒定為白蘇，摘下白蘇的葉片陰干備用，同時選取大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌、紅色毛癬菌作為試驗菌種。GC-MS儀器選擇日本島津公司的氣相色譜-質譜聯用儀，色譜柱也選擇該公司的產品，具體的規格為30 mm×0.25 mm，0.5 μm，培養箱、工作臺、臺式冷凍恒溫振蕩器為實驗室現有的國產設備。

1.2 方法：首先將白蘇葉陰干搗碎，揮發油的提取根據《中國藥典》附錄XD揮發油測定法，白蘇葉的揮發油為亮黃色，密度略小于水，通常情況下揮發油的得率在1.5%左右，提取到揮發油后，用無水硫酸鈉干燥，然后放到棕色的瓶子中，恒溫4 ℃保存。在氣相色譜-質譜聯用分析中，進樣口的溫度為280 ℃，柱箱溫度保持40 ℃3 min，然后以每分鐘10 ℃的速度提高到120 ℃，再以每分鐘5 ℃的速度提高到230 ℃，載氣為氦氣，分流比為50∶1。質譜的條件中檢測電壓為800 V，離子源為EI，溫度為200 ℃，質量掃描范圍在30～400 amu。

抑菌活性的檢測首先制備菌懸濁液，真菌的濃度調整到2× 105～5×105 cfu/mL，細菌的濃度通常是真菌的10倍，然后用100 μL的懸濁液均勻涂抹在直徑為9 cm的瓊脂班上，在中間部位打一個直徑為3 mm的孔，加入5 μL的白蘇葉揮發油，設置對照板，中間加同樣容量的蒸餾水，放入到恒溫培養箱中，大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的溫度為37 ℃，時間為20 h，白色念珠菌的溫度為35 ℃，時間為36 h，紅色毛癬菌的溫度為28 ℃，時間為14 d。

2 結 果

通過GC-MS方法對白蘇葉揮發油的成分進行分析，從樣品中共得到了52個峰，通過軟件數據庫的檢索，結合相關的文獻，認定了40個峰的化合物，用面積歸一化法定量分析，具體的百分比含量見表1。

通過平板打孔法對白蘇葉揮發油的抑菌活性進行測定，詳細的抑菌圈直徑見表2。

表2 白蘇葉揮發油對菌種的抑菌圈直徑對比

3 討 論

本文對泰山野生白蘇葉揮發油成分測定，共得到40種化合物，其中含量較多的2，6-二甲基-6-（4-甲基-3-戊烯基）-雙環[3.1.1]庚-2-烯、紫蘇酮等幾種化合物，與相關文獻報道的一致，但是具體含量有一定的差異，導致這種結果的因素主要有遺傳因素、白蘇的生長環境、采摘季節和提取方法等。在抑菌的活性方面，通過選取幾種常見的細菌和真菌，發現白蘇葉揮發油對選取的菌都有抑制作用，對于真菌的抑制作用更加明顯，分析可能與細胞壁的成分有關，詳細的抑制機制等，還需要深入的研究。

表1 白蘇葉揮發油的成分

[1] 邱琴,凌建亞,張莉,等.不同方法提取的白蘇葉揮發油的氣質聯用成分分析[J].藥物分析雜志,2006,26(1):114-119.

[2] 吳玉蘭,丁安偉,馮有龍.荊芥及其相關藥材揮發油的成分研究[J].中草藥,2000,31(12):894-896.

[3] 蔣翔,曹恒,劉湘博,等.野生白蘇子中揮發油的研究[J].中國實驗方劑學雜志,2010,16(11):56-60.

R282.710.5

B

1671-8194（2017）18-0037-02