Survivin和MMP—11在宮頸鱗癌中的表達及其相關性研究

王連云　　張普　　陳文兵　　熊文棟　　淮麗　　耿筱虹

[摘要] 目的 通過檢測生存素（Survivin）、基質金屬蛋白酶-11（matrix metalloproteinases-11，MMP-11）在宮頸鱗癌組織中的表達，探討兩者與宮頸鱗癌的臨床病理特征關系及兩者的相關性。 方法 采用免疫組化方法檢測68例宮頸鱗癌組、27例宮頸上皮內瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）組和16例正常宮頸組中Survivin、MMP-11的表達情況，分析各組宮頸組織中Survivin及MMP-11的陽性表達與臨床病理之間的關系。 結果 Survivin及MMP-11在宮頸鱗癌組中的陽性表達率（80.88%，69.12%）高于正常宮頸組（6.25%，6.25%）和CIN組（37.04%，40.74%），三組比較差異有統計學意義（P<0.01）。Survivin及MMP-11的陽性表達與宮頸鱗癌的臨床分期、組織病理學分期及是否有淋巴結轉移有關（P<0.05）。宮頸鱗癌組中Survivin與MMP-11的陽性表達呈正相關（r=0.609，P<0.05）。 結論 Survivin及MMP-11在宮頸鱗癌組織中呈高表達，兩者陽性表達在宮頸鱗癌的發生、發展過程中起重要作用；聯合檢測Survivin及MMP-11的表達可能對早期診斷宮頸鱗癌及對改善宮頸鱗癌的預后起到重要作用。

[關鍵詞] 宮頸癌；宮頸上皮內瘤變；生存素；基質金屬蛋白酶-11

[中圖分類號] R737.33 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701（2017）27-0026-04

Expression of Survivin and MMP-11 in cervical squamous cell carcinoma and correlation study

WANG Lianyun1 ZHANG Pu2 CHEN Wenbing1 XIONG Wendong1 HUAI Li1 GENG Xiaohong1

1.Department of Gynecology and Obstetrics，the Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University，Wenzhou 325027，China；2.Department of Pathology，the Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University，Wenzhou 325027，China

[Abstract] Objective To investigate the expression of Survivin and matrix metalloproteinase-11（MMP-11） in the tissues of cervical squamous cell carcinoma， to explore the relationship between the two and the clinicopathological features of cervical squamous cell carcinoma and the correlation between them. Methods The expression of Survivin and MMP-11 in 68 cases of cervical squamous cell carcinoma group， 27 cases of cervical intraepithelial neoplasia（CIN） group and 16 cases of normal cervical group were detected by immunohistochemistry. The relationship between the positive expression of Survivin and MMP-11 in cervical tissues and clinicopathological features was analyzed in each groups. Results The positive expression rate of Survivin and MMP-11 in cervical squamous cell carcinoma group（80.88%，69.12%）was higher than that in normal cervical group（6.25%，6.25%）and CIN group（37.04%，40.74%）. The differences were statistically significant among the three groups（P<0.01）. The positive expression of Survivin and MMP-11 was related to the clinical staging， histopathological staging and lymph node metastasis of cervical squamous cell carcinoma（P<0.05）. There was a positive correlation between the expression of Survivin and MMP-11 in cervical squamous cell carcinoma group（r=0.609， P<0.05）. Conclusion Survivin and MMP-11 are highly expressed in cervical squamous cell carcinoma， and the positive expression of both plays an important role in the development and progression of cervical squamous cell carcinoma. The combined detection of Survivin and MMP-11 expression may play an important role in the early diagnosis of cervical squamous cell carcinoma and the prognosis of cervical squamous cell carcinoma.endprint

[Key words] Cervical cancer；Cervical intraepithelial neoplasia（CIN）；Survivin；Matrix metalloproteinase-11（MMP-11）

宮頸癌是世界上女性惡性腫瘤中發病率第二位的腫瘤，發病人數日益增加，且發病年齡呈年輕化趨勢。在我國，宮頸癌的發病通常在35歲以后，高峰年齡在45～50歲之間；每年大約有6萬左右的新發病例，且發病率和死亡率仍在不斷上升，已嚴重威脅到女性的健康和生命[1-3]。宮頸癌中75%～80%為宮頸鱗狀細胞癌。宮頸癌的發生、發展是細胞增殖相關基因、凋亡相關基因以及轉移相關基因等多基因作用及表達的結果，而轉移則是導致惡性腫瘤難以治療的重要原因之一，其發生是多階段的。本研究通過免疫組織化學方法檢測Survivin及MMP-11在宮頸鱗癌組織、宮頸上皮內瘤變組織和正常宮頸組織中的表達，探討Survivin及MMP-11與宮頸鱗癌發生、發展的關系及臨床意義，并探討兩者之間的關系，以期為宮頸鱗癌發病機制的研究及尋求新的治療宮頸鱗癌靶點提供理論依據。現報道如下。

1資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2014年1月～2016年10月存檔的石蠟包埋宮頸鱗癌組織68例為研究對象，設為宮頸鱗癌組，并選擇同期在門診行宮頸活檢或LEEP刀診斷為CIN的患者27例（其中CIN Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各9例）為CIN組及住院患者中因子宮肌瘤或子宮腺肌癥等非宮頸疾病行全子宮切除術的正常宮頸組織16例為正常宮頸組；所有組織標本均經病理組織學確診。患者年齡33～72歲，平均48歲。所有鱗癌患者術前均未行放、化療等治療。所有病理切片由兩位經驗豐富的病理科醫師共同確認。

1.2 方法

全部標本使用10%甲醛固定，石蠟包埋，4 μm連續切片，行HE染色，采用免疫組織化學SP法檢測所有標本，按免疫組化試劑盒說明進行操作（試劑盒為福建邁新生物開發有限公司產品）。試劑Survivin購自福建邁新生物開發有限公司；試劑MMP-11購自北京博奧森生物技術有限公司。

1.3 觀察指標及判定標準

Survivin及MMP-11的陽性表達均以細胞漿為主，Survivin也可見于細胞核的表達，而MMP-11細胞核不表達。兩者的表達結果均表現為黃色、棕黃色或棕褐色顆粒。判定標準：細胞核或細胞質內出現黃色顆粒視為陽性，隨機觀察5個高倍視野。①0分：陽性細胞數≤5%；②1分：陽性細胞數在6%～25%之間；③2分：陽性細胞數在26%～50%之間；④3分：陽性細胞數在51%～75%之間；⑤4分：陽性細胞數>75%。陽性強度：①1分：黃色；②2分：棕黃色；③3分：棕褐色。兩項積分相乘，0分為陰性（-），1～4分為弱陽性（+）；5～8分為中等陽性（++）；9～12分為強陽性（+++）。

1.4統計學方法

運用SPSS 17.0統計學軟件對所得數據進行處理，計量資料采用t檢驗；計數資料采用χ2 檢驗或Fisher精確概率法；Survivin和MMP-11兩者之間相關性采用Spearman 等級相關分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 Survivin及MMP-11在不同宮頸組織中的表達

本研究顯示Survivin及MMP-11均在宮頸鱗癌組中的陽性表達率最高，在CIN組中次之，在正常宮頸組中表達率最低，三組比較差異均有統計學意義（P<0.01）。

2.2 Survivin及MMP-11在宮頸鱗癌組織中表達與臨床病理特征的關系

Survivin的陽性表達與宮頸鱗癌患者的臨床分期、組織病理學分級及是否有淋巴結轉移有關，差異有統計學意義（P<0.05），而與年齡、是否有脈管浸潤無相關性（P>0.05）。MMP-11的陽性表達僅與臨床分期和是否有淋巴結轉移有相關性（P<0.05），而與年齡、組織病理學分級及是否有脈管浸潤無相關性（P>0.05）。

2.3 宮頸鱗癌組中Survivin和MMP-11表達的相關分析

分析Survivin和MMP-11在宮頸鱗癌組中陽性表達情況，發現宮頸癌組中Survivin及MMP-11陽性表達呈正相關（r=0.609，P<0.05）。

3 討論

3.1 Survivin與宮頸鱗癌

Survivin是到目前為止發現的分子量最小但作用最強的凋亡抑制因子，其基因定位于人類17號染色體，其生物學功能主要表現為對細胞凋亡的抑制、參與細胞周期的調控及參與血管的生成等[4-7]，其與腫瘤的發生、發展、轉移及預后有著密切的關系。在胚胎時期、胎兒發育過程中及在未分化的成熟組織中有表達，在正常成人組織及成人終末分化的成熟組織（除胸腺、生殖腺）中不表達或極低表達，而在多種腫瘤組織中有著較高表達[8-10]。本實驗檢測了Survivin蛋白在正常宮頸組織、CIN組織及宮頸鱗癌組織中的表達情況，結果發現，Survivin蛋白在正常宮頸表達極少，僅1例，且為弱陽性表達，而在CIN Ⅰ～Ⅲ級和宮頸鱗癌中的陽性表達逐漸增高，三者比較差異有統計學意義，與有些研究[11-13]結果一致。說明Survivin在正常宮頸演變至CIN，以及最終發展為宮頸癌的過程中，表現出一種漸進的表達過程，可能與Survivin在宮頸鱗癌發生、發展過程中抑制腫瘤細胞凋亡作用減弱導致腫瘤細胞的失控性生長有關，表明Survivin對宮頸鱗癌的發生、發展有著重要作用。同時本研究結果還顯示，伴隨著宮頸鱗癌臨床分期的進展、腫瘤細胞惡性程度的升高及腫瘤轉移的發生，Survivin的表達率及陽性程度亦明顯增高，該結果與丁玉梅等[14]的研究結果相似。說明Survivin的陽性表達與宮頸鱗癌的發生、發展及轉移有著密切的關系，其高表達預示著宮頸鱗癌惡性程度的升高及轉移的發生，使腫瘤的預后更加不良。上述結果表明Survivin有可能成為協助宮頸鱗癌早期診斷及判斷患者預后的一項重要指標，檢測Survivin的表達可幫助臨床早期診斷宮頸鱗癌，從而改善患者的預后。endprint

3.2 MMP-11與宮頸鱗癌

基質金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMP）是一類鋅離子依賴的參與細胞外基質降解的內切酶家族，其包含多個成員，有著不同的結構和功能[15]。MMP-11 是由Basset P等[16]于1999年首先發現，由于其和先前發現的基質分解素有著相似的結構，被命名為基質分解素-3。目前的研究表明，MMP-11表達的上調與胃癌、乳腺癌、喉癌等多種惡性腫瘤的發生、發展、轉移有著密切的關系[17-19]。本研究通過檢測MMP-11在正常宮頸組織、CIN組織及宮頸鱗癌組織中的表達，發現隨著宮頸病變的進展，MMP-11的表達明顯上升，宮頸鱗癌組織中MMP-11陽性率（69.12%）顯著高于CIN（40.74%）及正常子宮頸組織（6.25%），其差異有統計學意義（P<0.05），與李本英等[20]的研究結果一致，同時對MMP-11 的表達與宮頸鱗癌臨床特征相關性的分析可以看出，MMP-11 的表達與臨床分期及是否有淋巴結轉移有相關性（P<0.05），而與患者年齡、組織病理學分級及是否有脈管浸潤無關（P>0.05）。這表明MMP-11的高表達與宮頸鱗癌的發生、發展及轉移有一定的相關性，其可能促進了宮頸鱗癌的進展及轉移，因此檢測MMP-11為判斷腫瘤的惡性程度、預測子宮頸癌的分期或轉移提供了參考依據。

3.3 Survivin和MMP-11表達的相關性

本研究結果還顯示了Survivin和MMP-11在宮頸鱗癌組織中的表達呈正相關（P<0.05），提示Survivin和MMP-11兩者在引起宮頸鱗癌細胞的惡性增殖的同時抑制了腫瘤細胞的凋亡，二者對宮頸鱗癌細胞惡性增殖及抑制其凋亡方面有協同作用，因此聯合檢測Survivin和MMP-11的表達，對早期發現、早期處理宮頸鱗癌，改善宮頸鱗癌的預后有著重要的意義。

綜上所述，Survivin和MMP-11在正常宮頸、CIN及宮頸鱗癌組織中的表達逐漸升高，兩者可能參與了宮頸鱗癌的發生、發展及轉移。二者的過度表達與宮頸鱗癌的惡性程度及浸潤程度密切相關，可作為早期診斷宮頸鱗癌的標記物，對早期診斷及改善宮頸鱗癌的預后有著積極的意義。

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（收稿日期：2017-07-16）endprint