脂氧素和烏司他丁對膿毒癥內皮細胞Ang表達的影響對比觀察及作用機制研究

李良　　蔣永潑　　楊英姿

[摘要] 目的 探討脂氧素和烏司他丁對膿毒癥內皮細胞Ang表達的影響對比觀察及作用機制。 方法 選取2016年1～12月我院收治的膿毒癥患者60例，隨機分為兩組，對照組應用烏司他丁治療，研究組應用脂氧素和烏司他丁治療，對比兩組患者的內皮細胞Ang表達情況。 結果 治療前兩組患者的Ang表達無明顯差異（P>0.05），治療后研究組Ang-1表達顯著高于對照組，Ang-2表達顯著低于對照組（P<0.05）；治療前兩組患者的腎功能指標無明顯差異（P>0.05），治療后研究組患者顯著優于對照組（P<0.05）；治療前兩組患者的凝血功能指標無明顯差異（P>0.05），治療后研究組患者顯著優于對照組（P<0.05）。 結論 膿毒癥患者應用脂氧素和烏司他丁治療，能夠降低內皮細胞Ang表達水平，改善患者的腎功能以及凝血功能相關指標，有利于改善患者預后及生活質量，臨床上值得推廣應用。

[關鍵詞] 脂氧素；烏司他丁；膿毒癥；內皮細胞Ang；作用機制

[中圖分類號] R969 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701（2017）27-0019-04

Effects of lipoxin and ulinastatin on Ang expression in endothelial cells of sepsis and its mechanism

LI Liang JIANG Yongpo YANG Yingzi

Department of Emergency Medicine，Taizhou Hospital of Zhejiang Province，Linhai 317000，China

[Abstract] Objective To investigate the effects of lipoxin and ulinastatin on Ang expression in endothelial cells of sepsis and its mechanism. Methods 60 patients with sepsis treated in our hospital from January to December 2016 were randomly divided into two groups. The control group was treated with ulinastatin. The study group was treated with lipoxin and ulinastatin. The Ang expression in endothelial cell between the two groups of patients was compared. Results There was no significant difference in Ang expression between the two groups before treatment（P>0.05）. The expression of Ang-1 in the study group was significantly higher than that in the control group after treatment. And the expression of Ang-2 in the study group was significantly lower than that in the control group after treatment（P>0.05）. There was no significant difference in renal function between the two groups before treatment（P>0.05）. After treatment， the renal function of the study group was significantly better than that in the control group（P<0.05）. There was no significant difference in the coagulation function between the two groups before treatment（P>0.05）. After treatment， the coagulation function of the study group was significantly better than that in the control group（P<0.05）. Conclusion The application of lipoxin and ulinastatin in patients with sepsis can reduce the expression of angiotensin in endothelial cells， and can improve the renal function and coagulation function of patients. It is helpful to improve the prognosis and quality of life of patients and worthy of appling in clinical practice.

[Key words] Lipoxin；Ulinastatin；Sepsis；Endothelial cell Ang；Mechanism

膿毒癥指的是感染誘發的全身炎癥反應，嚴重情況下會導致患者出現多器官功能衰竭。膿毒癥是人體感染之后出現的抗炎反應及炎癥反應嚴重失衡的危重癥，其中老年人群的膿毒癥（MODS）發生風險顯著上升，如何避免膿毒癥惡化成為多器官功能障礙是臨床上危重癥治療的重要課題。Ang-1及Ang-2表達是膿毒癥患者的重要生物標志物。有研究在動物模型中發現，Ang-1能夠保護器官維持功能，而Ang-2與膿毒癥的程度存在密切的聯系[1]。烏司他丁對維持血管內皮細胞的功能有重要影響，是蛋白酶活性的常用抑制劑，而脂氧素有著理想的抗炎治療效果。我院在膿毒癥患者治療過程中聯合應用脂氧素和烏司他丁，現報道如下。endprint

1資料與方法

1.1一般資料

選取2016年1～12月我院收治的膿毒癥患者60例，納入標準：患者的體溫超過38℃或者低于36℃；患者額度心率超過 90 次/min；患者PaCO2（二氧化碳分壓）低于4.0 kPa；患者的白細胞數超過11.0×109/L或低于3.0×109/L[2]。排除標準：合并HIV患者；長期應用強的松患者；妊娠哺乳期女性[3]。將患者隨機分為兩組，對照組30例，男18例，女12例，年齡19～76歲，平均（41.2±2.6）歲；研究組30例，男20例，女10例，年齡18～75歲，平均（40.3±1.9）歲。兩組患者的一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05）。具有可比性。受試者均知情同意，且本研究經過醫院倫理委員會批準。

1.2方法

對照組應用烏司他丁（國藥準字H19990134，廣東天普生化公司生產，藥品規格：10萬U）治療，20萬U烏司他丁+30 mL生理鹽水，靜脈注射給藥，1次/d，持續治療7 d[4]。研究組在對照組患者基礎上聯合應用脂氧素（國藥準H20040505，南京金益柏生物科技有限公司，藥品規格：48T/96T）治療，1 μg/kg的脂氧素+3 mL生理鹽水，靜脈注射給藥，1次/d，持續治療7 d[5]。

1.3觀察指標

治療前后應用酶聯免疫法（ELISA）檢測Ang-1及Ang-2表達，同時檢測患者的腎功能指標[6]。采集空腹靜脈血5 mL，分別檢測血肌酐（BUN）、尿素氮（SCr）以及胱抑素C（Cystatin C）[7]。治療前后檢測兩組患者的凝血功能，采集空腹靜脈血5 mL，應用自動生化儀檢測凝血酶原時間（PT）、血小板計數（PLT）、D-二聚體（D-D）以及活化部分凝血活酶時間（APTT）[8]。

1.4 統計學方法

數據統計應用SPSS18.0軟件，計數資料采用χ2檢驗，計量資料采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者治療前后Ang表達比較

治療前兩組患者的Ang表達無明顯差異（P>0.05），治療后研究組Ang-1表達顯著高于對照組，Ang-2表達顯著低于對照組（P<0.05）。見表1。

2.2兩組患者治療前后腎功能比較

治療前兩組患者的腎功能指標無明顯差異（P>0.05），治療后研究組患者腎功能顯著優于對照組（P<0.05）。見表2。

2.3兩組患者治療前后凝血功能比較

治療前兩組患者的凝血功能指標無明顯差異（P>0.05），治療后研究組患者凝血功能指標顯著優于對照組（P<0.05）。見表3。

3討論

相關研究結果顯示，凝血活化及炎癥反應在膿毒癥病情發展過程中有重要的影響[9]。炎癥細胞因子會損傷患者的血管內皮細胞，誘發凝血途徑，導致患者處于高凝狀態，微血管中血栓不斷生成，加劇機體的炎癥反應。在早期階段有效阻斷患者的炎癥反應同時改善凝血功能，避免血管內凝血及多器官功能障礙是提高膿毒癥治療效果的核心[10]。烏司他丁是健康人群尿液當中提取的蛋白酶抑制劑，能夠抑制蛋白酶、纖溶酶及脂肪水解酶等。研究顯示烏司他丁能夠借助于內源性凝血機制發揮效果，可以穩定人體中的溶酶體膜，從而減少溶酶體酶生成及分泌，清除氧自由基并且控制炎癥介質，發揮血小板及血管內皮細胞的保護功能，避免凝血功能障礙出現[11]。隨著膿毒癥患者的病情惡化，凝血功能指標中的APTT、PT及D-D等都會出現顯著的改變。本研究結果提示，患者應用烏司他丁治療之后，患者的凝血功能得到顯著改善（P<0.05），提示烏司他丁治療有利于維持患者凝血及抗凝血功能之間的平衡，從而降低MODS發生風險。

本研究中，研究組患者聯合應用脂氧素治療膿毒癥患者，患者的腎功能指標及凝血功能指標均顯著優于對照組（P<0.05）。脂氧素是花生四烯酸的一種代謝產物，是臨床上比較常用的一種內源性抗炎緩解因子，在纖維化以及腎臟炎性疾病等患者的治療過程中受到醫務人員的高度重視[12]。脂氧素作為重要的一種內源性抗炎遞質，在人體中發揮著不容忽視的重要影響，幾乎參與到同炎癥以及免疫相關的各種疾病。在炎癥性疾病當中，脂氧素借助于抑制患者的中性粒細胞，能夠降低促炎因子的表達，加速巨噬細胞吞噬中性粒細胞[13]。除此之外，脂氧素治療過程中，患者不會出現抗炎藥物常見的各種不良反應，全身應用也不會降低患者的血壓，同時不會影響患者的免疫功能、腎功能以及骨髓造血功能[14]。脂氧素在病理過程中發揮影響，并不是直接參與生理功能維持，但是人工合成得到的脂氧素能夠顯著抑制免疫功能。研究發現，脂氧素在腎臟疾病治療過程中，能夠發揮抗炎效果以及保護腎臟的效果，隨著醫務人員對脂氧素作用機制的認識，特別是開發結構類似物，生物學活性還有具體的作用機制日益明確，在腎臟炎癥以及纖維化治療過程當中應用潛力巨大[15]。當前情況下，在脂氧素的研究方面仍然處于實驗的環節，大部分的研究為動物實驗，不過在治療疾病方面的潛力已經得到醫務人員的認可[16]。研究發現膿毒癥患者在血清當中的Ang-1水平顯著下降，同時Ang-2水平顯著上升。Ang-1及Ang-2是評估膿毒癥患者風險以及預后質量當中的重要生物標記物。Ang-1能夠預防毛細血管出現滲漏問題，與之相對應的是，Ang-2能夠提高動脈血管的通透性[17]。Ang-1及Ang-2在人體的血管當中體現出拮抗效果，二者之間的比值越高，提示患者的血管破壞越為嚴重。Ang-1通過刺激內皮細胞的遷移、存活、增殖、調節以及分化，來實現內皮屏障的穩定性。相關研究的結果提示，Ang-1水平下降及Ang-2水平的顯著上升，意味著膿毒癥患者的風險加大以及預后質量較差[18]。Ang-1水平及Ang-2水平的相對變化方面，Ang-1的水平下降及Ang-2水平的上升，能夠體現出膿毒癥患者當中血管內皮的損傷狀況，毛細血管損傷嚴重會顯著加大膿毒癥患者的死亡風險[19]。所以通過分析這兩種截然不同的血管因子水平，可以有效確定血管內皮細胞結局，是預測膿毒癥患者死亡風險的重要生物標記物之一。除此之外，研究人員在體內外研究的結果當中，脂多糖會降低人體的Ang-1的表達水平，抑制Ang-1通路，破壞內皮屏障的穩定性以及完整性，導致器官功能逐漸喪失，這也能夠解釋Ang-1預測患者預后的作用機制[20]。從更加全面整體的角度而言，Ang-1水平及Ang-2水平能夠體現出膿毒癥患者自身病理情況及血管損傷的嚴重程度，體現膿毒癥患者的血管病理機制及死亡風險。本研究結果中，治療前兩組患者的Ang表達無明顯差異（P>0.05），治療后研究組Ang-1表達顯著高于對照組，Ang-2表達顯著低于對照組（P<0.05），提示患者治療之后Ang-1及Ang-2表達得到改善，其中研究組患者聯合應用脂氧素強化抗炎效果，改善水平優于對照組。需要注意的是，本研究仍然存在一定不足。第一，隨機抽樣進行臨床判斷容易導致樣本出現偏差，需要在后續的研究當中進一步增加樣本量從而降低誤差。第二，部分患者治療前的Ang-1水平及Ang-2水平不是在急診科測量，難以確保樣本數據的客觀精確，且患者的潛在疾病同樣會影響到二者的表達水平，需要在后續研究當中探索相應的處理措施。簡而言之，Ang-1水平及Ang-2水平提供了一種簡單有效的方法，可評估膿毒癥患者的預后質量及死亡風險，能夠為臨床治療提供新模式。endprint

綜上所述，膿毒癥患者應用脂氧素和烏司他丁治療，能夠降低內皮細胞Ang表達水平，改善患者的腎功能以及凝血功能相關指標，有利于改善患者預后以及生活質量，臨床上值得推廣應用。

[參考文獻]

[1] 江從兵，曹靈紅.烏司他丁對膿毒癥患者腎功能及凝血功能的影響[J].川北醫學院學報，2015，2（6）：755-758.

[2] 郝雪景，蔡國龍，陳進，等.烏司他丁對膿毒癥內皮細胞保護機制的研究進展[J].心腦血管病防治，2015，3（6）：486-488.

[3] Casserly B，Phillips GS，Schorr C，et al. Lactate measurements in sepsis-induced tissue hypoperfusion：Results from the surviving sepsis campaign database[J]. Critical Care Medicine，2015，43（3）：567-573.

[4] 劉宏，田達.烏司他丁對膿毒癥患者腎損傷的保護作用及對免疫功能的影響[J].中國醫藥導報，2015，（1）：75-78.

[5] Rhodes A，Phillips G，Beale R，et al. The surviving sepsis campaign bundles and outcome：Results from the international multicentre prevalence study on sepsis（the IMPreSS study）[J].Intensive Care Medicine，2015，41（9）：1620-1628.

[6] 朱瑤麗，朱春麗，王小華.烏司他丁對膿毒癥休克患者血常規、血乳酸及降鈣素原的影響[J].西北藥學雜志，2015，（5）：618-620.

[7] 吳穎，崔朝勃，亢宏山，等.烏司他丁對膿毒癥患者血清腫瘤壞死因子-α、白細胞介素10、肌鈣蛋白I和C反應蛋白水平的影響[J].蚌埠醫學院學報，2016，41（12）：1635-1638.

[8] Martinod K，Fuchs TA，Zitomersky NL，et al. PAD4-deficiency does not affect bacteremia in polymicrobial sepsis and ameliorates endotoxemic shock[J]. Blood，2015，125（12）：1948-1956.

[9] 吳佳妮，向娟，唐兵.烏司他丁對膿毒癥合并腎損傷患者腎功能和PCT、CRP、乳酸水平的影響[J].醫學綜述，2017，23（3）：577-580.

[10] 姚艷粉.烏司他丁對膿毒癥急性腎損傷患者心鈉肽、尿腎損傷分子-1以及血清半胱氨酸蛋白酶抑制劑的影響[J].中國現代醫學雜志，2016，26（4）：71-75.

[11] Kowalczyk A，Kleniewska P，Kolodziejczyk M，et al. The role of endothelin-1 and endothelin receptor antagonists in inflammatory response and sepsis[J]. Archivum Immunologiae Et Therapiae Experimentalis，2015，63（1）：41-52.

[12] 黃增相，陶驊，徐雯，等.烏司他丁對嚴重膿毒癥致急性呼吸窘迫綜合征患者血漿C反應蛋白、降鈣素原及乳酸水平的影響[J].實用醫學雜志，2015，31（10）：1692-1694.

[13] 田勇剛，喬魯軍，牟林，等.烏司他丁對重癥膿毒癥細胞因子表達水平的影響[J].中華醫院感染學雜志，2015，（23）：5287-5289.

[14] 王淑穎，應春曉，何許偉，等.烏司他丁對ICU膿毒癥患者凝血功能障礙的影響[J].中國藥房，2015，（29）：4094-4096.

[15] 唐虹.烏司他丁、血必凈聯合治療對燒傷后膿毒癥凝血功能及全身炎性反應影響的臨床研究[J].中國醫科大學學報，2015，44（12）：1132-1136.

[16] Schlapbach LJ，Straney L，Alexander J，et al. Mortality related to invasive infections，sepsis，and septic shock in critically ill children in Australia and New Zealand，2002-13：A multicentre retrospective cohort study[J]. Lan-cet Infectious Diseases，2015，15（1）：46-54.

[17] 王偉，常平，李夏西，等.烏司他丁對嚴重膿毒癥患者遠期預后及體內降鈣素原的影響[J].安徽醫科大學學報，2016，51（5）：744-747.

[18] 王玲.烏司他丁聯合血必凈注射液治療膿毒癥的臨床療效及對炎性因子的影響[J].檢驗醫學與臨床，2016， 13（z2）：109-112.

[19] 李麗，張城林，吳立玲.miR-130a通過調控PPAR-γ的表達參與AngⅡ的促纖維化效應[J].中國病理生理雜志，2015，32（10）：1502.

[20] 蔡朝民，何小解，劉香萍，等.Jagged-1對AngⅡ誘導后EPCs的VEGF表達的影響[J].中國熱帶醫學，2015，15（5）：533-538.

（收稿日期：2017-06-25）endprint