感染細(xì)菌性肺炎T淋巴細(xì)胞亞群以及細(xì)胞因子的變化

郭非

(河南大學(xué)附屬南石醫(yī)院 兒科 河南 南陽(yáng) 473000)

·臨床研究·

感染細(xì)菌性肺炎T淋巴細(xì)胞亞群以及細(xì)胞因子的變化

郭非

(河南大學(xué)附屬南石醫(yī)院 兒科 河南 南陽(yáng) 473000)

目的探析感染細(xì)菌性肺炎T淋巴細(xì)胞亞群以及細(xì)胞因子的變化。方法選取河南大學(xué)附屬南石醫(yī)院2015年12月至2016年11月收治的31例感染細(xì)菌性肺炎患兒為觀察組，另選同期在河南大學(xué)附屬南石醫(yī)院體檢的31例健康嬰幼兒為對(duì)照組，對(duì)比兩組兒童細(xì)胞因子與T淋巴細(xì)胞亞群的變化情況。結(jié)果觀察組IL-4水平高于對(duì)照組(P<0.05)；兩組IL-7、IFN-α、NK水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均低于對(duì)照組(P<0.05)，CD9+水平高于對(duì)照組(P<0.05)，兩組CD8+水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論感染細(xì)菌性肺炎患兒其T淋巴細(xì)胞亞群以及細(xì)胞因子將會(huì)有相應(yīng)改變，可作為臨床診療依據(jù)。

細(xì)菌性肺炎；T淋巴細(xì)胞亞群；細(xì)胞因子

數(shù)據(jù)顯示，新生兒感染性疾病占新生兒期疾病的90%以上，這與其免疫功能不完善關(guān)系密切[1]。不同種類的病原體和感染途徑，導(dǎo)致體內(nèi)細(xì)胞免疫和體液免疫的應(yīng)答不同，從而使免疫細(xì)胞因子水平發(fā)生改變。本研究選取河南大學(xué)附屬南石醫(yī)院近年收治的細(xì)菌性肺炎患兒為觀察對(duì)象，對(duì)其T淋巴細(xì)胞亞群以及細(xì)胞因子變化情況進(jìn)行觀察，以為臨床診療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料選取河南大學(xué)附屬南石醫(yī)院2015年12月至2016年11月收治的31例感染細(xì)菌性肺炎患兒為觀察組，另選同期在河南大學(xué)附屬南石醫(yī)院體檢的31例健康嬰幼兒為對(duì)照組。對(duì)照組男17例，女14例；出生日齡為10～28 d，平均(18.6±3.1)d；體質(zhì)量為3.1～4.2 kg，平均(3.6±0.3)kg。觀察組男18例，女13例；出生日齡為10～27 d，平均(18.2±3.2)d；體質(zhì)量為3.2～4.3 kg，平均(3.7±0.3)kg。兩組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

1.2治療方法患兒入院后采集空腹靜脈血2 ml，并在4 h內(nèi)進(jìn)行處理。

1.2.1細(xì)胞因子檢測(cè) 將500 μl的RPMI1640、5 μl的PMA(1 μg/ml)、1 μl的離子霉素(1 μg/ml)、1 μl的BFA(10 μg/ml)以及500 μl的外周血一次加入流式細(xì)胞儀專用試管中。隨后以渦旋混勻器將其混勻，放置于含5%二氧化碳的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，時(shí)間為5 h，溫度為37 ℃，期間可將其取出1次，在重新混勻后放回。對(duì)試管進(jìn)行標(biāo)記，并在孵育5 h后，將1 ml的洗滌液以及200 μl的全血加入各試管中，低速搖晃均勻，放置于避光低溫環(huán)境中靜置30 min，隨后在室溫下進(jìn)行5 min的離心處理，取50 μl的底層留取液，并為其加入1 ml的洗滌液重新進(jìn)行5 min的室溫狀態(tài)下離心處理，選擇下層殘液作為備用。在各試管中加入5 μl的CD4-APC，并加入單克隆抗體小鼠抗人IL-17A-PE以及小鼠抗人IFN-α/IL-4各10 μl，低速搖晃均勻，放置于避光低溫環(huán)境中靜置30 min，后重新洗滌，離心后取其下層殘留液50 μl，并加入PBS 400 μl進(jìn)行上機(jī)檢測(cè)。

1.2.2T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè) 在1 800 μl的無(wú)菌注射用水中加入200 μl的溶血素以備用。取2個(gè)流式細(xì)胞儀試管，將1 ml全血加入試管中，并加入相應(yīng)試劑，低速搖晃均勻，放置于避光低溫環(huán)境中靜置20 min。各管均加入溶血素1 000 μl，以漩渦器低速混勻，在室溫狀態(tài)下放置于避光處?kù)o置10 min，隨后進(jìn)行5 min的離心處理，速度為1 500 r/min。去下層殘留液50 μl，并加入洗滌液2 ml，重新進(jìn)行離心處理，在400 μl的鞘液中加入50 μl的下層液，上機(jī)檢測(cè)。觀察對(duì)比兩組兒童細(xì)胞因子(IL-4、IL-7、IFN-α、NK)與T淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD8+、CD4+、CD4+/CD8+)的變化情況。

2 結(jié)果

2.1細(xì)胞因子觀察組IL-4水平高于對(duì)照組(P<0.05)；兩組IL-7、IFN-α、NK水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

2.2T淋巴細(xì)胞亞群觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均低于對(duì)照組(P<0.05)，CD9+水平高于對(duì)照組(P<0.05)，兩組CD8+水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表1 兩組細(xì)胞因子水平比較

表2 兩組T淋巴細(xì)胞亞群比較

3 討論

新生兒被不同病原體感染后，其機(jī)體T淋巴細(xì)胞亞群以及細(xì)胞因子變化不同，機(jī)體免疫功能被破壞[2]。機(jī)體被感染后顯示出T淋巴細(xì)胞亞群水平降低，免疫功能受限情況，其與新生兒已遭受感染以及病程較長(zhǎng)且病情隱匿有很大聯(lián)系[3-4]。本次研究中觀察組患兒表現(xiàn)為IL-4水平過(guò)高；CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平過(guò)低；CD9+水平異常偏高等。T淋巴細(xì)胞亞群在人體的免疫調(diào)節(jié)方面發(fā)揮著較為重要的作用，CD3+代表了外周血成熟T細(xì)胞的水平，CD4+則能夠刺激人體B細(xì)胞生成抗體，而CD8+則能夠抑制抗體生成，其水平減少則表明免疫抑制能力下降[5]。特征細(xì)胞因子中，IFN-為前炎癥因子，可增強(qiáng)機(jī)體抗感染能力，并具有免疫調(diào)節(jié)的作用。IL-4能誘導(dǎo)B細(xì)胞，活化B細(xì)胞介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答。IL-17是促炎因子的一種，對(duì)上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等進(jìn)行誘導(dǎo)，促進(jìn)炎癥因子及趨化因子的釋放[6]。綜上，當(dāng)兒童感染細(xì)菌性肺炎后，其體內(nèi)細(xì)胞因子及T淋巴細(xì)胞亞群會(huì)有一定變化，通過(guò)對(duì)變化情況進(jìn)行監(jiān)測(cè)，有助于患兒病情康復(fù)。

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R 722.13+5

10.3969/j.issn.1004-437X.2017.20.010

2017-03-23)