胃癌原發灶和淋巴結轉移灶HER2表達的臨床意義

楊金鳳 江 軍 王秋生 馬世文 宋玉青

胃癌原發灶和淋巴結轉移灶HER2表達的臨床意義

楊金鳳 江 軍 王秋生 馬世文 宋玉青

目的觀察HER2在胃癌原發灶和淋巴結轉移灶中的表達及其臨床意義。方法選取胃癌患者140例，其中淋巴結轉移94例。采集胃癌患者的原發灶、淋巴結轉移灶及癌旁組織，采用免疫組織化學法(Elivision)方法檢測3種組織中HER2蛋白表達情況。結果140例胃癌原發灶組織中HER2蛋白陽性表達與胃癌TNM分期、浸潤深度及淋巴結轉移有關(P<0.05)，而與患者性別、年齡和分化程度無關(P>0.05)，癌旁組織中HER2表達與性別、年齡、分化程度、TNM分期、浸潤深度及淋巴結轉移均無關(P>0.05)；HER2蛋白在胃癌原發灶、淋巴結轉移灶中表達水平均高于癌旁組織，差異有統計學意義，而94例淋巴結轉移灶和對應的胃癌原發灶中HER2表達的差異無統計學意義；94例有淋巴結轉移的患者淋巴結轉移灶與原發灶HER2表達一致率為89.4%，兩類標本HER2表達狀態具有一致性(Z=6.386，P<0.001)。結論胃癌HER2蛋白的陽性表達與胃癌TNM分期、浸潤深度及淋巴結轉移有關，提示HER2的表達與胃癌的浸潤轉移有關；胃癌原發灶和淋巴結轉移灶HER2的表達具有較好的一致性，患者在不能獲取原發病灶的情況下，檢測轉移灶中HER-2可能為靶向治療的選擇提供依據，為晚期胃癌患者帶來希望。

HER2；胃癌原發灶；免疫組織化學法；淋巴結轉移灶；臨床意義

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1570～1573)

胃癌是臨床上常見的惡性腫瘤，目前我國胃癌的發病率和死亡率均高于全球水平[1]。2010年發表的ToGA實驗研究[2]證實采用曲妥珠單抗聯合化療治療提高了人類表皮生長因子受體2(HER2)陽性的晚期胃癌和胃食管連接部腺癌患者的生存期，為晚期胃癌患者的治療帶來了新的希望，如何檢測HER2狀態使其從靶向治療中受益具有重要的臨床意義。本研究選取2012年至2015年醫院診治的胃癌患者140例，運用免疫組織化學法(Elivision)方法探討HER-2在胃癌原發灶和淋巴結轉移灶中的表達及臨床意義，報告如下。

1 材料與方法

1.1 臨床資料

選取2012年至2015年醫院收治的胃癌患者140例，所有患者行開腹或腹腔鏡手術并經病理科確診為腺癌，術前均未接受任何化療、放療或免疫等治療，其中140例胃癌原發灶組織、對應的140例癌旁組織及對應的淋巴結轉移灶組織94例。140例胃癌患者，男性98例，女性42例；年齡23～83歲，中位年齡65歲；按WHO國際分類標準，高中分化型腺癌74例，低分化型腺癌66例；按照國際抗癌聯盟/美國癌癥聯合委員會(UICC/AJCC)公布的TNM分期標準(2010年，第七版)：Ⅰ～Ⅱ期67例，Ⅲ～Ⅳ期73例，T1～T238例，T3～T4102例，有淋巴結轉移94例，無淋巴結轉移46例。

1.2 方法

按照2011版《胃癌HER2檢測指南》[3]，采用免疫組化Elivision方法，檢測3種組織HER2蛋白表達方法：將采集的胃癌原發灶、癌旁組織及淋巴結轉移灶蠟塊進行切片，60 ℃烤片1 h，脫蠟水化，PBS沖洗3 min×3次。pH 6.0檸檬酸鹽緩沖液煮沸熱修復，自然冷卻至室溫，PBS沖洗2 min×2次。滴加3%的過氧化氫室溫下孵育10 min，以阻斷內源性過氧化物酶活性，PBS沖洗3 min×3次。滴加一抗室溫下孵育60 min，PBS沖洗3 min×3次。滴加聚合物增強劑(試劑A)，室溫下孵育20 min，PBS沖洗3 min×3次，滴加酶標抗鼠/兔聚合物(試劑B)室溫下孵育30 min，PBS沖洗3 min×3次，DAB顯色，顯微鏡下進行3～5 min觀察，自來水沖洗，常規蘇木精復染，1%HCl分化，自來水沖洗，藍化，梯度酒精脫水，透明封片，顯微鏡下觀察。

1.3 免疫組化判斷方法

應用修訂后HercepTest評分標準[4]進行結果判定：0：無反應或<10% 腫瘤細胞膜染色；1+：≥10% 腫瘤細胞微弱或隱約可見膜染色；僅有部分細胞膜染色；2+：≥10% 腫瘤細胞有弱到中度的基底側膜、側膜或完全性染色；3+：≥10% 腫瘤細胞基底側膜、側膜或完全性膜強染色。本研究將0與+視為陰性表達，2+與3+視為陽性表達。

1.4 統計分析

應用SPSS 17.0軟件處理，計數資料組間比較行χ2檢驗及Fisher確切概率法，一致性比較采用Kappa檢驗，P<0.05差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HER2蛋白表達與胃癌臨床病理特征的關系

在140例胃癌原發灶中HER2蛋白陽性表達與胃癌TNM分期、浸潤深度及淋巴結轉移有關(P<0.05)，與胃癌臨床病理特征性別、年齡、分化程度無關(P>0.05)；在140例對應的癌旁組織中HER2蛋白陽性表達與胃癌臨床特征性別、年齡、分化程度、TNM分期、浸潤深度及淋巴結轉移均無關，見表1。

2.2 HER2蛋白表達在胃癌不同病變組織中的表達

胃癌原發灶及淋巴結轉移灶中HER2蛋白陽性表達在光學顯微鏡下顯示為包膜棕黃色著色。140例胃癌病例中，胃癌原發灶中有23例HER蛋白表達陽性，陽性率為16.4%(23/140)，明顯高于癌旁組織的陽性表達率[1.4%(2/140)]，兩者差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

94例有淋巴結轉移的病例中，14例淋巴結轉移灶HER2蛋白表達陽性，陽性率為14.9%，對應的原發灶中有20例表達陽性，陽性率為21.3%，淋巴結轉移灶中HER2蛋白陽性表達率稍低于對應的原發灶，但兩者差異無統計學意義(P>0.05)；HER2蛋白在淋巴結轉移灶中表達率明顯高于對應的癌旁組織，兩者差異有統計學意義(P<0.05)，見表3。

2.3 HER2蛋白在胃癌原發灶及淋巴結轉移灶中的表達情況比較

94例有淋巴結轉移的病例中，20例胃癌原發灶HER2表達陽性，14例轉移灶表達陽性，兩者HER2均陽性表達為12例，均陰性表達72例，一致率為89.4%，經Kappa檢驗，胃癌原發灶與淋巴結轉移灶中HER2表達狀態具有一致性(Z=6.386，P<0.001)，見表4。

3 討論

人類表皮生長因子受體-2 (human epidermal growth factor receptor-2,HER2)基因定位于染色體17q21，編碼產物為1種相對分子質量為185kD的單鏈跨膜糖蛋白(又稱為p185蛋白)，是表皮生長因子受體家族成員之一，其結構上由胞外配體結合區，跨膜區和胞內蛋白酪氨酸激酶區3個部分組成[5]。在正常情況下該基因處于非激活狀態，當受到體內外因素作用后，其結構或表達調控失常，激活酪氨酸激酶區，引發如Ras/MAPK，PI3P/Akt等一系列的細胞內信號傳導級聯反應，進而從多個途徑影響腫瘤細胞增殖、凋亡、粘附、遷移等生物活動[6-7]。目前研究發現HER2在乳腺癌、結腸癌、肺癌、胃癌等多種惡性腫瘤中存在不同程度的基因擴增和/或蛋白過表達[8]，提示HER2在惡性腫瘤的發生發展中具有重要意義。

表1 HER2蛋白陽性表達與胃癌臨床病理特征的關系/例

注：*為Fisher確切概率法。

表2 HER2蛋白在140例胃癌原發灶及癌旁組織中的表達情況(例，%)

表3 HER2蛋白在94例不同胃癌組織中的表達情況(例，%)

表4 HER2蛋白在胃癌原發灶及淋巴結轉移灶中的表達(例，%)

HER2蛋白在胃癌中過表達是在1986年由Sakai等首次報道[9]，隨著分子靶向研究的不斷深入，針對HER2陽性的靶向抗體在臨床上得到應用。2010年發表的由24個國家參與的ToGA實驗研究[2]證實采用曲妥珠單抗聯合化療治療能提高HER2陽性的晚期胃癌和胃食管連接部腺癌患者的生存期。在該研究入組階段，運用免疫組織化學(Immunohistochemistry，IHC)和熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,FISH)方法篩查了3803例胃癌標本，結果顯示，胃癌HER2陽性(IHC 2+/FISH陽性或IHC 3+)所占比例為16.6%[10]。本研究按照2011版《胃癌HER2檢測指南》推薦的檢測流程，運用免疫組織化學法(Elivision)方法檢測HER2蛋白在胃癌中的陽性率為16.4%，明顯高于癌旁組織中的陽性表達率，提示HER2蛋白可能在胃癌發生中起到重要作用。

國內外研究發現，HER2在胃癌中的表達率不盡相同，而且與胃癌的臨床病理特征之間關系亦無統一的結論。Bǎdescu等[11]研究表明，HER2表達與Lauren分型、腫瘤分化程度和腫瘤分期有關，裴波等[12]研究認為HER2表達還與有無淋巴結轉移和發病的年齡有關。Aoyama等研究結果表明[13]，HER2過表達與腫瘤分化程度、 Lauren分型、淋巴結轉移、靜脈浸潤和淋巴管浸潤有關，它與腫瘤大小、浸潤深度和腫瘤分期無相關性。然而有學者[14]報道HER2表達與胃癌的臨床病理特征之間無明顯相關性。本研究中，HER2蛋白陽性表達與胃癌臨床病理體征中性別、年齡、分化程度等差異無統計學意義(P>0.05)，HER2蛋白陽性表達與胃癌TNM分期、浸潤程度及淋巴結轉移關系密切(P<0.05)，提示：HER2蛋白在胃癌的發展及浸潤轉移中發揮了重要的作用，能作為判斷胃癌預后的重要指標之一。

在本研究的94例伴淋巴結轉移的病例中，淋巴結轉移灶與對應的原發病灶中HER2表達一致率為89.4%，兩類組織中HER2表達狀態具有一致性(P<0.001)。關于胃癌原發灶和淋巴結轉移灶中HER2狀態的比較中，有研究發現原發灶與淋巴結轉移灶中的HER2的狀態具有較高的一致性[15-16]，由此看出：淋巴結轉移灶對原發灶的參考價值較大，當進展期胃癌患者失去手術機會或復發轉移，無法獲得原發灶標本時，淋巴結轉移灶中的HER2表達檢測結果具有一定的參考價值。

綜上所述，胃癌HER2蛋白的陽性表達與胃癌TNM分期、浸潤深度及淋巴結轉移有關，提示HER2的表達與胃癌的浸潤轉移有關；胃癌原發灶和淋巴結轉移灶HER2的表達具有較好的一致性，患者在不能獲取原發病灶的情況下，檢測轉移灶中HER2可能為靶向治療的選擇提供依據，為晚期胃癌患者帶來希望。

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ClinicalSignificanceofHER2ExpressioninPrimaryGastricCancerandLymphNodeMetastasis

YANGJinfeng,JIANGJun,WANGQiusheng,etal.

AnqingHospital,Anqing,246003

ObjectiveTo investigate the expression of HER2 in primary gastric carcinoma and lymph node metastasis and its clinical significance.Methods140 patients with gastric cancer,including 94 cases of lymph node metastasis,were selected.The primary foci,lymph node metastasis and adjacent tissues of gastric cancer patients were collected.The expression of HER2 protein in 3 tissues was detected by immunohistochemistry(Elivision).Results140 cases of primary gastric cancer tissues,the positive expression of HER2 protein was related with TNM staging,depth of invasion and lymph node metastasis(P<0.05),but not with gender,age and degree of differentiation(P>0.05),paracancerous tissue HER2 expression was not related with gender,age,degree of differentiation,TNM stage,invasion depth and lymph node metastasis(P>0.05);the expression of HER2 protein in primary gastric carcinoma and metastatic lymph nodes in level were higher than the adjacent tissues,the difference was statistically significant,and 94 cases of gastric cancer,lymph node metastasis and corresponding primary foci of HER2 expression difference was statistically significant;94 cases with lymph node node metastasis node metastasis and primary tumor HER2 expression rate was 89.4%,the 2 tissues were consistent with the expression of HER2(Z=6.386,P<0.001).ConclusionThe positive expression of HER2 protein in gastric cancer is related with TNM staging,depth of invasion and lymph node metastasis,suggesting that HER2 expression is related with invasion and metastasis of gastric cancer;expression of primary tumor and lymph node metastasis of HER2 have good consistency,the patients obtain primary lesions in the case of not detecting metastases HER-2 may provide the basis for targeted treatment of choice,and hope for patients with advanced gastric cancer.

HER2 protein;Primary gastric cancer;Immunohistochemistry;Lymph node metastases;Clinical Significance

246003 海軍安慶醫院

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.10.002

R735.2

A

1001-5930(2017)10-1570-04

2016-09-22

2017-05-23)

(編輯吳小紅)