開封地區兒童急性呼吸道感染病原體檢測結果分析

翟凱齊 張麗娜 李茉莉 喬克

開封地區兒童急性呼吸道感染病原體檢測結果分析

翟凱齊1張麗娜2李茉莉3喬克4

目的回顧性分析開封地區兒童呼吸道病毒感染常見病原學數據，為臨床診療提供實驗室依據。方法收集2016年1-12月開封市兒童醫院12755例急性呼吸道感染患兒血清標本，采用免疫斑點試驗檢測患兒血清中6種常見呼吸道病原體早期特異性抗體IgM：肺炎衣原體(CP)、肺炎支原體(MP)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒(IV)、副流感病毒(PIV)。對病例陽性標本進行統計分析，比較不同年齡組、性別、季節、等感染情況的差異。結果12755例患兒標本中有3636例陽性，陽性率為28.51%。6種呼吸道病原體的陽性率依次為：MP 15.03%、ADV 11.13%、IV 7.76%、RSV 3.03%、CP 1.24%、PIV 0.4%;呼吸道病原體檢出率春、夏季節相對較高； 4-6歲組陽性率最高，<1歲組感染率最低。結論該地區兒童呼吸道感染常見病原體以MP及ADV為主，其次是IV，其感染有季節、性別、年齡差異性；病毒混合感染中以MP混合感染為主。

呼吸道感染； 病毒； 檢測； 臨床分析

急性呼吸道感染(ARI)是兒科常見疾病，其病原譜中病毒感染占較大的比重。為了解開封地區病毒所致的兒童ARI的病原學分布情況，采用免疫斑點試驗對開封市兒童醫院12755例住院患兒6種常見呼吸道病毒早期特異性抗體IgM檢測，分析6種常見呼吸道病毒病原學構成及性別、季節、年齡組分布差異性。

資料與方法

一、 一般資料

選擇2016年1-12月開封市兒童醫院12755例ARI的患兒血清標本為研究對象，入組患兒診斷符合《諸福堂實用兒科學》第7版ARI標準。其中男8005例，女4750例；年齡0-12歲，其中<1歲5242例、1-3歲5244例、4-6歲1526例、>6歲743例；春季3140例、夏季2894例、秋季2572例、冬季4149例。

二、方法

1 標本采集：所有患兒均于入院后次日清晨空腹采集靜脈血1-2 mL，送檢至檢驗科，3 000轉/min離心15min分離患兒血清待測。

2 檢測方法：取出芯片和試劑， 置室溫(25±1℃)下放置30分鐘后，平衡置室溫待用；根據樣本量，取潔凈小管按照10：1配置足量底物混合液；取待測血清100μL,加稀釋液200μL充分混勻；取洗滌液4滴加于檢測窗口膜面上，均勻潤濕膜面；取處理后的待測血清混合液200μL，加于檢測窗口膜面上；待血清樣本滲透后，取洗滌液6滴，加于檢測窗口膜面上，取酶結合物4滴，加于檢測窗口膜面上；待酶結合物滲入后，取洗滌液6滴，加于檢測窗口膜面上；取配制好的底物混合液300μL，加于檢測窗口膜面上，芯片在25分鐘后放入XK2100生物芯片閱讀儀進行分析，整個過程在室溫(25±1℃)環境中進行，2小時完成檢測分析。

3 結果判讀：樣本檢測值<0.95倍臨界值，則該抗體檢測結果為陰性；樣本檢測值>1.05倍臨界值時，則該項結果為陽性；檢測值介于0.95-1.05倍臨界值，該結果為可疑，需結合臨床癥狀分析判定。芯室質控點顯色時實驗有效。以上設備及試劑均購自中國江蘇泰州欣康基因數碼科技有限公司。

三、統計學處理

患兒檢測結果使用2007版Microsoft Office Excel軟件收集整理，應用SPSS20.0軟件進行統計學分析，計數資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗，取P<0.05 有統計學差異。

結 果

一、12755例患兒血清學標本共3636例陽性，陽性率為28.51%。6種呼吸道病原體的單項陽性率依次為：MP 15.03%、ADV 11.13%、IV 7.76%、RSV 3.03%、CP 1.24%、PIV 0.4%;單項病原學陽性率數據(見表1)；兩種及兩種以上混合感染1272例，占陽性標本34.98%，混合感染中前三位病原體依次為ADV+IV 390例，MP+ADV 349例，MP+IV 300例。

二、呼吸道病原體感染情況與季節、月份關系

兒童呼吸道病原體在不同季節檢出率差異有統計學意義(χ2=297.037，P=0.000)。全年之中春、夏兩季為兒童呼吸道病毒高發階段，病原體檢出率最高(62.10%、40.64%)，秋、冬季病原學檢出率較低(32.32%，17.69%)。其中MP全年感染率夏季最高，ADV及IV在春季節檢出率較高，分別為(23.50%,15.73%),RSV、CP、PIV全年呈現低水平散發趨勢；由(表3)可以看出病原體檢出多集中于在3-7月，該地區患兒呼吸道病原體以MP、ADV、IV感染為主，其中MP全年各月份檢出率較高，ADV、IV感染主要集中于1-6月份。

表1 兒童急性呼吸道感染病原體(單項)陽性率及構成比[n(%)]

注：單項病原學陽性總數含1272例混合感染

表2 兒童急性呼吸道感染病原體分布與季節關系[n(%)]

表3 病原體陽性標本各月份分布情況

三、兒童呼吸道病原體感染情況與性別關系

在8005例男性患兒呼吸道病原體感染的陽性率為37.68%，女性為40.13%，差異有統計學意(χ2=6.965，P=0.008)，女性患兒感染率稍高于男性患兒。(見表4)。

表4 兒童呼吸道病原體感染情況與性別的關系[n(%)]

四、呼吸道病原體感染情況與年齡的關系

患兒<1歲、1-3歲、4-6歲、> 6歲4個年齡組，呼吸道病原體的檢出率分別為,15.07、47.67、72.35、71.07 ，差異有統計學意義(χ2=15.368，P=0.002)。4-6歲兒童呼吸道病原體感染率最高，<1歲組感染率最低，(見表5)。

表5 兒童呼吸道病原體感染情況與患兒年齡關系[n(%)]

討 論

AIR是兒科臨床常見疾病，也是兒童最為常見的感染性疾病之一，嚴重威脅兒童生命健康[1-2]，肺炎衣原體(CP)、肺炎支原體(MP)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒(IV)、副流感病毒(PIV)為兒童AIR常見感染因素，本研究顯示該地區呼吸道病毒總陽性率為28.51%，高于湖北地區13.29%[3]，浙江地區21.75%[4]，與無錫地區感染率相接近31.16[5],低于四川53.3%[6]及廣州80.25%[7]，考慮可能與本研究未涵蓋地域因素、氣候因素、人群易感因素、檢測方法學因素有關 ，此外也可能與未覆蓋近年研究較多的偏肺病毒(HMPV)、鼻病毒、柯薩奇病毒等各類相關病原有關。不同地區氣溫、水文、季節性、性別的差異性造成了各地區兒童呼吸道病毒病原譜的多樣性，不同感染因素又導致AIR臨床癥狀和特點不同，因此分析AIR該地區常見病原體分布情況有助于臨床提高診療效果，進一步減少病毒性ARI患兒治療過程中抗生素濫用問題。

本次研究顯示，該地區常見AIR的病毒性感染因素為MP、ADV，這與王生清[8]研究近似，考慮可能與兩地區相近的氣候條件所致；且AIR混合性感染在兒童階段并不少見，占所有陽性病例的34.98%，國內文獻報道亦印證了該項結論。目前，雖然上呼吸道感染病原體的檢測方法較多，有培養分離法、特異性抗原、抗體檢測及聚合酶鏈反應(PCR)等，培養分離方法雖是診斷的金標準，但考慮其操作程序復雜，培養時間長，技術條件要求高，檢測成本較高，在臨床上推廣相對困難，亦不適用于一般實驗室的檢測要求；免疫斑點試驗方法具有準確性高、速度快、特異性強的優點[9]可以為臨床初步診斷提供呼吸道病毒檢測依據。

ARI病毒性感染一年四季均可發病，本次結果顯示不同季節呼吸道病原體檢出率有統計學差異。春、夏兩季為兒童呼吸道病毒高發階段，病原體檢出率最高，秋、冬季病原學檢出率較低，主要病原體中，MP在夏季檢出率最高(18.94%)，且一年之中處于較高的檢出率(12.09%-18.94%)，說明該地區呼吸道病原體構成中以MP感染為主，與章國平[10]報道一致；ADV及IV 在春季檢出率最高(23.50%、15.73%)，夏、秋、冬檢出率較低(2.29%-9.99%、1.4%-8.53%)，說明此兩項病毒檢出存在更為明顯的季節差異性；RSV、CP、PIV在一年之中感染率相對較低，呈現一年之中相對低發的表現；因此可以看出，呼吸道病毒感染與季節密切相關，一方面是由于各種病原體所特有的生物學特性不同，另一方面由于各地區環境、氣候條件、溫濕度等不同，而導致的感染率差異[11]。

本研究中12755例患兒，男性8005例和女性4750例，其呼吸道病毒的檢出率分別為37.68%，女性為40.13%，且女性患兒感染率稍高于男性患兒，結果與以往研究不同[12-13],考慮與本次研究中男性患兒多在低年齡組且病毒感染率較低所致；本研究將患兒按年齡為<1歲、1-3歲、4-6歲、>6歲四個組別，各年齡組的病原體檢出率分別為15.07%、47.67%、72.35%、71.07%，且統計分析顯示病毒病原體分布有統計學差異(P<0.05)。四組之中，4-6歲年齡組感染率最高，<1歲感染率最低，且MP及ADV在4-6歲感染率最高，與相關報道一致[14-15]。

綜上所述，本研究結果顯示：MP、ADV、IV 是該地區兒童呼吸道感染最為常見病原體；不同年齡組、性別、季節性對于病原體類型的檢出存在差異，女性患兒檢出率稍高于男性；提示在呼吸道感染高發的春、夏兩季應做好疾病的預防工作，可以有效減低兒童呼吸道病毒性感染的發生。最后，臨床ARI患兒治療時，應考慮患兒病原學流行病學差異性，適時調整治療方案，合理使用治療藥物，縮短治療周期，保障兒童生命健康。

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AnalysisofpathogendetectionresultsofchildrenwithacuterespiratoryvirusinfectioninKaifengarea

ZHAIKai-qi,ZHANGLi-na,LIMo-li,QIAOKe

KaifengChildren’sHospital,Kaifeng,Henan475000,China

ObjectiveTo retrospectively analyze the common pathogen data of respiratory virus infection in children in Kaifeng area, and to provide laboratory basis for clinical diagnosis and treatment.MethodsA total of 12755 children with acute respiratory tract infection were enrolled in Kaifeng Children's Hospital from January to December in 2016. Immunoassay test was used to detect the early specific antibody IgM: Chlamydia pneumoniae (CP), Mycoplasma pneumoniae (MP), respiratory syncytial virus (RSV), adenovirus (ADV), influenza virus (IV), and parainfluenza virus (PIV). The positive samples were statistically analyzed, and their age, sex, season, and other differences were compared.ResultsOf the 12755 children, 3636 were positive, and the positive rate was 28.51%. The positive rates of six respiratory pathogens were: MP 15.03%, ADV 11.13%, IV 7.76%, RSV 3.03%, CP 1.24% and PIV 0.4% respectively. The detection rate of respiratory pathogens was relatively high in spring and summer. Children younger than 1 year old had the lowest positive rate, and children aging from 4 to 6 had the highest rate.ConclusionThe common pathogens of respiratory tract infection in children in this region are predominantly MP and ADV, followed by IV. The infection is different in different season, sex and age. The mixed infection of the virus is dominated by MP infection.

respiratory tract infection; virus; detection; clinical analysis

2017-03-06]

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.11.011

1. 475000 河南 開封，開封市兒童醫院檢驗科 2. 475002 河南 開封，開封市第二人民醫院病理科 3. 475000 河南 開封，開封市中心醫院檢驗科 4. 475000 河南 開封，開封市中心醫院輸血科