探析放射狀垂直取材法如何客觀地反映胃癌異質性

河南省漯河市第二人民醫(yī)院（451191）黃孝宇

1 資料與方法

1.1 一般材料 收集2013年3月～2016年2月間共44例胃癌，術前未經(jīng)放化療的胃癌根治性標本，年齡24～78歲，中位年齡57歲。根據(jù)1997年國際抗癌聯(lián)盟（UICC）的TNM分期標準，I～II期21例、III～IV期23例；N024例，N120例。

1.2 取材 每例標本沿大彎側剪開，洗去污物，4%中性緩沖甲醛固定過夜。同時常規(guī)取材和放射狀垂直取材，放射狀垂直取材就是從腫物中心放射狀切開分別取材，包括腫物的邊緣，逐項進行記錄。自動脫水，石蠟包埋切片，HE染色，鏡檢。癌組織異質性的判讀標準：兩種以上組織類型；病理分級差異；核級別差異；癌細胞密度差異；浸潤淋巴細胞種類及數(shù)量差異；纖維組織差異等。

1.3 免疫組化檢查 ①試劑：HER2：鼠抗人單克隆抗體，克隆號：B68; Ki67:7B11。試劑盒選用即用型免疫組織化學（IHC）二步法Envision廣譜染色試劑盒及DAB顯色試劑盒，均購自北京中杉金橋生物技術有限公司。②方法：依據(jù)HE結果分別挑選不同蠟塊、不同區(qū)域，進行HER2、Ki67染色。③HER2結果判定：0～1+視為陰性，2+～3+視為陽性。Ki67的判斷：表達陽性的細胞染色強度均呈中等以上強度，故僅用陽性細胞占所觀察同類細胞的百分比做為評價指標，細胞陽性率<10%為陰性表達；>10%為陽性表達。

2 結果

2.1 常規(guī)HE鏡檢中兩種取檢方法的異質性檢出的不同表現(xiàn) 總體χ2=58.619，P<0.01，說明兩種取材方法在癌組織的異質性的檢出上有著明顯的差異。放射性垂直取檢的方法有著更加明顯的優(yōu)勢，更能全面完整的反映出腫瘤本身的異質性。詳見附表。

2.2 HER2、Ki67在胃癌中的異質性表現(xiàn) 統(tǒng)計學方法采用χ2檢驗，P<0.05時認為有顯著性差異。在44例胃癌中，Her2陽性表達率為29.5%(13/44)，Ki67陽性表達率為68.2%（30/44）。Her2的表達與淋巴結轉移、病理分級、臨床分期間無明顯差異(P>0.05)。Ki67的表達與淋巴結轉移、病理分級及臨床分期有明顯差異，有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。

3 結論

常規(guī)的HE診斷是胃癌精準診斷的前提和基礎。胃癌又具有明確的異質性。放射狀垂直取檢方法是將病材中有浸潤可能、異質性區(qū)域重點取材的一種方法，這將是病理檢查的一次革命。有重點的有選擇的取材，于是就有了取材間隔的問題，有的間隔1cm，有的2cm，有的0.5cm。具有臨床以及教學意義的病材就詳細的取檢，而臨床常規(guī)工作就按照規(guī)矩來，既客觀又不浪費資源，讓胃癌的診斷更精準更有價值。

HER2定位于人17號染色體，該受體蛋白與HER家族成員及其配體之間相互作用，通過細胞間信號傳導來調節(jié)細胞生長、生存、分化及增殖[1]。該基因有著明顯的個體差異性，即便是同一個癌組織標本也具有很強的區(qū)域的差異性，這種區(qū)域的差異性是由其遺傳異質性導致的，同時它也是導致抗HER2治療不理想的重要原因。HER2遺傳異質性包括腫瘤內異質性和腫瘤間異質性。Ki67是目前應用最廣泛的細胞增殖標記，Ki67與胃癌細胞凋亡和增殖相關，癌組織分化差、異質性明顯，淋巴結轉移，Ki67表達越強。

附表 常規(guī)HE鏡檢中兩種取檢方法的癌組織異質性檢出的不同表現(xiàn)(例)

郭建波[2]等檢測67例胃癌標本中的HER2蛋白，其過表達率為22.4%，而在癌旁正常組織無表達。宋巖等報道83例晚期胃癌患者的HER2過表達和基因擴增的患者分別為25例(30.1%)和29例(34.9%)。寸麗英報道85例胃癌患者HER2蛋白過表達與胃癌的位置、臨床分期有關。王欽波研究發(fā)現(xiàn)Her-2強陽性表達率與性別、年齡、腫塊大小、浸潤程度、淋巴結轉移以及遠處轉移無關。

精準的診斷是精準治療的第一步，是基礎與關鍵，同時又是不斷進步與發(fā)展的。