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圍產期孕婦B群鏈球菌感染的檢測及耐藥性分析

2015-03-28 02:11:14許愛霞余躍華舒向榮
實驗與檢驗醫學 2015年1期
關鍵詞:耐藥檢測

許愛霞,余躍華,舒向榮

(江西省婦幼保健院,江西 南昌330006)

圍產期生殖道細菌感染易造成早產、死胎、胎膜早破、子宮內膜炎等疾病,分娩時經生殖道感染可引發嬰兒敗血癥、新生兒肺炎和腦膜炎,其中B群鏈球菌(Group B streptococcus,GBS)是主要致病菌之一。上世紀90年代以來,在發達國家GBS被列為圍產期感染的首要病原菌之一[1],而在國內GBS嚴重感染及胎兒、新生兒死亡的病例時有發生[2]。本文對1200例圍產期孕婦和非妊娠育齡婦女GBS感染情況進行了分析,現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 收集20l1年3月-20l3年12月在本院產科門診檢查或產科住院的圍產期孕婦600例,孕期35~37周,年齡2l~40歲,平均年齡29.3歲;同時收集同期在本院體檢的非妊娠育齡婦女600例,年齡19~41歲,平均年齡29.7歲,兩組一般資料比較無統計學差異(P>0.05)。常規婦產科體檢的同時,不作清潔處理,由醫師規范采集陰道拭子標本,立即送檢進行培養。

1.2 儀器和試劑 鏈球菌分型膠乳凝集試劑盒 (法國Biomeriux公司),二氧化碳培養箱(美國熱電公司),細菌鑒定儀(美國德林公司),哥倫比亞血瓊脂平板和抗菌藥物紙片(英國Oxoid公司)。

1.3 方法

1.3 .1標本采集 具體方法參照2002年CDC推薦的取材方法,在進行取材時,先擦去外陰分泌物,將無菌陰道棉拭子放入陰道下l/3內,旋轉l周采取陰道分泌物。

1.3 .2細菌培養鑒定 將陰道棉拭子直接涂在血平板上,在35℃5%CO2培養箱中孵育24~48h。觀察血平板上菌落特點,挑取可疑菌落,在血平板上進行純培養,然后進行涂片、革蘭染色鏡檢和相應的生化等鑒定。并同時用鏈球菌B群分型試劑盒做凝集試驗,用細菌鑒定儀鑒定,并操作CAMP試驗確認,陽性結果符合B群鏈球菌感染。

1.3 .3 藥敏試驗 采用紙片擴散法(K-B法),操作步驟依據《全國臨床檢驗操作規程》第3版[3]進行。選擇青霉素、氨芐西林、頭孢曲松、克林霉素、紅霉素、萬古霉素、左氧氟沙星7種抗菌藥物紙片。對紅霉素、克林霉素敏感的菌株做D試驗檢測。藥敏結果判斷依據2009年CLSI標準進行。

1.4 統計學處理 采用SPSSl5.0軟件進行數據處理和分析,計數資料用χ2檢驗,以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 GBS檢出情況 共檢出GBS101株,其中圍產期孕婦GBS檢出率為8.67%(52/600);非妊娠婦女GBS檢出率為8.17%(49/600),兩組比較差異無統計學意義(P>0.05)。GBS血清學分型包括A、B、C、D、F和G6種,各型均有檢出,其中以 B型(34.65%)、A 型(30.69%)、G 型(21.78%)為多見。 各年齡組的圍產期孕婦和非妊娠育齡婦女均可見到陽性結果。

2.2 耐藥性分析 101株GBS陽性標本全部進行鏈球菌藥物敏感試驗,7種抗菌藥物的耐藥率為青霉素(1.98%)、氨芐西林(2.97%)、頭孢曲松(3.96%)、萬古霉素(0.00%)、左氧氟沙星(17.82%)、紅霉素(22.77%)、克林霉素(26.73%)見表 1。

表1 圍產期孕婦B群鏈球菌感染藥敏實驗結果(%)

3 討論

B族溶血性鏈球菌 (Group B streptococcus,GBS)又稱無乳鏈球菌,自上世紀70年代以來,已被證實為圍產期母嬰感染的主要病原菌之一。GBS是一種寄生于人類下消化道及泌尿生殖道的條件致病菌,國外研究顯示健康人群GBS帶菌率可達15%~35%,妊娠婦女的帶菌率為10%~30%[4]。國內報道的妊娠婦女GBS帶菌率為3.5%~32.4%[5,6]。在本組圍產期婦女中GBS帶菌率8.67%,非妊娠育齡婦女帶菌率8.17%,兩組比較差異無統計學意義(P>0.05)。本組結果與國內的報道基本相近,與國外的報道有少許差異。分析原因可能有以下幾點:(1)檢測方法的差異:目前臨床檢測GBS方法有多種,但最常用的還是細菌培養法,盡管一些新型的檢測方法有較高的敏感性和特異性[7-9],但由于價格偏貴,尚未在臨床廣泛應用,檢測方法滯后可能是造成GBS感染漏診的原因[10];(2)取材方法、部位和檢查時間,以及取標本前患者服藥和身體狀態;(3)既往病史的影響:有流產史的產婦,有宮內節育器者,有婦科炎癥史者的陰道GBS帶菌顯著增多[11]。

本組鏈球菌藥物敏感試驗發現現培養分離出的101例GBS對萬古霉素敏感率100%,青霉素98.02%,氨芐青霉素97.03%,頭孢曲松96.04%,而對左氧氟沙星、紅霉素、克林霉素的敏感率分別為71.29%、63.37%、57.43%,與國內其他研究敏感率相似[12,13]。目前多數報道顯示B群鏈球菌對青霉素和氨芐青霉素敏感,但也有耐藥株出現。本組發現青霉素和氨芐青霉素有幾例耐藥,而且隨著抗生素廣泛使用,GBS對青霉素類耐藥性也會逐漸增高;而左氧氟沙星、紅霉素和克林霉素有較高的耐藥性,且紅霉素和克林霉素的耐藥率也高于國外文獻報道的16.7%和11%的耐藥率[14]。有研究報道GBS對紅霉素和克林霉素的耐藥主要由ermB基因介導[12]。根據表面抗原的有無和莢膜多糖體的結構差異,可將 GBS 分為不同的血清型(A、B、C、D、F和G6種型),決定何種血清型造成的感染,可發展相應的疫苗,并由此類疫苗接種來保護孕產婦及新生兒。目前GBS疫苗尚在臨床評估中,臨床仍以藥物治療為主。本組研究GBS圍產期孕婦感染B型(34.65%)、A 型(30.69%)、G 型(21.78%)為多見。

由于GBS圍產期感染有上升趨勢,且會對母嬰造成不良影響,故臨床應加大對孕產婦GBS感染的篩查力度,重視對GBS感染的研究,密切關注耐藥流行株的發展和傳播,加強臨床監測;采取可行方法,避免GBS感染可能給母嬰帶來的嚴重后果。發現高危孕產婦GBS陽性,應及時干預治療。

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