抗凝劑EDTA導致血小板假性減少現象的分析

仝德勝，楊靜，沈國強

(1、江蘇省血吸蟲病防治研究所，江蘇 無 錫214064；2、無錫市第九人民醫院，江蘇 無 錫214062)

血小板計數是臨床上最常規的實驗項目，是血常規的檢測指標之一，其結果的準確性直接影響到對患者的診斷和治療。隨著血細胞分析儀的廣泛推廣和使用，EDTA-K2作為血細胞分析的較為理想的抗凝劑已被廣泛使用，但EDTA可導致個別人血液中血小板發生聚集引起假性血小板減少(EDTA-PTCP)，因此引起誤診的病例，這種現象現在有越來越多的報道[1-3]。近年來我們在工作中發現幾例EDTA依賴性血小板減少的患者，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源 選取2012年8月-2014年5月在無錫市第九人民醫院住院患者8例和2014年6月在江蘇省血吸蟲病防治研究所健康體檢人員1例，其臨床癥狀均無皮膚紫癜、牙齦出血、鼻出血等癥狀。其中最早1例住院患者經輸注10單位機采血小板后，隔日檢測血小板，數量沒有明顯改變。

1.2 儀器和試劑 Sysmex XE-1800血液分析儀及原裝試劑，貝克曼-庫爾特Ac.T5diff AL血細胞分析儀及原裝試劑；OLYMPUS顯微鏡，改良牛鮑氏(Neubauer)計數板，自配人工計數血小板草酸銨稀釋液，BD公司生產的EDTA-K2真空采血管。

1.3 方法 第1例患者經專家會診后重新抽取4ml靜脈血分別由EDTA-K2抗凝2ml和肝素鈉抗凝2ml，兩份樣本在Sysmex XE-1800血液分析儀分別于10min和60min各檢測三次取均值，同時制備EDTA-K2抗凝血的涂片經瑞氏染色后鏡檢，觀察血小板的形態和聚集情況。另外取患者末梢血加入草酸銨稀釋液按全國臨床檢驗操作規程操作計數血小板并制作血涂片經瑞氏染色后鏡檢，觀察血小板的形態和聚集情況[4]。后8例都由第二日清晨抽血按上述方法檢測，其中江蘇省血吸蟲病防治研究所體檢人員1例在貝克曼-庫爾特Ac.T5diff AL血細胞分析儀上檢測

1.4 統計學處理 采 用SPSS 13.0統計軟件，計量資料以±s表示，采用t檢驗，P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2008年8月第一例患者在無錫第九人民醫院住院，檢測發現血小板結果25×109/L,病人沒有皮膚紫癜、牙齦出血、鼻出血等癥狀，后輸入10單位機采血小板后，隔日檢測血小板結果27×109/L，經會診，手工檢測血小板結果188×109/L，經EDTAK2抗凝血的血涂片由瑞氏染色鏡檢發現大量血小板聚集，末梢血涂片血小板散在無聚集。另外8例檢測結果見表1。

使用EDTA-K2抗凝劑兩次血小板計數(10min和60min)明顯低于使用抗凝劑肝素鈉和手工血小板計數，與后兩種方法計數均存在明顯差異 (P<0.05)；使用抗凝劑肝素鈉檢測的血小板數和手工檢測血小板數之間沒有明顯差異(P>0.05)。

3 討論

乙二胺四乙酸(EDTA)鹽對白細胞、紅細胞形態影響很小，因此國際血液學標準委員會(ICSH)推薦將EDTA-K2作為血細胞計數的首選抗凝劑。但EDTA-K2有時會引起血小板聚集，從而在血細胞分析儀上檢測時出現血小板假性減少，文獻報道發生率0.09%~0.21%[5-7]。其發生機制是由于EDTA-K2作為抗凝劑的前提下出現的免疫介導血液中的冷抗血小板自身抗體，使血小板發生凝聚。盡管臨床發生率低，但極易延誤診斷，造成不必要的治療，增加病人的經濟負擔，我們遇到的第一例患者就因此為患者輸入10單位機采血小板。

表1 3種檢測方法測定血小板結果比較

EDTA-PTCP患者一般除原發疾病臨床表現外，無皮膚黏膜紫癜、牙齦出血、鼻出血、胃腸道和泌尿系統出血和臨床表現。因此為排除EDTA-K2致血小板假性減少，有文獻報道，應重新采樣在EDTA-K2抗凝管中加入丁胺卡那霉素或使用枸櫞酸鈉抗凝管來解決，另外肝素鈉也可以作為解決血小板假性減少的抗凝劑使用，我們在實際工作中就是采用此方法，從結果上看，基本可以解決這個問題[8，9]。當然，為排除因血小板假性減少而發生誤診，檢驗醫生與臨床醫生應及時溝通，及時詢問病史。EDTA-K2致血小板假性減少的血小板計數和實際值相差很大，因此對臨床上無出血表現而血小板計數明顯減少患者，應引起臨床和檢驗醫生注意，要考慮EDTA-K2致血小板假性減少可能性，及時手工計數血小板或更換抗凝劑使用儀器分析并制作血涂片進行檢測[10]，避免誤診。

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