血清NGAL、Cys-C、RBP聯合檢測對糖尿病腎損傷早期診斷的臨床意義

朱文芳，沈建軍，韓 雙，付 濤，鄒愛民

(1.西安市長安醫院檢驗科，陜西 西安 710016；2.第四軍醫大學第二附屬醫院檢驗科，陜西 西安 710000)

血清NGAL、Cys-C、RBP聯合檢測對糖尿病腎損傷早期診斷的臨床意義

朱文芳1，沈建軍2，韓 雙1，付 濤1，鄒愛民1

(1.西安市長安醫院檢驗科，陜西 西安 710016；2.第四軍醫大學第二附屬醫院檢驗科，陜西 西安 710000)

目的 探討血清中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)、胱抑素C(Cys-C)和視黃醇結合蛋白(RBP)聯合檢測在2型糖尿病腎功能損傷早期診斷中的臨床意義。方法 選擇2015年11月至2016年10月西安市長安醫院內分泌科就診的220例2型糖尿病患者為觀察組，根據尿微量白蛋白與尿肌酐比值(ACR)將患者分為單純糖尿病(SDM)組83例、早期糖尿病腎病(EDN)組77例和臨床期糖尿病腎病(CDN)組60例，并選擇80例健康體檢者為對照組。采用膠乳免疫增強比濁法檢測血清Cys-C、RBP、NGAL，脲酶-谷氨酸脫氫酶法檢測血清尿素(UREA)，酶法檢測血清肌酐(CREA)，并對各組檢測結果進行比較分析。結果 SDM組患者的血清NGAL、CysC、RBP、UREA與CREA檢測結果與對照組比較差異均無統計學意義(P＞0.05)；EDN組患者的血清NGAL、CysC及RBP檢測結果與對照組比較差異均有統計學意義(P＜0.05)，血清UREA與CREA比較差異均無統計學意義(P＞0.05)；CDN組患者的血清NGAL、CysC、RBP、CREA及UREA檢測結果與對照組、SDM組及EDN組比較差異均有統計學意義(P＜0.05)。EDN組患者的血清NGAL、CysC、RBP陽性率分別為55.84%、59.74%、54.55%，均明顯高于SDM組的19.28%、16.87%、15.66，差異均有統計學意義(P＜0.05)，而血清UREA、CREA陽性率比較差異均無統計學意義(P＞0.05)；CDN組患者的血清NGAL、CysC、RBP、UREA、CREA陽性率高于EDN組和SDM組，差異均有統計學意義(P＜0.05)；血清NGAL、CysC、RBP在SDM組、EDN組、CDN組聯合檢測的陽性率分別為25.30%，68.83%，96.67%，均高于各單項檢測結果的陽性率；Pearson相關性分析結果顯示，血清NGAL、CysC、RBP與尿ACR檢測結果之間存在正相關(r=0.65、0.62、0.58，P＜0.05)。結論 血清NGAL、Cys-C和RBP可作為2型糖尿病患者腎損傷早期診斷的重要指標，聯合檢測可提高糖尿病腎病早期診斷的陽性率，對臨床識別和早期診斷糖尿病腎病有重要臨床意義。

胱抑素C；血清中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白；血視黃醇結合蛋白；Ⅱ型糖尿病；糖尿病腎病

近年來，隨著生活水平不斷提高，2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)的發病率逐步上升，糖尿病腎病(diabetic nephropahy，DN)是其最常見的并發癥，也是T2DM患者致殘或致死的主要原因，由于其呈不可逆的進行性發展導致腎功能損害甚至腎衰竭。因此，糖尿病患者在腎臟早期損傷時及時診斷并干預，具有重要的臨床意義。本文通過觀察血清NGAL、RBP、CysC檢測結果在2型糖尿病患者腎功能損傷不同時期的變化，探討其聯合檢測在DN早期診斷中的臨床意義。

表1 各組生化指標檢測結果比較s)

表1 各組生化指標檢測結果比較s)

注：與對照組比較，aP＜0.05;與SDM組比較，aP＜0.05；與EDN組比較，bP＜0.05。

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1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2015年11月至2016年10月西安市長安醫院內分泌科收治的220例2型糖尿病患者作為研究對象，其中男性125例，女性95例，平均年齡54歲，所有患者均符合2型糖尿病診斷標準[1]。研究[2]表明尿微量白蛋白與肌酐比值(ACR)測定是糖尿病早期腎損傷的敏感指標。依據尿微量白蛋白與肌酐比值將2型糖尿病患者分為3組：(1)單純糖尿病(SDM)組：ACR≤30 mg/g，共83例(男性48例，女性35例)；(2)早期糖尿病腎病(EDN)組：300 mg/g≥ACR＞30 mg/g，共77例(男性42例，女性35例)；(3)臨床期糖尿病腎病(CDN)組：ACR＞300 mg/g，共60例(男 35例，女25例)。所有研究對象均排除冠心病、肝病、急慢性炎癥、妊娠、自身免疫性疾病、Ⅰ型糖尿病等繼發及原發性腎臟疾病。選擇同期性別、年齡匹配的健康體檢者80例(男性46例，女性34例，平均年齡52歲)作為對照組，各組間受檢者的性別、年齡等一般資料比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 檢測方法 各組受檢者均予入組次日早晨空腹采集靜脈血3 mL，3 000 r/min離心5 min分離血清待測，同時收集晨尿3 mL，3 000 r/min離心5 min，取上清液待測。采用膠乳增強免疫比濁法檢測血清NGAL、RBP、CysC，參考范圍：NGAL 37～180 ng/mL，RBP 25～70 mg/L，CysC＜1.05 mg/L，采用酶法檢測血清尿素和肌酐，參考范圍：UREA男，3.1～8.0 mmol/L，女，3.1～8.8 mmol/L，CREA 男，57～97 μmol/L，女，41～81 μmol/L；同時采用透射比濁法檢測尿微量白蛋白及采用酶法檢測尿肌酐計算尿微量白蛋白與肌酐比值(ACR)，ACR=尿微量白蛋白/尿肌酐，ACR參考范圍0～30 mg/g；所有檢測項目均采用寧波美康技術股份有限公司試劑在TBA-120FR全自動生化分析儀檢測，各檢測項目均按標準操作規程進行。

1.3 統計學方法 應用SPSS18.0統計軟件進行數據分析，計量資料以均數±標準差(s)表示，組間多樣本均數比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA)，兩樣本均數比較采用t檢驗，陽性率比較采用χ2檢驗，均以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組生化指標檢測結果比較 SDM組血清NGAL、CysC、RBP、UREA、CREA檢測結果與對照組比較差異無統計學意義(P＞0.05)；EDN組血清NGAL、CysC及RBP檢測結果與對照組比較差異有統計學意義(t=25.63、30.12、21.62，P＜0.05)，而UREA與CREA差異無統計學意義(t=2.07、3.11，P＞0.05)；CDN組血清NGAL、CysC、RBP、CREA及UREA檢測結果與對照組、SDM組及EDN組比較差異均有統計學意義(P＜0.05)。血清NGAL、CysC、RBP的檢測結果隨著尿微量白蛋白/肌酐比值(ACR)的增高而升高，見表1。

2.2 血清NGAL、CysC、RBP檢測結果與尿ACR檢測結果的相關性 采用Pearson相關性分析，以ACR檢測結果為自變量，分別以血清NGAL、CysC、RBP檢測結果為因變量。相關性分析結果顯示血清NGAL、CysC、RBP與尿ACR檢測結果之間存在正相關關系(r=0.65、0.62、0.58，P＜0.05)。

2.3 糖尿病患者各組血清生化指標檢測結果陽性率比較 血清NGAL、CysC、RBP、UREA、CREA檢測結果超出正常參考值上線表示為陽性，各項目的陽性率計算公式為：陽性率=各組內陽性例數/各組總例數×100%。EDN組血清NGAL、CysC、RBP陽性率高于SDM組，差異有統計學意義(P＜0.05)，血清UREA、CREA陽性率差異無統計學意義(P＞0.05)，見表2；CDN組血清NGAL、CysC、RBP、UREA、CREA陽性率高于EDN 組，差異有統計學意義(P＜0.05)，見表 3；血清NGAL、CysC、RBP在SDM組、EDN組、CDN組聯合檢測的陽性率分別為25.3%、68.83%、96.67%，均高于各單項指標的檢測陽性率，且隨著并病情加重而增高。

表2SDM組與EDN組陽性率比較[例(%)]

表3CDN組與EDN組陽性率比較[例(%)]

3 討論

DN是T2DM主要慢性并發癥之一，近年來，隨著T2DM患病率的逐年上升，由此造成DN發病率劇增[2-3]。由于DN起病隱匿、缺乏典型的臨床表現，早期僅出現尿微量白蛋白增高[4]，故DN患者一旦出現蛋白尿，預示著腎病將呈進行性發展。血清UREA、CREA是腎功能損傷的傳統指標，在腎損傷時可升高，但由于腎臟具有強大的代償能力，血清UREA和CREA在腎損傷早期無明顯改變。本文結果顯示，對照組與單純糖尿病(SDM)組和早期糖尿病腎病(EDN)組的血清UREA與CREA檢測結果比較差異無統計學意義，而在臨床期糖尿病腎病(CDN)組有所增高，說明血清UREA與CREA作為早期腎損傷的指標靈敏性較差。目前臨床主要以UAER、CREA作為腎損害程度的評價以及腎衰竭的分期標準。因此，靈敏度與特異性高的生化指標用于早期腎損害的臨床診斷，對于DN的早期發現和積極防治具有重要的臨床意義。

CysC是胱氨酸蛋白酶抑制劑，由機體有核細胞產生，廣泛存在于各種組織中，經腎小球濾過而被清除，并在近曲小管重吸收，其產生速率穩定且濃度不受年齡、性別、飲食及其他病理變化等因素影響[5]，是反映腎小球濾過率的理想指標。RBP經腎小球濾過，由腎小管全部重吸收和降解。文獻報道，RBP對于早期腎功能的評價具有積極的臨床價值[6]。NGAL是診斷急性腎損傷(AKI)最有效的標志物之一[7]，作為急性時相反應蛋白，當機體發生炎癥反應或上皮細胞受到損傷刺激時，NGAL才被誘導并且在受損的腎小管高表達[8]，可能參與了DM發展為DN的過程。有學者發現在T2DM中，NGAL水平隨著尿微量白蛋白的水平增加而增加，這種變化出現在T2DM腎病的早期[9]，提示在T2DM中NGAL可作為DN早期腎損傷診斷依據。

本文結果顯示，血清NGAL、CysC、RBP檢測結果在EDN組明顯升高，并且EDN組患者血清NGAL、CysC、RBP陽性率明顯高于SDM組。在SDM組、EDN組、CDN組血清NGAL、CysC、RBP聯合檢測的陽性率分別為25.3%，68.83%，96.67%，均高于各單項指標檢測陽性率，且血清NGAL、CysC、RBP與尿微量白蛋白/尿肌酐比值(ACR)為正相關，證明血清NGAL、CysC、RBP檢測結果的升高與EDN的發生、發展密切相關。

文獻報道，30%～50%的T2DM患者會發生DN[10]，聯合檢測血清NGAL、CysC、RBP既能反映腎小球病變，又能反映腎小管病變，對DN的早期診斷具有重要的臨床意義。

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Value of combined detection of serum neutrophil gelatinase associated lipid delivery protein,Cystatin C and

retinol binding protein in the early diagnosis of diabetic renal injury.ZHU Wen-fang1,SHEN Jian-jun2,HAN Shuang1,FU Tao1,ZOU Ai-min1.1.Department of Clinical Laboratory,Chang,an Hospital,Xi'an 710016,Shaanxi,CHINA;2.Department of Clinical Laboratory,Tangdu Hospital of the Fourth Military Medical University,Xi'an 710000,Shaanxi,CHINA

Objective To investigate the clinical significance of combined detection of serum neutrophil gelatinase associated lipid delivery protein(NGAL),Cystatin C(Cys-C)and retinol binding protein(RBP)in the early diagnosis of renal function impairment in type 2 diabetes mellitus(T2DM).Methods From November 2015 to October 2016,220 patients with T2DM who admitted to Department of Endocrinology of Chang,an Hospital were selected as the observation group.According to urinary albumin creatinine ratio(ACR),these patients were divided into diabetes mellitus(SDM)group(n=83),early diabetic nephropathy(EDN)group(n=77),and clinical stage of diabetic nephropathy(CDN)group(n=60),and 80 healthy persons were chosen as the control group.Serum Cys-C,RBP and NGAL were detected by latex immunoassay,and serum urea(UREA)was detected by urease glutamate dehydrogenase method.Serum creatinine(CREA)was detected by enzyme method,and the results of each group were compared and analyzed.Results There was no significant difference between the SDM Group and the control group in serum NGAL,CysC,RBP,UREA and CREA detection results(P＞0.05);there was significant difference between the EDN Group the control group in serum NGAL,CysC and RBP detection results(P＜0.05),while there was no significant difference in UREA and CREA(P＞0.05);there were significant differences in serum NGAL,CysC,RBP,CREA and UREA results in the CDN group versus those in the control group,SDM group and EDN group(P＜0.05).Serum NGAL,CysC and RBP positive rates in the EDN group were 55.84%,59.74%,54.55%,respectively,which were significantly higher than corresponding 19.28%,16.87%,15.66%in the SDM group(P＜0.05),while there was no significant difference in the positive rates of serum UREA and CREA(P＞0.05);serum NGAL,CysC,RBP,UREA,CREA in the CDN group were significantly higher than those in the EDN group and SDM group(P＜0.05);the combined detection positive rate of serum NGAL,CysC,RBP in the SDM group,EDN group,CDN group were 25.30%,68.83%,96.67%,respectively,which were significant higher than those of the single detection results.Pearson correlation analysis showed that there was a positive correlation be-tween the serum levels of NGAL,CysC,RBP and urinary ACR test results(P＜0.05).Conclusion Serum NGAL,Cys-C and RBP can be used as the type 2 diabetic kidney important indexes in early diagnosis of injury.Combined detection of these indexes can improve the positive rate of early diagnosis of diabetic nephropathy,and has important significance for clinical identification and early diagnosis of diabetic nephropathy.

Cystatin C(CysC);Neutrophil gelatinase-associated lipocalin(NGAL);Serum retinol binding protein(RBP);Type 2 diabetes mellitus(T2DM);Diabetic nephropathy

R587.2

A

1003—6350（2017）19—3169—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.19.024

2017-03-28)