Th17/Treg在預測多發性骨髓瘤首次化療后感染中的價值

沈 健，鄭 瑞

(臺州醫院，浙江 臨海 317000)

·基礎與臨床研究·

Th17/Treg在預測多發性骨髓瘤首次化療后感染中的價值

沈 健，鄭 瑞

(臺州醫院，浙江 臨海 317000)

目的：探討多發性骨髓瘤(MM))患者首次化療后感染的影響因素及Th17/Treg在預測首次化療后感染的價值。方法根據是否發生首次化療后感染，將MM患者分為感染組49例和非感染組45例，采用Logistic回歸分析探討首次化療后感染的影響因素。采用流式細胞儀檢測Th17和Treg，比較2組的差異，采用受試者工作特征曲線分析Th17/Treg預測MM患者感染的敏感度與特異度。結果MM患者首次化療后感染發生率為52.13%；感染組Th17細胞、Th17/Treg比值顯著高于非感染組，感染組Treg細胞顯著低于非感染組，差異均有統計學意義(P<0.05)。ROC曲線下面積=0.818，通過ROC曲線確定cutoff值為1.84，敏感度為0.813，特異度為0.789。Logistic回歸分析提示，Th17/Treg、住院時間、血肌酐、白蛋白、年齡均為MM患者感染的影響因素。結論Th17/Treg是MM患者發生首次化療后感染的影響因素，測定Th17/Treg可以監測MM患者的免疫狀態，預測其首次化療后感染風險。

多發性骨髓瘤；Th17；Treg；感染；化療

Abstract: [Objective] To explore the value of peripheral blood Th17 and Treg cells in predicting the infection after primary chemotherapy in patients with multiple myeloma(MM). [Method] The patients with MM were divided into infection group and non- infection group according to whether the occurrence of infection after primary chemotherapy. The Logistic regression analysis was used to explore the risk factors of infection. The peripheral blood Th17 and Treg cells were measured by flow cytometry and were compared between the two groups. The receiver operating characteristic curve (ROC) was used to analyze the sensitivity and specificity of Th17/Treg in predicting the infection of MM. [Result] The incidence of infection in patients with MM was 52.13%. The Th17 and Th17/Treg cells in infection group were significantly higher than that in the non infection group (P<0.05), and the Treg cell in infection group was significantly lower than that in non infection group(P<0.05). The area under the ROC curve, the cutoff value, the sensitivity and the specificity was 0.818, 1.84, 0.813 and 0.789, respectively. Logistic regression analysis showed that the Th17/Treg, hospitalization time, serum creatinine, albumin, age were the influence factors of infection after primary chemotherapy in MM patients. [Conclusions] TH17/TREG is an infection factor for MM after primary chemotherapy. Determination of Th17/Treg level can monitor immune status and predicted the risk of infection.

Keywords: Multiple myeloma; Th17; Treg; infection; chemotherapy

Treg細胞與Th17細胞比例失衡在很多自身免疫性疾病的發生和發展中具有重要作用[1]。近年來研究[2]發現，多發性骨髓瘤(Multiple Myeloma，MM)患者也存在Treg細胞與Th17細胞比例失衡，而且在初發、平臺期、復發/難治患者中具有顯著差異，提示該免疫失衡在MM發生和發展過程具有重要作用。本研究以MM患者為研究對象，探討Th17/Treg在預測MM首次化療后感染中的價值，為預防MM患者感染提供幫助。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2010年2月至2015年2月我院收治的94例MM患者為研究對象。納入標準：(1)初發病例，未經過治療；(2)入院前、入院48h內及化療前均無感染表現；(3)簽署知情同意書。排除標準：(1)合并自身免疫性疾病、艾滋病、梅毒及其他腫瘤；(2)不配合治療，擅自停藥者；(3)年齡<18歲。

1.2 方法

1.2.1 感染診斷 參照第12版《實用內科學》[3]：(1)呼吸道感染。根據臨床癥狀(咳嗽)、體征和實驗室檢查(肺CT)；(2)胃腸道感染。根據腹瀉、腹痛癥狀及實驗室檢查(大便常規白細胞陽性、培養找到病原微生物)；(3)泌尿系感染。根據癥狀(尿頻、尿急、尿痛、腰疼、發熱)和實驗室檢查(尿常規提示尿白細胞陽性，中段尿培養培養到微生物)；(4)敗血癥。體溫高于38℃，伴有寒戰，血培養陽性，但無特別侵入途徑。

1.2.2 觀察指標 (1) 患者一般資料。在患者本次入院時收集一般資料，包括性別、年齡、疾病分期、M蛋白免疫學分型、化療方案、住院時間等；(2)實驗室指標。包括血肌酐、白蛋白、血紅蛋白、Th17細胞、Treg細胞。所有化驗檢查均采用入院次日清晨空腹血檢測。其中血肌酐、白蛋白、血紅蛋白采用日本OLYMPUS-5400全自動生化分析儀檢測。Treg細胞和Th17細胞，均采用FACSCalibur流式細胞儀檢測，采用CellQuest Pro軟件分析數據，具體步驟參照說明書。

1.3 統計學處理

采用SPSS18.0軟件進行數據處理。組間比較采用t檢驗和χ2檢驗，采用受試者工作特征(ROC)曲線分析Th17/Treg預測MM患者感染的敏感度與特異度，采用Logistic回歸分析MM患者首次化療后感染的影響因素。P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 MM患者感染發生率

94例MM患者中，49例發生感染，占52.13%。其中呼吸道感染30例(61.22%)；泌尿道感染6例(12.24%)；胃腸道感染5例(10.20%)；敗血癥3例(6.12%)，混合感染5例(10.20%)。

2.2 感染組和非感染組Th17/Treg的比較

感染組Th17細胞、Th17/Treg比值顯著高于非感染組，感染組Treg細胞顯著低于非感染組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 感染組和非感染組Th17/Treg的比較

2.3 ROC曲線分析

以感染組Th17/Treg為觀察組，以非感染組Th17/Treg為對照組，繪制ROC曲線。曲線下面積=0.818，P=0.024，見圖1。通過ROC的移動診斷界點(Coordinats of the Curve)確定cutoff值為1.84，敏感度為0.813，特異度為0.789。

圖1 ROC曲線

2.4 MM患者首次化療后感染影響因素的單因素分析

感染組和非感染組年齡、血肌酐、白蛋白和住院時間比較，差異有統計學意義(P<0.05)；2組性別、D-S分期、ISS分期、M蛋白免疫學分型、漿細胞比例、血紅蛋白和化療方案比較，差異無統計學意義(P>0.05)，見表2。

表2 MM患者首次化療后感染影響因素的單因素分析

注：D-S分期：Durie-Salmon分期；ISS分期：國際分期；VAD：長春新堿、阿霉素、地塞米松；PAD：硼替佐米、阿霉素、地塞米松；MPT：馬法蘭、潑尼松、沙利度胺。年齡、漿細胞比例、血肌酐、白蛋白、血紅蛋白和住院時間的界值參照既往文獻[1, 5]得出的多發性骨髓瘤患者化療后感染的危險因素。

2.5 MM患者感染影響因素的Logistic回歸分析

以是否發生感染為因變量(否=0，是=1)，以單因素分析有統計學意義變量為自變量[(年齡：<65歲=0，≥65=1)、血肌酐(≤176μmol/L =0，>176μmol/L =1)、(白蛋白：<37g/L=0, ≥37g/L=1)、(住院時間：<4周=0，≥4周=1)、Th17/Treg：<1.84=0，≥1.84=1)，進行Logistic回歸分析，結果提示Th17/Treg、住院時間、血肌酐、年齡均為MM患者感染的危險因素， 其中Th17/Treg是主要危險因素，白蛋白為MM患者感染的保護因素，見表3。

表3 MM患者感染影響因素的Logistic回歸分析

3 討論

研究[4]發現，MM患者感染的影響因素包括住院時間、血肌酐、白蛋白、年齡，本研究與其結果相似，再次證實這些因素為MM患者感染的影響因素。本研究發現，Th17/Treg為MM患者首次化療后感染的影響因素。Treg細胞不僅能通過細胞間直接接觸抑制效應性T細胞功能，還能通過分泌細胞因子等多種方式發揮抑制作用，故具有免疫無能和免疫抑制兩大特性，近年來發現具有抗炎作用[5]。Prabhala等[6]研究發現，在MM患者中CD4+、CD25+細胞數量增加，而表達Foxp3的調節T細胞的數量明顯減少，且這些細胞有功能缺陷。本研究發現，感染組MM患者外周血中Treg細胞低于非感染組，提示感染組MM患者抗炎作用減弱。Th17細胞通過其分泌的細胞因子來促進中性粒細胞的動員、募集和活化，介導促炎癥反應[7]。本研究發現，感染組患者外周血Th17細胞顯著高于非感染組，提示感染組MM患者外周血Th17細胞比例增多，促炎作用增強。目前很多研究都發現Th17/Treg比例失衡在MM發病過程中起重要作用，本研究發現，感染組患者Th17/Treg比值顯著高于非感染組，提示感染組的免疫失衡明顯重于非感染組，這可能為其發生感染的重要原因。最近白如雪等[8]對重癥急性胰腺炎患者進行研究發現，繼發感染組Th17/Treg比值顯著高于非感染組，提示Th17/Treg和重癥急性胰腺炎感染相關，但未探討兩者的因果關系。本研究采用Logistic回歸分析，證實了Th17/Treg為MM患者并發感染的影響因素，并采用ROC曲線找出了感染的cutoff值，提示臨床醫生，對于Th17/Treg≥1.84的MM患者感染風險可能增加，應采用合理的預防措施。

綜上所述，并發感染的MM患者Th17/Treg失衡更嚴重，Th17/Treg為MM并發感染的影響因素，糾正Th17/Treg失衡可能為降低MM患者感染的新思路。但本研究Th17/Treg診斷分界點ROC曲線下面積小于0.9，且靈敏度和特異度并不高，還需進一步擴大樣本加以確定。

[1]Rafiee M, Gharagozloo M, Ghahiri A, et al. Altered Th17/Treg Ratio in Recurrent Miscarriage after Treatment with Paternal Lymphocytes and Vitamin D3: a Double-Blind Placebo-Controlled Study[J]. Iran J Immunol, 2015,12(4):252-262.

[2]李晶晶,牛倩,唐笛嬌,等.多發性骨髓瘤患者外周血Th17和Treg細胞比率的平衡關系研究[J].中華血液學雜志,2013,34(11):936-940.

[3]陳灝珠.實用內科學[M].第12版.北京:人民衛生出版社,2005.

[4]陳文婷,姚紅霞,吳巨峰,等.多發性骨髓瘤患者化療后感染的研究[J].中華醫院感染學雜志,2014,24(23):5849-5850.

[5]Feng P, Yan R, Dai X, et al. The alteration and clinical significance of Th1/Th2/Th17/Treg cells in patients with multiple myeloma[J]. Inflammation, 2015, 38(2):705-709.

[6]Prabhala RH, Neff P, Bae JE, et al．Dysfunctional T regulatory cells in multiple myeloma[J]. Blood, 2006, 107(1): 301-304．

[7]Prabhala RH, Pelluru D, Fulciniti M, et al．Elevated IL-17 produced by Th17 cells promotes myeloma cell growth and inhibits immune function in multiple myeloma[J]. Blood, 2010, 115(26):5385-5392.

[8]白如雪,杜時雨,段軍,等. Th17/Treg免疫平衡在老年人重癥急性胰腺炎繼發性感染中的變化及意義[J].中華老年醫學雜志,2015,34(6):630-634.

ThevalueofperipheralbloodTh17andTregcellsinpredictingtheinfectionafterprimarychemotherapyinpatientswithmultiplemyeloma

SHENJian,ZHENGRui

(Taizhou Hospital, Zhejiang 317000, China)

沈 健(1980-)，男，浙江臨海人，碩士，主治醫師。研究方向：多發性骨髓瘤發病機制

R551.3

B

1672-0024(2017)01-0035-04