分子生物學(xué)在食品微生物檢測中的應(yīng)用探究

陳爽爽

摘 要 隨著社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，社會民眾對于食品的需求已經(jīng)不僅限于滿足溫飽，食品安全以及食品品質(zhì)更是社會公眾關(guān)注的重點問題。與此同時，全球經(jīng)濟(jì)一體化發(fā)展進(jìn)程的不斷加快，各種食品進(jìn)出口活動也不斷頻繁，進(jìn)出口食品的安全檢疫的工作要求也逐漸提升。本文通過對分子生物學(xué)在食品微生物檢測中的應(yīng)用進(jìn)行深入探究，分析分子生物學(xué)以及其學(xué)術(shù)應(yīng)用的價值，并分析常見的分子生物學(xué)方法在食品微生物檢測中的應(yīng)用方式，旨在促進(jìn)進(jìn)出口食品檢疫工作水平的提升。

關(guān)鍵詞 分子生物學(xué)；食品微生物；檢測；應(yīng)用

中圖分類號 Q7 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 2095-6363（2017）17-0016-01

科學(xué)技術(shù)的發(fā)展進(jìn)步，以分子生物學(xué)為典型代表的生命科學(xué)也逐漸受到社會的關(guān)注，其應(yīng)用領(lǐng)域也逐漸拓展，現(xiàn)代儀器設(shè)備、電子信息技術(shù)等技術(shù)水平的提升，也是分子生物學(xué)的工作效率、工作水平得到明顯的提升。食品微生物檢測是應(yīng)用分子生物學(xué)進(jìn)行食品安全檢測的重要方式，為保證食品安全檢疫工作的便捷性和準(zhǔn)確性提供重要保證。

1 分子生物學(xué)及其應(yīng)用價值

分子生物學(xué)是基于分子性質(zhì)、分子觀測等技術(shù)方式來研究各種生命現(xiàn)象的基礎(chǔ)學(xué)生，對不同細(xì)胞成分物理以及化學(xué)性質(zhì)都會存在差異，進(jìn)而引發(fā)不同的生命現(xiàn)象。經(jīng)濟(jì)社會的發(fā)展，食品生產(chǎn)和經(jīng)營企業(yè)將經(jīng)濟(jì)利益置于自身經(jīng)濟(jì)活動的首位，因而會將各種不符合人類食用標(biāo)準(zhǔn)的物質(zhì)添加到食品中，或者因為食品生產(chǎn)存儲環(huán)節(jié)沒有符合相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)，使產(chǎn)品性質(zhì)發(fā)生變化，這些食品物質(zhì)都會對人類的身體健康造成一定程度的危害，甚至威脅到社會的和諧穩(wěn)定。經(jīng)濟(jì)全球化、食品國際化的經(jīng)濟(jì)發(fā)展趨勢，使食品貿(mào)易活動不斷頻繁，食品安全問題也不僅限于國內(nèi)經(jīng)濟(jì)市場中，也成為世界經(jīng)濟(jì)發(fā)展關(guān)注的重點問題。食品安全檢疫是食品進(jìn)出口監(jiān)管工作的重點工作內(nèi)容，傳統(tǒng)的食品微生物檢測方法工作程序較為繁瑣、檢測效率較為低下，已經(jīng)不能滿足現(xiàn)代社會的發(fā)展需求，分子生物學(xué)檢測方式為檢疫工作人員拓展了更為精準(zhǔn)的工作方式，并因為其明顯的應(yīng)用優(yōu)勢使其得到廣泛的推廣。

2 常見的分子生物學(xué)方法在食品微生物檢測中的應(yīng)用方式

2.1 基因探針技術(shù)

基因探針技術(shù)又被稱為核酸分子雜交技術(shù)，為進(jìn)行DNA分析技術(shù)應(yīng)用奠定了良好的應(yīng)用基礎(chǔ)，得到了相關(guān)學(xué)術(shù)領(lǐng)域的廣泛認(rèn)可，基因探針技術(shù)以對核酸進(jìn)行基礎(chǔ)配對為應(yīng)用原理，通過對帶有不同素位標(biāo)記以及非同位素標(biāo)記的DNA片段以及RNA片段進(jìn)行檢測，進(jìn)而測定是否含有某些微生物物質(zhì)的核苷酸，這種方法能夠準(zhǔn)確地檢測出病性微生物，并不會對非病性微生物造成干擾，在學(xué)術(shù)界得到廣泛的應(yīng)用認(rèn)可，能夠檢測出一些特異形式的RNA，對任意一種微生物都能夠敏感獲知。雖然其具有明顯的應(yīng)用優(yōu)勢，但是也要認(rèn)識到其在應(yīng)用過程中存在的一些不足之處，比如：對操作人員的身體會造成一定危害、操作過程較為繁瑣、檢驗成本相對較高、廢氣物難處理等，這些問題的存在也是其應(yīng)用受到一定程度的限制。

2.2 PCR技術(shù)

PCR技術(shù)主要以變性技術(shù)和復(fù)性技術(shù)為理論應(yīng)用基礎(chǔ)，借助DNA聚合酶在外部進(jìn)行使用，并與引物引導(dǎo)以及DNTP相配，在幾個小時內(nèi)促使模板能夠?qū)崿F(xiàn)數(shù)以百萬倍的增長，進(jìn)而對DNA進(jìn)行選擇性的放大，使檢測結(jié)果能夠及時準(zhǔn)確，在致病性食品微生物檢測領(lǐng)域中的應(yīng)用作用也愈加明顯，技術(shù)應(yīng)用的前提和關(guān)鍵是能夠?qū)Π形恍蛄羞M(jìn)行準(zhǔn)確選擇，保證擴(kuò)增結(jié)果的準(zhǔn)確性，提升檢測工作的靈敏度，避免檢測結(jié)果出現(xiàn)假性顯示結(jié)果。

在PCR技術(shù)應(yīng)用基礎(chǔ)之上還可以應(yīng)用熒光定量PCR技術(shù)，能夠?qū)崿F(xiàn)定時定量的檢測結(jié)果，主要的應(yīng)用方式使在PCR技術(shù)應(yīng)用期間的變化情況，利用熒光信號進(jìn)行直接的測定，在經(jīng)過科學(xué)軟件的動態(tài)檢測，以實現(xiàn)對產(chǎn)物的自動擴(kuò)增，進(jìn)而獲得精準(zhǔn)的檢測結(jié)果，此種檢測方法能夠準(zhǔn)確的檢測乳酸菌、沙門氏菌、志賀菌等微生物。

2.3 質(zhì)粒DNA圖譜分型技術(shù)

質(zhì)粒DNA圖譜分型技術(shù)是最早進(jìn)行分型管理與控制技術(shù)應(yīng)用，對微生物的流行病學(xué)原理進(jìn)行分析的技術(shù)應(yīng)用方式。進(jìn)行這種技術(shù)應(yīng)用需要對檢測進(jìn)行質(zhì)粒DNA的提取，并對DNA進(jìn)行技術(shù)分離，不同菌株會存在質(zhì)粒DNA的排列差異，在此技術(shù)應(yīng)用的過程中需要根據(jù)不同物質(zhì)的不同質(zhì)粒DNA圖譜來保證分離工作的有效性，進(jìn)而實現(xiàn)對技術(shù)的合理應(yīng)用。質(zhì)粒圖譜的再現(xiàn)性和分辨性能夠通過限制位內(nèi)切酶消化質(zhì)粒得以提高，不同質(zhì)粒的位內(nèi)切酶的位點位置以及頻率是存在差異的，但是非染色體物質(zhì)卻是能夠很容易獲得，根據(jù)不同的質(zhì)粒指紋圖譜能夠?qū)α餍胁W(xué)菌株進(jìn)行判定，進(jìn)而得到準(zhǔn)確的檢測效果。此技術(shù)的應(yīng)用局限行為，不具備質(zhì)粒或者中分離株中只含有一到兩個質(zhì)粒的病原微生物檢測不能應(yīng)用此項技術(shù)。

2.4 基因芯片技術(shù)

基因芯片技術(shù)是借助顯微打印技術(shù)的綜合技術(shù)應(yīng)用手段，將核酸探針固定與支持物質(zhì)的表面，并能夠使其與待檢樣本進(jìn)行基因雜交，對雜交的信號進(jìn)行技術(shù)檢測，能夠大幅提升基因檢測的速度和準(zhǔn)確性性。芯片探針與待檢樣本中的靶基因片段實現(xiàn)特異性雜交，首先將芯片的表面放置寡核苷酸點樣，并對其進(jìn)行微生物技術(shù)處理，將核酸進(jìn)行擴(kuò)增，應(yīng)用熒光素進(jìn)行標(biāo)記各種基因，使其能夠進(jìn)行雜交，在利用顯微掃描儀對熒光分布方式進(jìn)行科學(xué)分析，進(jìn)而對待檢樣本中的微生物進(jìn)行分析。基因探針技術(shù)與基因芯片技術(shù)存在一定相似之處，但是基因芯片技術(shù)需要以探針技術(shù)進(jìn)行一定程度的應(yīng)用，只需要能夠通過一次基因雜交過程便能夠快速的檢測出靶基因，提升其檢測效率和準(zhǔn)確性，這種方式是進(jìn)行有害微生物檢測重要技術(shù)應(yīng)用方式。

此外，還有很多微生物檢測技術(shù)在食品微生物檢測中也有廣泛的應(yīng)用空間，比如：SNP技術(shù)、RFLP技術(shù)，但是不同的應(yīng)用技術(shù)都有自身的應(yīng)用優(yōu)勢和應(yīng)用缺陷，也便體現(xiàn)不同的應(yīng)用范圍，因而分子生物學(xué)應(yīng)用還有更為廣闊的技術(shù)改進(jìn)和提升空間。

3 結(jié)論

食品安全問題日趨嚴(yán)峻的形勢之下，應(yīng)用分子生物學(xué)進(jìn)行食品微生物檢測已經(jīng)是必然發(fā)展趨勢，只有不斷將技術(shù)應(yīng)用與實踐工作相結(jié)合，不斷總結(jié)技術(shù)應(yīng)用經(jīng)驗，針對不同的檢測范圍應(yīng)用針對性技術(shù)，促進(jìn)檢測工作效率的提升，并對新型技術(shù)積極進(jìn)行學(xué)習(xí)和應(yīng)用實踐，為食品檢疫工作水平的提高提供保證。

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