胃癌患者外周血MDA、CK-18及CA72-4水平變化及臨床意義

史加寧 耿小平 汪 泳

(安徽醫科大學第二附屬醫院普外科，安徽 合肥 230601)

胃癌患者外周血MDA、CK-18及CA72-4水平變化及臨床意義

史加寧 耿小平 汪 泳

(安徽醫科大學第二附屬醫院普外科，安徽 合肥 230601)

目的探討胃癌患者外周血丙二醛(MDA)、角蛋白(CK)-18及CA72-4水平變化及臨床意義。方法選取原發性胃癌患者76例為實驗組，對照組46例為正常健康體檢者。入院后晨起空腹抽取肘靜脈血4 ml，采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測兩組血清中MDA、CK-18及CA72-4水平，不同分期MDA、CK-18及CA72-4水平之間的相關性及與胃癌臨床病理特點的關系。結果實驗組血清中MDA與CK-18水平明顯高于對照組(P<0.01)。胃癌患者血清中MDA、CK-18及CA72-4水平隨著TNM分期的增高而升高(P<0.01)；有淋巴結轉移及腫瘤突破漿膜的胃癌患者血清中MDA、CA72-4水平明顯高于沒有淋巴結轉移和腫瘤未突破漿膜層的胃癌患者(P<0.05)，MDA、CA72-4水平在是否有遠處轉移及病理分化程度之間無明顯差異(P>0.05)；有遠處轉移的胃癌患者血清中CK-18水平較沒有遠處轉移患者明顯升高(P<0.01)；但CK-18水平在是否有淋巴結轉移、是否突破漿膜層、病理分化程度之間無明顯差異(P>0.05)。結論MDA、CK-18及CA72-4水平能夠作為胃癌診斷的生化指標，作為判斷胃癌預后和術后復發的參考指標。

胃癌；丙二醛；角蛋白(CK)-18；CA72-4

胃癌是發生于胃竇、賁門、胃體、全胃甚至大部分胃的惡性腫瘤，胃黏膜上皮細胞增殖/凋亡系統動態失衡，凋亡因子被抑制，胃上皮細胞不受控制的增殖、分化而形成胃癌〔1,2〕。目前臨床上胃癌的治療方法是以手術為主，放化療為輔，早期胃癌5年生存率在90%以上，但早期胃癌無明顯癥狀，待發現時多已是胃癌晚期〔3〕。因此，早期診斷、早期治療是延長胃癌患者生存期的關鍵。腫瘤標志物是早期診斷胃癌的重要指標，但是目前胃癌腫瘤標志物特異性及敏感性較差〔4〕。研究發現〔5〕，丙二醛(MDA)與角蛋白CK-18及CA72-4在腫瘤的發生、發展、浸潤和轉移過程中發揮重要的作用。本文探究血清中MDA、CK-18及CA72-4水平診斷胃癌的價值及機制。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取安徽醫科大學第二附屬醫院普外科2014年3月至2015年2月診斷為原發性胃癌的患者76例為實驗組，男57例，女19例，年齡44～80歲，采用國際抗癌聯盟(UICC)TNM分期標準，Ⅰ期12例，Ⅱ期20例，Ⅲ期30例，Ⅳ期14例；有淋巴結轉移48例，無淋巴結轉移28例；腫瘤突破漿膜層57例，沒有突破漿膜層19例；遠處轉移10例，沒有遠處轉移66例；病理高分化7例，中分化34例，低分化35例。對照組46例，為正常健康體檢者，男25例，女21例，年齡〔平均(51.2±7.7)〕歲。實驗組均經影像學、病理等確定診斷。兩組的年齡、性別、文化程度、家庭背景等一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2診斷標準 根據胃癌臨床治療指南確定診斷標準〔6〕：①早期患者有惡心、嘔吐或類似于消化性潰瘍的上消化道癥狀；②食欲減退、消瘦、乏力、貧血；③胃部疼痛及體重減輕；④X線鋇餐檢查有充盈缺損；⑤螺旋CT、MRI等影像學檢查能夠輔助診斷和臨床分期；⑥纖維胃鏡病理活檢是診斷胃癌的金標準。

1.3納入標準 符合原發性胃癌的診斷標準；患者年齡40～80歲，能為自己做主；患者及家屬對本研究了解知情并自愿參與和簽署知情同意書。

1.4排除標準 ①精神、神志異常不能配合者；②患有嚴重心、肝、腎、肺、腦疾病者；③患有肺癌、肝癌、腎癌、腦癌等其他惡性腫瘤者；④患有獲得性免疫缺陷綜合征、梅毒、病毒性肝炎、結核等傳染病者；⑤患有再障、白血病等血液性疾病者；⑥近3個月服用抗幽門螺桿菌及腫瘤治療患者。

1.5方法

1.5.1血液采集 所有患者在未進行任何介入、藥物和手術治療前，于晨起空腹抽取肘靜脈血4 ml，加入含乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝劑的真空管中混勻，并立即將樣本置于4℃的冰箱中2 h，3 000 r/min離心20 min后分離血清，將血清置于EP管中并放于-80℃冰箱中保存待檢。

1.5.2外周血MDA、CK-18及CA72-4水平檢測 標本解凍后，采用ELISA方法檢測標本中MDA、CK-18及CA72-4水平。試劑盒由武漢優爾生科技股份有限公司提供，并且嚴格按照說明書操作。

1.6統計學方法 應用SPSS17.0軟件，正態計量資料用組間比較采用t檢驗，兩組之間相關性采用Spearman相關分析。

2 結 果

2.1兩組血清MDA、CK-18及CA72-4水平比較 實驗組血清MDA、CK-18及CA72-4水平明顯高于對照組(P<0.01)。見表1。

表1 兩組血清MDA、CK-18及CA72-4水平比較

2.2胃癌患者血清中MDA、CK-18、CA72-4與臨床病理參數關系比較 胃癌患者血清中MDA、CK-18及CA72-4水平隨著TNM分期的增高而升高(P<0.01)；有淋巴結轉移及腫瘤突破漿膜的胃癌患者血清中MDA、CA72-4水平明顯高于沒有淋巴結轉移和腫瘤未突破漿膜層的胃癌患者(P<0.05)，MDA、CA72-4水平在是否有遠處轉移及病理分化程度之間無明顯差異(P>0.05)；有遠處轉移的胃癌患者血清中CK-18水平較沒有遠處轉移患者明顯升高(P<0.01)；但CK-18水平在是否有淋巴結轉移、是否突破漿膜層、病理分化程度之間無明顯差異(P>0.05)。見表2。

表2 胃癌患者血清中MDA、CK-18、CA72-4與臨床病理參數的關系

3 討 論

隨著生物分子技術的發展，目前腫瘤標志物的檢測已成為診斷惡性腫瘤的重要依據。但是，現有的腫瘤標志物對胃癌的敏感性和特異性較差，在臨床上容易被忽略。探索新的胃癌血清學指標和腫瘤標志物是提高胃癌診斷率的熱點研究。

MDA是一系列自由基反應的最終變性產物，自由基在腫瘤的發生發展中起到重要的作用，能夠引起生物膜脂質過氧化，MDA的含量可反映脂質過氧化反應的程度。本研究結果中實驗組血清中MDA含量明顯升高，說明胃癌患者機體內自由基活性增強，使過氧化反應增強，導致脂質過氧化物明顯增多。氧自由基作用于細胞膜，使細胞膜的通透性和流動性改變，新生離子通道，引起Ca2+大量內流，破壞細胞內線粒體和溶酶，引起細胞死亡。本研究結果也顯示，MDA高水平表達與胃癌的侵襲力增強、惡性程度增高有關。

CK-18為一種存在于上皮細胞分化較特異的蛋白，是細胞骨架的重要組成成分，當上皮細胞出現惡化增殖時，激活的蛋白酶會降解細胞質內的CK-18，并將降解的CK-18片段釋放入血液中，引起CK-18在組織液、骨髓及尿液中含量增高；當腫瘤細胞向周圍組織浸潤和向遠處轉移時，CK-18被大量降解釋放，導致血清中CK-18成倍增高。本研究結果顯示，胃癌患者血清中CK-18水平升高對于判斷胃癌的轉移具有重要的指導意義。

CA72-4屬黏蛋白類癌胚抗原，主要存在于腺癌組織中，對監測胃癌的發生、發展和觀察療效具有重要價值。在多種腫瘤標志物中，CA72-4對胃癌的特異性最高，而敏感性稍差。血清CA72-4水平與胃癌臨床分期相關，CA72-4升高可在胃癌復發的臨床診斷提前2～8個月或更早即可表現，是有利于早期診斷胃癌復發的重要檢測手段。MDA、CK-18及CA72-4在多種腫瘤中異常表達，臨床上缺乏對胃癌的特異性，但用作篩查早期胃癌時具有一定的參考意義，同時也能作為胃癌預后及術后復發的重要參考指標。

1王旭林，王紅梅，牟永華，等.早期腸內營養對老年胃癌病人術后血清SOD、MDA和T細胞免疫功能的影響〔J〕.腸外與腸內營養，2012；19(2)：74-7.

2鞏 濤，李 勇，范立橋，等.ω-3多不飽和脂肪酸對人胃癌BGC-823細胞PGE2、SOD和MDA的影響〔J〕.中國腫瘤臨床，2006；33(19)：1102-4.

3陳炳卿，薛英本，楊艷梅，等.苯并(a)芘誘導小鼠前胃癌模型的建立及共軛亞油酸對其預防作用〔J〕.中國藥理學與毒理學雜志，2002；16(5)：354-7.

4涂宏蕾，魏永長，孫海兵，等.胃癌患者血漿氧化抗氧化狀態及組織8-羥基鳥嘌呤糖苷酶mRNA表達水平〔J〕.細胞與分子免疫學雜志，2011；27(7)：793-4，796.

5于穎彥，計 駿，劉炳亞，等.顯微數字成像組合組織芯片技術平臺的建立及其在腫瘤標志物研究中的應用〔J〕.診斷學理論與實踐，2005；4(3)：188-91.

6呂 志，徐 巖，滿曉輝，等.多重置換擴增結合激光捕獲顯微切割技術在胃癌基因組學研究中的應用〔J〕.中華實驗外科雜志，2007；24(11)：1350-2

〔2017-02-08修回〕

(編輯 袁左鳴)

R73

A

1005-9202(2017)18-4584-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2017.18.071

安徽省自然科學基金項目(1708085MH213)

耿小平(1956-)，男，教授，博士生導師，主任醫師，主要從事肝膽外科研究。

史加寧(1981-)，男，碩士，主治醫師，主要從事普外科研究。