DC-CIK聯合放化療治療非小細胞肺癌的效果及對外周血淋巴細胞亞群的影響

周曉琳 周希法 陸忠華

(常州市第四人民醫院放射治療科，江蘇 常州 213001)

DC-CIK聯合放化療治療非小細胞肺癌的效果及對外周血淋巴細胞亞群的影響

周曉琳 周希法 陸忠華

(常州市第四人民醫院放射治療科，江蘇 常州 213001)

目的探討細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)和樹突細胞(DC)聯合放化療對非小細胞肺癌(NSCLC)患者的效果及對外周血淋巴細胞亞群的影響。方法66例NSCLC患者按隨機數字表法分為聯合治療組和對照組各33例，聯合治療組給予DC-CIK聯合放化療治療，對照組給予放化療治療。治療前后檢測患者外周血CD3+CD4+、CD3+CD8+、白細胞介素(IL)-12、IL-4和干擾素(IFN)-γ的變化，治療結束后對兩組進行卡諾夫斯基健康狀況量表(KPS)評分并評價兩組療效。結果治療后聯合治療組IL-12、IL-4和 IFN-γ 水平低于治療前，且低于對照組(P<0.05)，治療后對照組炎癥因子水平與治療前比較無統計學差異(P>0.05)，治療后對照組CD3+CD4+和CD3+CD8+的比例低于治療前，且低于聯合治療組(P<0.05)；聯合治療組有效率及KPS總提高率高于對照組(P<0.05)。結論DC-CIK聯合放化療治療NSCLC患者具有較好的臨床療效，降低患者體內的炎癥因子水平，明顯改善患者外周血淋巴細胞亞群水平。

樹突細胞(DC)-殺傷細胞(CIK)；非小細胞肺癌；放化療；免疫治療

放化療是目前治療肺癌的主要方式，但對人體傷害大，對晚期非小細胞肺癌(NSCLC)進行放療后的局部失敗率仍然較高〔1〕。樹突細胞(DC)和細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)為基礎的免疫治療治愈率高，對人體傷害較小。研究指出在DC和CIK共同孵育后，不僅DC的共刺激分子表達升高，而且抗原呈遞的能力、CIK增加值和細胞毒性的能力也顯著增強〔2〕。本研究探究DC-CIK聯合放化療治療NSCLC的效果及對外周血淋巴細胞亞群的影響。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2013年2月至2014年8月來常州市第四人民醫院就診的66例NSCLC患者，納入標準：①參考中國抗癌協會編著的《新編常見惡性腫瘤診治規范》〔3〕關于NSCLC的診斷標準。②心臟、肝臟、腎功能可耐受放化療及生物治療，血象表現正常，卡諾夫斯基健康狀況量表(KPS)評分≥70分。③經過普通CT檢查后，可測量病灶≥2.0 cm，經過螺旋CT檢查后，可測量病灶≥1.0 cm。將患者按隨機數字表法分為聯合治療組和對照組各33例。聯合治療組男20例，女13例；年齡38～79〔平均(67.2±3.3)〕歲，病程3個月～2年，平均(1.2±0.5)年，TNM分期：Ⅰ期10例，Ⅱ期11例，Ⅲ期9例，Ⅳ期3例。對照組男22例，女11例；年齡32～81〔平均(65.2±4.1)〕歲，病程4個月～3年，平均(1.3±0.6)年，TNM分期：Ⅰ期8例，Ⅱ期11例，Ⅲ期10例，Ⅳ期4例。兩組臨床資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2治療方案 兩組均進行放化療，放療：6 MVX線，3DCRT照射肺部病灶，DT60 Gy，常規分割。化療：紫杉醇+奈達鉑/卡鉑。聯合治療組抽取外周血以分離外周單核細胞，并在體外培養DC和CIK。 在通過CIK誘導DC后，將培養的DC和CIK轉移至患者體內。當在回輸時進行化療時，避開化療，分4次回輸(細胞數≥10×108/次)，并且在回輸前取1 ml樣品送流式細胞儀(FACS Calibur型流式細胞儀購自BD公司)進行細胞亞群分析。治療1次/月，直至其病情進一步發展或放棄治療，至少完成3次以上的治療。

1.3觀察指標 在輸DC-CIK之前和完成4次DC-CIK治療之后，抽血送檢，通過流式細胞術檢測T細胞亞群CD3+CD4+和CD3+CD8+比例。分別在治療前1 d和治療后1 w，抽血后采用酶聯免疫吸附(ELISA)法檢測白細胞介素(IL)-4、干擾素(IFN)-γ與IL-12水平，以上檢測試劑盒均購自美國R&D公司。治療后1個月根據世界衛生組織(WHO)實體瘤的即時效應標準評價治療效果〔3〕，將患者分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、穩定(SD)、進展(PD)，有效率：CR+PR+SD例數與總例數。在治療后1 w左右進行KPS評分，得分提高≥10分為改善，得分下降>10分為惡化，上升或下降10分以內為穩定，總提高率=(改善+穩定)/總例數×100%。

1.4統計學方法 應用SPSS22軟件進行t、χ2檢驗。

2 結 果

2.1兩組治療前后炎癥因子水平比較 治療前兩組IL-12、IL-4和IFN-γ水平均無統計學差異(P>0.05)；治療后聯合治療組低于治療前，且低于對照組(P<0.05)，治療后對照組炎癥因子水平與治療前比較無統計學差異(P>0.05)。見表1。

表1 兩組治療前后 IL-12、IL-4和INF-γ水平比較

與對照組比較：1)P<0.05；與治療前比較：2)P<0.05;下表同

2.2兩組治療前后外周血中淋巴亞群比較 治療前兩組CD3+CD4+和CD3+CD8+比例均無統計學差異(P>0.05)；治療前后聯合治療組差異無統計學意義(P>0.05)，治療后對照組低于治療前，且低于聯合治療組(P<0.05)。見表2。

2.3兩組臨床療效比較 治療后聯合治療組CR 2例，PR 12例，SD 13例，PD 6例，有效率為81.82%，對照組CR 1例，PR 12例，SD 8例，PD 12例，有效率為63.64%，聯合治療組有效率顯著高于對照組(χ2= 4.973，P=0.021)；聯合治療組KPS評分改善9例，穩定 12例，惡化12例，KPS總提高率為63.64%(21/33)，對照組KPS改善5例，穩定11例，惡化17例，KPS總提高率為48.48%(16/33)，聯合治療組KPS總提高率顯著高于對照組(χ2=5.982，P=0.013)。聯合治療組在DC-CIK回輸過程中發熱13例，持續時間0.5～8 h，4例使用解熱鎮痛藥，其余則自行消失，2例出現過寒戰，1例出現休克，治療后均緩解。對照組僅出現1例發熱。

表2 兩組外周血中T細胞亞群CD3+CD4+和CD3+CD8+比較

3 討 論

近年來，腫瘤生物免疫治療是全面治療腫瘤的有效方法，并且已被越來越廣泛地使用〔4〕。DC-CIK聯合治療是提高免疫和抗腫瘤最常用的免疫治療方法之一。DC和CIK是臨床抗腫瘤免疫治療中的兩種細胞，DC是最強的抗原遞呈細胞，可以與主要組織相容性復合體(MHC)Ⅰ類和Ⅱ類分子相關的抗原中高水平、特異性的表達，CIK是人外周血單個核細胞在體外經過多種細胞因子誘導產生的一種具有分泌強烈殺傷作用因子的細胞〔5〕。DC和CIK的共培養不僅能促進DC的成熟，而且能促進CIK的增殖。另外，DC的抗原呈遞能力顯著增加，CIK活性顯著增強〔6〕。本研究表明，DC-CIK治療提高了聯合治療組的免疫功能。放療可分為根治放療和姑息放療，對于局部晚期乳腺輕度癥狀，但不適合手術或放射治療的NSCLC患者，臨床常對患者胸部給予姑息性放療〔7〕。Dammeijer等〔8〕報道，化療常使細胞免疫加重，相比之下，DC-CIK聯合放化療治療更有效，患者出現骨髓抑制、惡心嘔吐、周圍神經毒性發生率均較低，可明顯改善化療患者體力及食欲。在本實驗中聯合治療組治療前后CD3+CD4+，CD3+CD8+細胞比例沒有顯著變化，而治療后的IL-12，IL-4和IFN-γ降低，可能原因為DC-CIK作為人體的一種免疫細胞，可以有效彌補由于化療引發的骨髓抑制以及免疫細胞數目的下降，減輕化療導致的免疫功能損傷，同時，DC-CIK作為一種細胞毒細胞，能夠有效殺滅體內的腫瘤細胞，清除游離癌細胞，降低腫瘤細胞在體內誘發的炎癥反應〔9〕。另外，本研究結果表明 DC-CIK細胞可以提高機體的細胞免疫及體液免疫功能，提高患者自身抗腫瘤能力。研究表明過繼免疫治療可以降低惡性腫瘤的復發率和轉移率，對幾種不同類型的腫瘤細胞有細胞毒作用〔10〕。DC-CIK細胞免疫治療可以殺死任何殘留的腫瘤化療耐藥細胞〔11〕。DC-CIK免疫治療結合局部和全身治療的優勢，充分利用協同作用達到最佳的治療效果。本研究的聯合手段可能對轉移和化療耐藥的腫瘤干細胞治療也有一定的指導意義，筆者認為DC-CIK結合化療等多種方法可能是治療轉移性NSCLC最有效的方法。

1陳英杰，劉 恒，陳 強，等.化療聯合DC和CIK方案治療非小細胞肺癌的臨床療效觀察〔J〕.現代生物醫學進展，2014；14(2)：323-5.

2Wang S，Wang Z.Efficacy and safety of dendritic cells co-cultured with cytokine-induced killer cells immunotherapy for non-small-cell lung cancer〔J〕.Int Immunopharmacol，2015；28(1)：22-8.

3Chen QQ，Ji XX，Zhou X，etal.Clinical observation of docetaxel or gemcitabine combined with cisplatin in the chemotherapy after surgery for stage II-III non-small cell lung cancer〔J〕.Contemp Oncol(Pozn)，2015；19(4)：323-6.

4丁碧莎，孫月娟，王海燕，等.DC-CIK聯合化療治療非小細胞肺癌的研究進展〔J〕.中國免疫學雜志，2016；32(6)：916-9.

5莫 晨，高 錦，王俊懿，等.DC調節的細胞因子誘導殺傷細胞聯合化療治療晚期肺癌的療效〔J〕.中國腫瘤生物治療雜志，2010；17(4)：419-23.

6Chen Q，Cui XX，Liang PF，etal.Immunotherapy with dendritic cells and cytokine-induced killer cells for MDA-MB-231 breast cancer stem cells in nude mice〔J〕.Am J Transl Res，2016；8(7)：2947-55.

7袁云鋒，朱孝中，田 軍，等.姑息性放療對Ⅳ期非小細胞肺癌患者預后的影響〔J〕.中國綜合臨床，2013；29(9)：971-4.

8Dammeijer F，Lievense LA，Veerman GD，etal.Efficacy of tumor vaccines and cellular immunotherapies in non-small-cell lung cancer：a systematic review and meta-analysis〔J〕.J Clin Oncol，2016；34(26)：3204-12.

9Zhang L，Yang X，Sun Z，etal.Dendritic cell vaccine and cytokine-induced killer cell therapy for the treatment of advanced non-small cell lung cancer〔J〕.Oncol Lett，2016；11(4)：2605-10.

10Shi SB，Tang XY，Tian J，etal.Efficacy of erlotinib plus dendritic cells and cytokine-induced killer cells in maintenance therapy of advanced non-small cell lung cancer〔J〕.J Immunother，2014；37(4)：250-5.

11Wang M，Cao JX，Pan JH，etal.Adoptive immunotherapy of cytokine-induced killer cell therapy in the treatment of non-small cell lung cancer〔J〕.PLoS One，2014；9(11)：e112662.

〔2016-11-13修回〕

(編輯 袁左鳴/滕欣航)

R73

A

1005-9202(2017)18-4577-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2017.18.067

陸忠華(1968-)，女，碩士，主任醫師，主要從事腹部腫瘤放射治療研究。

周曉琳(1983-)，女，碩士，主治醫師，主要從事乳腺癌放射治療研究。