表皮生長因子受體-酪氨酸激酶抑制劑對老年非小細胞肺癌患者的效果

宋 然

(徐州市中醫(yī)院，江蘇 徐州 221000)

表皮生長因子受體-酪氨酸激酶抑制劑對老年非小細胞肺癌患者的效果

宋 然

(徐州市中醫(yī)院，江蘇 徐州 221000)

目的探討老年晚期非小細胞肺癌患者外周血循環(huán)腫瘤細胞的表達與表皮生長因子受體-酪氨酸激酶抑制劑療效的相關性。方法選取132例存在表皮生長因子受體突變的老年晚期非小細胞肺癌患者，均給予表皮生長因子受體-酪氨酸激酶抑制劑治療。抽取患者肘正中靜脈血，流式細胞術檢測循環(huán)腫瘤細胞表達水平，以治療前所有患者循環(huán)腫瘤細胞表達值得中位數(shù)為分界點，分為高表達組和低表達組，比較治療1個療程后的療效及中長期預后情況。結果132例患者的病情控制率為60.61%；其中到低表達組治療有效率和疾病控制率均明顯高于高表達組(P<0.05)。治療有效組治療1個療程后循環(huán)腫瘤細胞水平明顯低于治療前(P<0.01)；無效組治療前后循環(huán)腫瘤細胞水平差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。低表達組總生存期、無進展生存期、1年及3年生存率均明顯優(yōu)于高表達組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論循環(huán)腫瘤細胞表達水平與表皮生長因子受體-酪氨酸激酶抑制劑的療效和預后呈負相關，可作為老年非小細胞肺癌患者接受該治療方案預后的預測指標。

非小細胞肺癌；循環(huán)腫瘤細胞；靶向治療

老年非小細胞肺癌患者初診時多已處于晚期，且心肺功能衰退明顯，并發(fā)癥較多，多數(shù)無法行根治術和放療〔1〕。表皮生長因子受體-酪氨酸激酶抑制劑是針對表皮生長因子受體突變的晚期非小細胞肺癌患者新興的靶向治療方案，但耐藥性的發(fā)生限制了其應用。臨床研究顯示，循環(huán)腫瘤細胞表達水平與腫瘤患者的療效和預后相關〔2，3〕。本研究旨在探討老年晚期非小細胞肺癌患者外周血循環(huán)腫瘤細胞的表達與表皮生長因子受體-酪氨酸激酶抑制劑療效旨在探討相關性。

1 資料與方法

1.1一般資料 2012年6月至2014年1月在徐州市中醫(yī)院經(jīng)病理檢查確診為晚期非小細胞肺癌的老年患者132例。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準，患者知情同意。入選標準：(1)年齡≥60歲，存在表皮生長因子受體突變；(2)影像學檢查顯示為Ⅲb～Ⅳ期；(3)生存時間預計>3個月，未接受過放療或化療。排除標準：(1)缺少肺病理學診斷資料；(2)治療依從性差，無法順利溝通的患者。其中男80例，女52例，年齡60～82〔平均(71.05±5.16)〕歲；病理分類：肺癌116例，腺癌16例；TNM分期：Ⅲb期8例、Ⅳ期124例；功能狀態(tài)評分<2分88例，≥2分44例。分別于治療前和治療1個療程后行胸部CT、頭顱磁共振成像(MRI)、彩超、血生化、腫瘤標志物、常規(guī)心電圖檢查。根據(jù)實驗數(shù)據(jù)，以全部入選患者外周血中形成循環(huán)腫瘤細胞表達量的中位數(shù)(71.65)為分界點，高于該數(shù)值的為高表達組72例，低于該數(shù)值的為低表達組60例。

1.2方法

1.2.1治療方法 根據(jù)臨床經(jīng)驗并結合患者實際情況，從以下三種表皮生長因子受體-酪氨酸激酶抑制劑類藥物中選取任意一種：厄洛替尼片；吉非替尼片；鹽酸埃可替尼片；上述藥物以連續(xù)服用30 d為1個療程。

1.2.2標本及試劑 標本采集：分別于治療前和治療1個療程后抽取患者肘正中靜脈血6 ml，放入抗凝管中混合均勻，2 h內送檢。CD45-PC5、EGFR-PE、CK18-FITC購于上海恒斐生物科技有限公司；NH4Cl溶血素購于上海榕柏生物技術有限公司；小鼠抗人CK18/PE、CD45/PE-Cy5、EGFR/FIT購于北京科昕生物科技有限公司；破膜通透液、淋巴細胞分離液購于北京德博生物科技有限公司。

1.2.3循環(huán)腫瘤細胞檢測 取無菌試管加入全血200 μl，滴加CD45-PC5、EGFR-PE、CK18-FITC各40 μl，混合均勻后室溫條件下避光靜置20 min；滴加溶血素3 ml，反應20 min后上機檢測，表達CD45-和CK18+的細胞為外周血殘留的循環(huán)腫瘤細胞。取肝素抗凝處理后的全血4 ml，磷酸緩沖液稀釋至50%；向離心管中加入淋巴細胞分離液5 ml，再滴加稀釋后的全血8 ml，3 000 r/min離心20 min，收集單核細胞層內的界面細胞，滴加3 ml的磷酸緩沖液，混合均勻后2 000 r/min離心10 min，棄去上清。分別取200 μl放入兩支流式反應管中，實驗管中滴加30 μl的CK18/PE、CD45/PE-Cy5，對照管中滴加IgG-PC5、IgG-PE，靜置20 min，磷酸緩沖液洗滌后離心棄去上清，兩組分別滴加破膜通透液200 μl，靜置后離心棄去上清。

1.2.4療效評價 根據(jù)世界衛(wèi)生組織實體瘤預后評價標準分為：完全緩解、部分緩解、病情穩(wěn)定、病情進展，完全緩解與部分緩解為治療有效，完全緩解、部分緩解、病情穩(wěn)定記為病情控制；記錄患者無進展生存期和總生存期。

1.3統(tǒng)計學分析 使用SPSS軟件進行秩和檢驗、t檢驗；生存分析用Kaplan-Meier法、LOG-RANK檢驗。

2 結 果

2.1循環(huán)腫瘤細胞水平與臨床因素的關系 循環(huán)腫瘤細胞水平在不同性別、年齡、病理類型、分化程度、臨床分期、功能狀態(tài)評分差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2循環(huán)腫瘤細胞水平與表皮生長因子受體-酪氨酸激酶抑制劑療效的關系 132例患者的病情控制率為60.61%(80/132)，其中低表達組與高表達組完全緩解4 vs 0例部分緩解28 vs 20例，病情穩(wěn)定16 vs 12例，病情進展12 vs 40例；低表達組治療有效率和疾病控制率均明顯高于高表達組(P<0.05)。低表達組循環(huán)腫瘤細胞水平為54.92(15.61，99.70)，高表達組為97.46(59.85，160.51)。

2.3表皮生長因子受體-酪氨酸激酶抑制劑治療前后循環(huán)腫瘤細胞水平變化 有效組治療1個療程后循環(huán)腫瘤細胞水平〔31.72(9.41,50.37)〕明顯低于治療前〔67.15(16.82,99.57),Z=7.588,P=0.005〕；無效組治療前后〔72.58(19.76,106.24),70.76(17.93,98.61)〕差異無統(tǒng)計學意義(Z=1.403,P=0.068)。

2.4循環(huán)腫瘤細胞水平與生存期的關系 見圖1。132例患

表1 晚期非小細胞肺癌循環(huán)腫瘤細胞水平與臨床因素的關系〔M(P25,P75)〕

圖1 循環(huán)腫瘤細胞水平與總生存期的關系

者的總生存期為(21.58±3.42)個月，1年生存率為61.36%(81/132)，3年生存率為13.64%(18/132)。低表達組與高表達組總生存期分別為(23.91±3.05)個月、(19.45±2.69)個月，1年生存率分別為63.33%(38/60)、59.72%(43/72)，3年生存率分別為20.00%(12/60)、8.33%(6/72)，經(jīng)LOG-RANK檢驗顯示，低表達組與高表達組之間差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。132例患者的無進展生存期為(9.74±3.42)個月，低表達組與高表達組分別為：(12.60±2.48)個月和(6.75±0.85)個月，兩組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

3 討 論

惡性腫瘤的發(fā)展過程中不斷有細胞脫落，其中部分可經(jīng)上皮間質轉化，在基因水平、蛋白質修飾、細胞表型方面出現(xiàn)改變，產生侵襲性從而進入外周血液循環(huán)，發(fā)展為具有轉移能力的循環(huán)腫瘤細胞〔4〕。

晚期非小細胞肺癌的治療中化療占重要地位，有研究發(fā)現(xiàn)，循環(huán)腫瘤細胞表達變化與化療效果呈明顯相關性〔5〕。對于化療失敗或初次治療的晚期非小細胞肺癌患者，口服靶向藥物表皮生長因子受體-酪氨酸激酶抑制劑是近年來新興的治療方案之一。該類靶向藥物可抑制酪氨酸激酶磷酸化，進而降低表皮生長因子受體異常表達水平，誘導細胞凋亡，抑制腫瘤細胞增殖；雖然目前已成為具有表皮生長因子受體突變晚期非小細胞肺癌患者的一線治療方案，但應用過程中往往受限于之后的耐藥性。

本研究結果提示循環(huán)腫瘤細胞水平與表皮生長因子受體-酪氨酸激酶抑制劑的療效呈負相關，循環(huán)腫瘤細胞變化情況可作為預測療效的指標。進一步對患者生存期情況研究結果提示，循環(huán)腫瘤細胞表達水平與表皮生長因子受體-酪氨酸激酶抑制劑治療預后呈負相關，可作為預測患者生存時間的指標。

1張麗萍，孫宏斌，李文宇，等.老年非小細胞肺癌患者的臨床分布與治療方法研究〔J〕.中國老年學雜志，2015；35(16)：4573-4.

2馮 強，彭 森，劉 霞，等.全自動免疫組化篩查ALK基因融合非小細胞肺癌及其病理特征〔J〕.北華大學學報(自然科學版)，2016；17(2)：209-12.

3蔡開燦.非小細胞肺癌術后EGFR基因狀態(tài)對化療、靶向治療療效影響的臨床研究〔D〕.廣州：南方醫(yī)科大學，2013.

4王小磊，劉微微.埃克替尼靶向治療對非小細胞肺癌患者血管內皮生長因子及免疫功能的影響〔J〕.中國老年學雜志，2016；36(11)：2688-9.

5劉 凱.非小細胞肺癌CT灌注參數(shù)與EGFR、MMP-9的相關性研究〔D〕.廣州：南方醫(yī)科大學，2013.

〔2017-03-31修回〕

(編輯 郭 菁/滕欣航)

R73

A

1005-9202(2017)18-4556-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2017.18.056

江蘇省衛(wèi)計委科技支撐項目(BR2016070)

宋 然(1987-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事腫瘤內科研究。