木沙·托合提 買買提江·阿布拉克 陳海燕 蘭文旭 庫爾班·吐拉克*
(1.新疆農業大學動物科學學院,烏魯木齊,830052;2.天山西部國有林管理局尼勒克分局,尼勒克,835700;3.新疆阿勒泰地區林業局,阿勒泰,836500)
塔里木兔人工采精技術試驗研究
木沙·托合提1買買提江·阿布拉克2陳海燕1蘭文旭3庫爾班·吐拉克1*
(1.新疆農業大學動物科學學院,烏魯木齊,830052;2.天山西部國有林管理局尼勒克分局,尼勒克,835700;3.新疆阿勒泰地區林業局,阿勒泰,836500)
稿件運行過程
塔里木兔; 麻醉; 電刺激采精; 按摩采精; 解剖取精
塔里木兔(Lepusyarkandensis)中文俗名野兔、莎車兔[1]。棲息在塔里木盆地海拔900~1 200 m河流沿岸的胡楊(Populuseuphratica)和多枝檉柳(Tamarixramosissima)林中、塔克拉瑪干沙漠四周的半沙漠草原和塔里木河河水泛濫地區等[2],是在世界范圍內僅分布于新疆塔里木盆地的特有兔種之一。近年來,由于開發和經濟建設活動的影響,塔里木兔棲息地不斷萎縮,種群數量日益下降,物種生存面臨嚴重威脅。因此,開展其繁殖生物學研究將對其種群延續、數量恢復、有效保護與利用具有積極的作用。
兔子屬于刺激性排卵動物[3],人工授精時需要對母兔采用外源性激素或藥物誘發排卵。根據相關研究報道,公母家兔自然交配按1∶5或1∶8;人工授精時,公、母兔比為1∶20~1∶30較合適[4]。草兔(Lepuscapensis)人工馴繁,公母自然交配比例為1∶4比較合適[5-6];不宜多放,因為野兔有咬架的惡習,放多了會干擾野兔的正常交配,并且野兔的母性較差,對幼兔也會造成危害。雖然兔子自然交配配種率高,但這次實驗研究,為今后的野兔人工授精工作提供參考數據,有一定的利用價值。
近年來在新疆為有效保護與利用塔里木兔資源,已建立人工馴養繁育基地并嘗試將人工采精、同期發情、人工授精等多種現代動物繁殖技術應用在塔里木兔上,但由于塔里木兔個體小、野性強、許多繁殖生理特性不清楚等原因,塔里木兔繁殖技術研發進展緩慢。
人工馴養繁殖是野生動物保護,種群延續、數量恢復與利用工作中最為有效的方法之一。其中人工采精是首先要解決的技術問題,國內外已將現代動物繁殖技術應用于許多野生動物的繁殖上,并已在多種野生動物繁殖技術中取得了進展,且相繼開發了野生動物采精、精液保存(建立種質資源庫)及野生動物人工授精等技術,目前這些技術在陸生野生動物、水生野生動物中都有應用。
動物人工采精常用方法有:按摩采精法、假陰道采精法、電刺激采精法等。按摩采精法最初由Burrow 和Quinn首先應用于家禽和火雞(Meleagrisgallopavo)[7],后來被世界各地采用于貂(Martesspp.)、狐貍(Vulpesspp.)、兔等其他動物。自從蘇聯研究者于1931年假陰道采精法發明后,很快被廣泛應用在畜牧業中。1933年由 Kardyinowich及Milowanov創造了兔假陰道和假臺兔法采取精液,1938年Macirone與Walton在此基礎上又作了進一步改進[8]。目前假陰道采精法多用于馴化程度較高、性情溫馴的動物上。電刺激采精法由Serebrovskii和Sokolovskaja等人發明,在1934年首先應用于水禽[9]。目前,電刺激采精已運用在狼(Canislupus)[10]、東北虎(Pantheratigrisaltaica)[11]、東北馬鹿(Cervuselaphusxanthopygus)[12]、林麝(Moschusberezovskii)[13]、梅花鹿(Cervusnippon)[14]、天山馬鹿(Cervuselaphussongaricus)[15]、大熊貓(Ailuropodamelanoleuca)[16]、黑猩猩(Pantroglodytes)[17]、非人靈長類(non-human primate)[18]等野生動物上。解剖取精法方面報道少,主要是采集附睪內的精子用于保存方法的研究[19],以及體外受精等方面。相關報道有,褐家鼠(Rattusnorvegicus)體外受精時附睪精子優于鮮精,此后,張世生等[20]水牛(Bubalusbubalis)研究證明了附睪精子用于體外受精的可行性。陳瑩瑩等[21]采用手握法、電刺激法及附睪采精法采集精液,并進行精液品質分析,從而得出手握法采集精液為最佳的結論。
對于野性較強的野生動物,麻醉可以使它們達到鎮定、鎮靜、肌肉松弛的效果,從而避免采精時動物對采集人員的傷害。目前,常用的麻醉劑有鹿眠寶、眠乃寧、水合氯醛、烏拉坦、戊巴比妥鈉、陸眠寧、速眠新Ⅱ、陸眠靈、阿佛丁等。周昆等[22]在犬、貓、兔用3%戊巴比妥鈉靜脈注射麻醉劑量為30 mg/kg;徐春忠[23]用眠乃寧對不同動物進行麻醉,大熊貓最佳劑量為(1.45±0.20)mL/100 kg,貓科(Felidae)動物的推薦劑量是1.9~2.6 mL/100 kg,對非洲獅(Pantheraleo)劑量稍大(2.81±0.42)mL/100 kg,對熊科(Ursidae)動物的推薦劑量是1.8~3.1 mL/100 kg,狼(6.14±0.75)mL/100 kg[23]。張亞飛等[24]對犬的試驗用速眠新Ⅱ,先肌肉注射0.06 mL/kg,再肌肉注射戊3% 巴比妥鈉0.5 mL/kg,得到較好麻醉效果。從精液采集、麻醉效果上看,適宜不同動物的麻醉藥劑量和采精方法,學術界仍有不一致的各類報道。
基于此,本試驗以健康、成年塔里木兔為試驗對象,采用常用不同麻醉劑(速眠新Ⅱ、戊巴比妥、烏來糖等)進行保定,采用不同采精方法(按摩法、電刺激法及解剖取精法等)進行精液采集,研究不同麻醉劑及劑量、不同采精方法對塔里木兔麻醉及采精效果的影響,為今后人工授精工作的開展提供試驗參考。
1.1材料
1.1.1試驗動物
由新疆烏什縣塔里木兔種源繁育有限責任公司提供,健康成年純種塔里木公兔80只,體重1 200 g左右,試驗動物單籠飼養,日糧包括新鮮苜蓿草300 g/只,玉米粒30 g/只,自動飲水器飲水。
1.1.2主要儀器及藥品
試驗儀器:顯微鏡(OLYMPUS CX23)、電刺激采精儀(型號:KH-DC 北京坤恒畜牧設備中心)、數顯電熱水浴鍋(上海博訊實業有限公司醫療設備廠生產)、電子稱。
藥品:速眠新Ⅱ、蘇3號(吉林省華牧動物保健品有限責任公司生產)、烏來糖(烏拉坦,國藥集團化學試劑有限公司20080610)、戊巴比妥鈉(Sigma P3761)。
1.2試驗方法
1.2.1分組設計
1.2.1.1麻醉藥以及劑量的篩選
試驗用公兔隨機分為3組,每組20只,共60只,每種麻醉劑的每個不同劑量用5只兔子,速眠新Ⅱ按0.01、0.03、0.05、0.07 mL/kg劑量肌肉注射;3%戊巴比妥鈉按0.3、0.6、0.9、1.2 mL/kg,20%烏來糖按1.0、2.0、3.0、4.0 mL/kg劑量靜脈注射,記錄進入麻醉所需時間,蘇醒所需時間,觀察麻醉狀態、呼吸、心跳等情況。
1.2.1.2人工采精方法的篩選
在塔里木兔繁殖季節試驗用公兔隨機分為3組,每組6只,對照組采用解剖取附睪精液,試驗1組采用電刺激法采精,試驗2組采用按摩法采精,前2組隔3 d采1次精液,重復3次,記錄采精量、精子活力、密度、電刺激電壓、電流、陰莖勃起狀態等。
1.2.2采精方法
1.2.2.1解剖取精
摘取成年公兔附睪后,立即送到實驗室,在無菌操作室,用滅菌剪刀將包皮和睪丸鞘膜剖開剪取附睪尾部,于37℃恒溫載物臺上事先預熱的稀釋液中(稀釋液2 mL),并用無菌剪刀細切附睪尾部使精子流入稀釋液中,最后在配有恒溫載物臺的顯微鏡下觀察,記錄精子活力及密度等各項指標。
1.2.2.2電刺激采精
電刺激采精一般3人操作,1人保定兔子,1人撥動主機開關,另1人采集精液并記錄。對公兔麻醉后進行采精前的準備工作。保定員用右手持塔里木兔背部大腿基部,使兩腿自然分開,左手固定頭部保持頭部略高于臀部,保定員用力要適度,既要使公兔安靜,又要防止掙脫。采精員將備好的集精杯(本試驗采用1.5 mL離心管)套在公兔陰莖上,將電刺激儀的電壓調節到最小檔位,將涂有凡士林的刺激棒從肛門緩慢插入6~8 cm,打開開關,由低向高慢慢調整刺激電壓,每檔通電時間為10 s,斷電3 s,以0.1 V幅度增加電壓至排精。
1.2.2.3按摩采精
所有取精用公兔提前1 d斷水,公兔麻醉處理后,首先操作者按壓膀胱處擠出膀胱內尿液以免尿液混入精液。然后,剪去陰莖周圍的長毛,用生理鹽水沖洗、擦干。采精時需要3人操作,1人一手抓公兔耳朵將兔子懸掛提起來,另一手呈八字形從腹部到睪丸方向,一松一緊地節湊性按摩,另一人將兔子后腿岔開,第3個人一手持離心管或集精杯并套在公兔陰莖上,另一手輕輕按摩睪丸和陰莖一直到排完全部精液。
1.2.3精子活力和密度的評價
采精結束后,取15 μL精液,滴于恒溫載物臺上預熱的載玻片上,蓋上蓋玻片,于37℃在20~40倍顯微鏡下觀察精子運動狀態,根據多個視野的觀察情況及時估計直線前進運動精子在總精子中的比例,以0~1.0的十級評分法評定精子活力,如有50%的精子做直線運動,活力計為0.5,每個樣本評價3次,取平均值;精子密度的評價可采用血細胞計數板在光學顯微鏡下直接計數。
1.2.4統計分析
試驗數據經EXCEL結果用平均數(X)。
2.1麻藥劑量及種類對塔里木兔麻醉效果的影響
由表1可見,隨麻醉藥劑量的增加進入麻醉所需時間縮短,而麻醉持續時間延長;速眠新Ⅱ劑量0.05 mL/kg時,麻醉所需時間(6.3±0.4)min,麻醉持續時間(47±4.5)min,進入良好的麻醉狀態,劑量0.05 mL/kg時,麻醉所需時間縮短(4.0±0.5)min,麻醉持續時間延長到(62±8.5)min,進入深度麻醉狀態;3%戊巴比妥鈉劑量0.9 mL/kg時,麻醉所需時間(7.3±0.4)min,麻醉持續時間(63±11.5)min,進入良好麻醉狀態,劑量1.2 mL/kg時,麻醉所需時間縮短到(3.2±0.8)min,麻醉持續時間延長到(102±18)min,進入深度麻醉狀態;20%烏來糖劑量3.0 mL/kg時,麻醉所需時間(5.0±0.7)min,麻醉持續時間(35±7.5)min,麻醉狀態良好,劑量4.0 mL/kg時,麻醉所需時間縮短到(3.0±0.5)min,麻醉持續時間延長到(95±11.5)min,進入深度麻醉狀態。
表1麻藥種類及其劑量對塔里木兔麻醉效果的影響

Tab.1 Effect of anesthetic on tarim rabbits using different types and dosage of anesthetics
2.2 不同方法對塔里木兔采精效果的影響2.2.1 解剖取精法
由表2可見,6只公兔精子活力之間沒有較大差異,精子活力在0.70~0.85之間,平均為0.79;精子密度在78.33×107~110.67×107/mL之間。
2.2.2 電刺激法對塔里木兔采精效果的影響
由表3可見,6只公兔射精量在0.10~0.15 mL之間,平均為0.12 mL;精子活力在0.10~0.60之間,平均為0.45;陰莖勃起狀態較差,精子密度在0.23×107~69.53×107/ mL,大部分精液成乳白色,部分精液伴隨有尿液成乳黃色;電刺激電壓0.1~3 V,平均為1.42 V,電刺激時通電10 s,斷電3 s;刺激次數最高達4~60次,平均為27次。
表2 解剖取精法對塔里木兔采精效果的影響

Tab.2 Effect of semen collection on tarim rabbits by anatomy
2.2.3 按摩法對塔里木兔采精效果的影響
由表4可見,6只公兔射精量差異較大在0.10~0.2 mL之間,平均為0.15 mL;精子活力0.50~0.75,平均為0.65;多數公兔陰莖勃起狀態較好,精液成乳白色,精子密度在20.33×107~69.33×107/ mL之間。
表3 電刺激法對塔里木兔采精效果的影響

Tab.3 Effect of semen collection on tarim rabbits by electrostimulation
表4 按摩法對塔里木兔采精效果的影響

Tab.4 Effect of semen collection on tarim rabbits by massage
3.1 麻藥劑量及其種類對塔里木兔麻醉效果的影響
為合理地使用動物麻醉藥最終獲得理想的麻醉效果,試驗中,選擇安全、有效的麻醉方法是保證試驗成功的重要因素。麻醉劑的濃度、劑量、種類、給藥方式等對動物麻醉效果影響較大。烏拉坦是無色透明結晶,學名氨基甲酸乙酯,又名烏來糖,常用于動物的靜脈注射。戊巴比妥鈉是白色粉末,多用于犬、貓、兔麻醉時靜脈注射。速眠新Ⅱ是一種復方制劑,具有中樞神經性鎮痛,鎮靜和肌肉松弛作用,有著麻醉起效快、誘導期短等特點,肌肉注射。
麻醉藥的說明書會告知使用量,但動物的個體存在差異,種類不同等原因,在試驗中一定要用量逐漸增加。目前麻醉藥在很多動物上的使用劑量并不十分清楚。陳秋羊等[25]對林麝的電刺激采用速眠新Ⅱ肌肉注射0.035~0.050 mL/kg。王相友等[26]對犬的研究速眠新Ⅱ推薦劑量為0.04~0.05 mL/kg。塔里木馬鹿(Cervuselaphusyarkandensis)[27]的研究報道,半麻醉試驗用量為每100 kg 體重注射鹿眠寶0.5 mL。山羊的研究報道[28]建議劑量為0.06~0.08 mL/kg(速眠新Ⅱ、肌注)。張亞飛等[24]對犬麻醉實驗采用速眠新(0.06 mL/kg)待動物進入麻醉期后,再臀部肌肉注射戊巴比妥鈉(3%、0.5 mL/kg)并取得了良好的麻醉效果。周小林等[29]采用速眠新Ⅱ按0.1 mL/kg臀部肌注,聯合3%戊巴比妥鈉0.2 mL/kg靜脈注射麻醉,以及單獨使用3%戊巴比妥鈉按1 mL/kg靜脈麻醉,得到戊巴比妥鈉聯合速眠新Ⅱ注射麻醉效果好的結果。陳國英等[30]烏來糖、安定、強痛定在家兔麻醉試驗,25%烏來糖(4 mL/kg)加安定加強痛定成功率高,單純使用25%烏來糖靜脈注射,發現大多數家兔在實驗手術時需加麻醉劑,穩定性較差。丁運萍等[31]的研究結果證實了3種不同的注射方式會得到不一樣效果;肌肉注射被認定為是最方便的注射方法之一,其作用效果適中但是需要較長的時間來誘導;對于小型動物采用最多的莫過于腹腔注射,鑒于腹腔在動物體的特殊位置這種注射方式可以產生較長的時間的麻醉效果,非常適用于長時間操作的試驗;靜脈注射也是一種較為普遍的注射方式,然而只適用于一些特別需要靜脈藥物注射或者需要進行緊急麻醉時才適用此種注射方式,其原因是操作難度大,不易掌握[31]。
本試驗準確稱量塔里木兔體重,選用用量的下線進行預試驗,并根據塔里木兔的反應,以及保定者對塔里木兔肢體力量的感應來確定是否需要添加用量。本試驗單獨使用不同劑量速眠新Ⅱ、3%戊巴比妥鈉和20%烏來糖的麻醉效果來看,隨著3種不同麻醉藥劑量增高麻醉所需時間縮短,麻醉持續時間延長趨勢,其中速眠新Ⅱ最佳劑量為0.05 mL/kg;3%戊巴比妥鈉的最佳劑量為0.9 mL/kg;20%烏來糖為3.0 mL/kg,雖然3%戊巴比妥鈉和20%烏來糖比速眠新Ⅱ麻醉持續時間較長,但注射量大、靜脈注射、操作麻煩、蘇醒慢、副作用大、安全性差,再加上塔里木兔體型小、性情暴烈、野性強,易受驚嚇,而且靜脈血管很細,很難注射麻醉藥,因此,塔里木兔選用速眠新Ⅱ肌肉注射有較好的麻醉效果。
3.2 不同方法對野生動物采精效果的影響
近年,隨著野生動物保護與利用的發展,一些先進的繁殖技術應用于野生動物的人工繁殖中,雖對改良品種和提高其生產性能有一定成效,但是由于對不同方法采精,精液保存方面的研究不足,進而嚴重制約了人工繁殖技術的研究和進一步推廣應用。人工授精是保護動物資源,擴大動物品種數量的一種手段,而其首要的工作是采精。采精試驗應根據動物特性采用不同的采精措施。家畜、溫順動物、馴化程度較高動物采用按摩法或假陰道法采精;而對馴化程度低,按摩反應較差的動物,采用電刺激法[32]。
國內外不同學者對不同采精方法對動物采精效果的看法不一。孔慶松等[33]人認為,狐貍的采精按摩法較電刺激法好。陳瑩瑩等[21]采用不同3種采精方采集精液,認為手握法采集精液最佳。趙家才等[34]針對大額牛和婆羅門牛,對電刺激法、按摩法和假陰道法3種方法的采精效果進行了比較,認為假陰道法是最好。Setioko和Hetzel[35]對ALAABIO雄鴨采精效果采用3種方法研究了精液品質與受精率,結果是假陰道方法效果最佳。Palmer[36]對肉牛研究采用直腸按摩法和電刺激法采精,認為精子形態不受采精方法的影響,但直腸按摩法精子活力、活率低于電刺激采精法。
本試驗采用解剖取精法、電刺激法及按摩法采集精液,并進行了精液品質分析,本試驗采精結果來看,3種采精方法均能采集到精液,解剖取精法(對照組)精子活力較高,達0.70以上,但需要屠宰公兔。與其相比按摩法采精法效果最佳,采精量達0.20 mL,精子活力達0.65以上且操作簡單易行,其次為電刺激法,射精時電壓為0.1~3.0 V,采精量達0.15 mL,精子活力為0.60左右。陳玉等[37]用假陰道法采集公兔精液,每次可采精液 0.2~2 mL。王亞鳴[38]測定的家兔采精量0.5~1.5 mL,Paál[39]對兔子的采精過程中采精量從0.4 mL逐漸提高達到1.0 mL,平均采精量(0.68±0.34)mL,平均精子活力達到(55.55±26.63)%與本試驗結果有較大的差異,這可能是家兔老實、個體大,采精方便,采用的方法不一樣等原因。
另外,公兔進行電刺激采精時,有摻雜尿液的現象。這可能是電刺激采精電壓過高,刺激過度的原因。不同動物,不同個體對電流刺激強度的敏感度不同,研究報道,黑吼猴(Alouattacaraya)的電刺激采精電壓為2~8 V,插入深度為9.8~14.5 cm[40]。林麝的采精電壓為3~5 V[13]。盤羊(Ovisammon)的采精電壓為6~8 V[41]。王柏林等對梅花鹿采精試驗過程中采用4~6 V電壓,插入肛門深度為20 cm[42]。黃少東[43]的報道梅花鹿電刺激電壓為3~5 V。本試驗結果表明,塔里木兔一般射精時電壓為0.1~3 V范圍內,插入深度為6~8 cm之間。陰莖勃起與射精沒有相伴,也可以不勃起就射精,陰莖勃起較差。
總而言之,解剖取精法(對照組)雖然在精子活力、密度等方面效果最好,但成本太高,只能一次性采精,對優良種公兔來說,不能充分利用。按摩法精子活力、密度、陰莖勃起狀態等各方面效果較好,精液成乳白色,操作簡單,對兔子不會產生不良刺激。電刺激采精法采精效果不如按摩法,再者電刺激操作麻煩,另外,電刺激時電壓過高、刺激強度過強等方面還存在許多問題。因此,塔里木兔按摩法采精得到的效果最佳,其次為電刺激采精。
致謝:感謝導師庫爾班教授的精心指導;在試驗研究期間獲得新疆塔里木兔種源繁育有限責任公司的大力支持,貴公司為本研究提供了很多幫助,為此對貴公司領導及相關工作人員表示衷心感謝;衷心感謝新疆維吾爾自治區林業廳野生動物保護處處長史軍的關心和支持!
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Yarkand hare; Electrical stimulation method; Anesthesia; Massage method; Anatomical semen collection method
塔里木兔(Lepusyarkandensis)為中國特有兔種,是國家Ⅱ級保護動物。近年來國內野兔需求市場日趨火爆,其巨大的經濟效益,造成新疆塔里木兔偷捕盜獵、非法倒賣時有發生,并呈日益上升趨勢。人工馴養繁殖是野生動物保護,種群延續、恢復種群數量與開發利用等工作中最為有效的方法之一。其中人工采精是首先要解決的技術問題。本文以塔里木兔為試驗對象,采用3種麻藥(速眠新Ⅱ、3%戊巴比妥鈉、20%烏來糖)進行藥物保定,并采用不同方法(解剖取精法、電刺激法、按摩法)進行精液采集,探索適合塔里木兔的麻藥種類、劑量和采精方法。結果表明,3種麻醉藥物均能有效誘導麻醉,其中速眠新Ⅱ(0.05 mL/kg)的麻醉效果最佳,其次為3%戊巴比妥鈉(0.9 mL/kg),20%烏來糖(3.0 mL/kg)。本試驗采用的3種采精方法來看,3種采精方法均能采集到精液,解剖取精法(對照組)精子活力較高,達0.70以上,但需要屠宰公兔。與其相比,按摩法采精法效果最佳,采精量達0.20 mL,精子活力達0.65以上且操作簡單易行;其次為電刺激法,射精時電壓為0.1~3.0 V,采精量達0.15 mL,精子活力為0.60左右。
Experimental Study of Semen Collection from Captive Yarkand Hare
Musha Tuoheti1Maimaitijiang Abulake2Chen Haiyan1Lan Wenxu3Kuerban Tulake1*
(1.College of Animal Science,Xinjiang Agricultural University,Urumqi,830052,China;2.Nilka Branch Station,Forestry Administration Bureau of Western Tianshan,Nilka,835700,China;3.Forestry Bureau of Altay Prefecture,Altay,836500,China)
Yarkand hare is endemic to China,and listed as a second-class national protected species.In recent years,domestic market demand for wild rabbit has increased and the resulting potential for economic benefit has led to increasing levels of poaching and illegal trade of Yarkand hare.Domestication and captive breeding is one of the most effective ways for wildlife protection,population maintenance and recovery,and exploitation.Semen collection is one of the first technical problems to be solved in captive breeding.We evaluated 3 kinds of anesthetic drugs (sumianxinⅡ,3% pentobarbit and 20% Urethane)used to sedate Yarkand hare,and 3 methods (massage,electrical stimulation,and anatomical semen collection)to collect semen.The results showed that 3 kinds of anesthetic drugs can effectively induce anesthesia,in which Sumianxin II (0.05 mL/kg)has the best anesthetic effect,followed by 3% sodium pentobarbital (0.9 mL/kg),and 20% ethylurethanm (3.0 mL/kg).The test results showed that semen can be collected effectively by using 3 kinds of semen collection methods.Sperm motility of semen collected by anatomical method (control group)was the highest (over 0.70),but the disadvantage of this method was that male rabbits had to be slaughtered.The massage method was more suitable and easy to operate,and yielded semen volume up to 0.20 mL,with sperm motility over 0.65.By electrical stimulation,semen volume reached 0.15 mL with sperm motility of about 0.60,with voltage at 0.1-3.0 V for ejaculation.
新疆維吾爾自治區自然科學基金項目(2013211A029);橫向課題(塔里木兔快繁技術研發)
木沙·托合提,男,26歲,碩士研究生;主要從事動物遺傳育種與繁殖研究。E-mail:1350896482@qq.com
*通訊作者:庫爾班·吐拉克,E-mail:kturak@sina.com
2016-11-09
S865.42
A
修回日期:2017-01-29
發表日期:2017-05-10
2310-1490(2017)02-215-07