圈養(yǎng)靈長類動物寄生蟲病的診治及效果評價

何相寶 郝春曉 李若楠 張海軍 關春宇

(1.哈爾濱北方森林動物園，哈爾濱，150322；2.東北林業(yè)大學野生動物資源學院，哈爾濱，150040；3.鄂爾多斯市家畜改良工作站，鄂爾多斯，017000)

圈養(yǎng)靈長類動物寄生蟲病的診治及效果評價

何相寶1郝春曉2李若楠1張海軍3關春宇1

(1.哈爾濱北方森林動物園，哈爾濱，150322；2.東北林業(yè)大學野生動物資源學院，哈爾濱，150040；3.鄂爾多斯市家畜改良工作站，鄂爾多斯，017000)

稿件運行過程

圈養(yǎng)靈長類動物； 球蟲； 毛尾線蟲； 蠕形住腸線蟲； 治療效果

長期以來，人們對非人靈長類身上所攜帶能引起疾病的病毒和細菌給予了足夠重視和研究，然而常見且同樣具有高強度傳染性以及危害性的腸道寄生蟲卻往往被人們忽略[1]。目前為止，非人靈長類腸道寄生蟲的研究報道較少[2]，已有研究證明非人靈長類腸道寄生蟲可引發(fā)反復腹瀉、腹痛、肺炎、致盲等癥狀。作為人類近親的非人靈長類動物，最易傳染給人類某些疾病[3]，包括寄生蟲病，對人類健康構成嚴重威脅，因此對靈長類寄生蟲的持續(xù)關注是非常必要的。

2016年6月中旬，哈爾濱北方森林動物園圈養(yǎng)的川金絲猴(Rhinopithecusroxellanae)，表現(xiàn)出稀便較多，顏色為灰色，排泄到地面上呈片狀，稀便占糞便總量的60%～80%。另外樹葉的食入量也有所減少，比正常量減少30%～40%的異常癥狀。但其精神狀態(tài)、水果和窩頭等飼料的食入量則無明顯異常。前期診斷懷疑其為消化系統(tǒng)疾病，經(jīng)過一段時間治療無好轉。后診斷疑似寄生蟲感染，于是采集其糞樣進行寄生蟲檢測。同時我們還對園內(nèi)飼養(yǎng)的黑猩猩(Pantroglodytes)、埃及狒狒(Papiohamadryas)、東非狒狒(Papioanubis)、豚尾猴(Macacanemestrina)和灰斑懸猴(Cebusnigrivittatus)共5種靈長類動物的糞便樣本進行了檢測。現(xiàn)將對上述6種動物進行糞便蟲卵的檢測和藥物治療的結果總結如下。

1 材料與方法

1.1糞便采集與處理

采集新鮮糞便 10～20 g，裝入干凈封口袋，帶回實驗室，當天進行檢查。處理方法：用飽和食鹽水漂浮法，檢查是否為陽性，顯微鏡下觀察其形態(tài)結構并拍照。靈長類動物糞便樣品采集檢查情況如表1。

表1動物糞便樣品采集情況

Tab.1 Sample collection of animal feces

1.2 感染強度的測定

采用麥克馬斯特計數(shù)法(McMaster’s method)，稱取5 g糞便，與40 mL飽和鹽水混合均勻。通過過濾除渣，用移液槍吸取糞汁注入麥氏計數(shù)室里，靜置3～5 min，置于顯微鏡上，然后在鏡下記錄2個計數(shù)室內(nèi)蟲卵總數(shù)，求出2個計數(shù)室蟲卵的平均數(shù)，將所得值乘以60，即每克糞便中的蟲卵數(shù)。

1.3 治療效果的評價

通過驅蟲前后檢測靈長類腸道寄生蟲蟲卵的種類、感染率和感染強度(EPG)的變化狀況，對治療效果進行評價。

2 結果

2.1 靈長類動物消化道寄生蟲蟲卵種類及形態(tài)特征

在糞便的檢測中我們發(fā)現(xiàn)了毛尾線蟲(Trichurissp.)、蠕形住腸線蟲(Enterobiusvermicularis)和球蟲(Isosporasp.)3類寄生蟲。毛尾線蟲蟲卵60.31 μm ×23.50 μm，在埃及狒狒、東非狒狒和川金絲猴糞便中均有發(fā)現(xiàn)。蠕形住腸線蟲蟲卵64.09 μm×28.94 μm，只在黑猩猩糞便中發(fā)現(xiàn)。球蟲蟲卵20.96 μm×19.50 μm，僅在川金絲猴糞便中發(fā)現(xiàn)。3種蟲卵的形態(tài)如圖1所示。

圖1 糞檢陽性動物寄生蟲蟲卵(×400)Fig.1 The parasite eggs in feces positive animal(×400) 注：A.毛尾線蟲。鏡下毛首線蟲(鞭蟲)蟲卵，可見其蟲卵呈腰鼓狀，黃褐色，卵殼內(nèi)充滿紫褐色顆粒狀內(nèi)容物，兩端具塞，處單細胞期。B.蠕形住腸線蟲。近無色透明，兩側不對稱，呈柿核狀，卵殼較厚，內(nèi)含一幼蟲。C.艾美耳球蟲 Note：A.Trichuris sp.Under microscope the eggs of Trichuris sp. are visible drum shaped，tawny，with purplish-brown granular contents of eggshell，both ends with a plug，single cell.B.Enterobius vermicularis.Nearly colorless and transparent，anisopleural，persimmon nuclear shaped，egg shell israther thick，containing a larva.C.Eimeria sp.

2.2 靈長類動物腸道寄生蟲首次測定的感染情況

在首次檢測川金絲猴糞便時，檢測到了球蟲蟲卵和毛尾線蟲蟲卵，在7份糞便中5份檢測出寄生蟲蟲卵，其中2份同時感染2種寄生蟲。在1份名為童童的糞便樣品中檢測出大量的毛尾線蟲蟲卵，其他4份都只檢測出少量的蟲卵，寄生蟲感染率71.43%(5/7)。在首次檢測埃及狒狒和東非狒狒糞便樣品時，檢測到毛尾線蟲蟲卵，東非狒狒感染極少；黑猩猩檢測到蠕形住腸線蟲，豚尾猴和灰斑懸猴未發(fā)現(xiàn)任何寄生蟲感染且未表現(xiàn)出臨床癥狀，因此之后不再檢測豚尾猴和灰斑懸猴。所有靈長類動物總感染率66.7%(8/12)，6種靈長類動物寄生蟲感染情況見表2。

2.3 靈長類動物主要寄生蟲感染強度動態(tài)

川金絲猴糞便的首次檢測中，7份樣品中5份感染毛尾線蟲，在1份名為童童的糞便樣品中檢測出大量的毛尾線蟲蟲卵，其他4份都只檢測出少量的蟲卵。但由于這次童童的糞便收集太少，無法進行蟲卵計數(shù)，所以毛尾線蟲蟲卵計數(shù)只測了其他4份，蟲卵的平均感染強度偏低(圖2)。在驅蟲期間的第二次檢測中，我們發(fā)現(xiàn)只有童童感染毛尾線蟲，其他川金絲猴均沒有再檢測到寄生蟲。在第三次檢測中，毛尾線蟲感染強度明顯下降，而第四次的感染強度恢復到最高值后不再發(fā)生明顯的波動。埃及狒狒和東非狒狒盡管在7月5～7日進行了藥物驅蟲，但感染強度未發(fā)生明顯波動。黑猩猩在驅蟲后的第一次檢測中，較驅蟲前感染強度偏低，在驅蟲后的第二次檢測中，感染強度較快增大。

表2 哈爾濱北方森林動物園靈長類動物腸道寄生蟲感染情況

Tab.2 Infection situation of parasite

注：* 本次實驗的最小檢出限是30，飽和鹽水漂浮發(fā)現(xiàn)了蟲卵，但麥克馬斯特法計數(shù)結果為0

Note：The minimum detection limit of this experiment is 30，the eggs was found by brine floatation，but the result of McMaster’s method was 0

圖2 主要寄生蟲感染強度EPGFig.2 Infection intensity EPG of main parasite 注：1.圖中川金絲猴、埃及狒狒和東非狒狒選擇的寄生蟲都是毛尾線蟲，黑猩猩是蠕形住腸線蟲；2.5次采樣時間分別是6月17日、6月21日、6月28日、8月9日和8月23日；3.“驅蟲1”指6月20～22日川金絲猴驅蟲；“驅蟲2”指7月5～7日埃及狒狒、東非狒狒和黑猩猩驅蟲；4.為了與采樣日期相對應，埃及狒狒、東非狒狒和黑猩猩的第一、二、三次蟲卵檢測與圖中第三、四、五次相對應 Note：1.The parasites of Rhinopithecus roxellanae，Papio hamadryas and Papio anubis are all Trichuris sp.the parasites of Pan troglodytes is Enterobius vermicularis in the picture；2.The time of Five sampling were June 17，June 21，June 28，August 9，and August 23 respectively；3.“expelling parasite 1”refers to the expelling parasite of Rhinopithecus in June 20-22；“expelling parasite 2”refers to the expelling parasite of Papio hamadrys、Papio anubis and Pan troglodytes in July 5-7；4.In order to correspond to the time of sampling，the first，second，and third eggs detection of Papio hamadrys、Papio anubis and Pan troglodytes correspond to the third，fourth and fifth respectively

2.4 靈長類動物主要寄生蟲治療效果

根據(jù)實驗室檢測結果，我們選擇了甲苯咪唑片治療川金絲猴 、埃及狒狒和東非狒狒，鹽酸左旋咪唑片治療黑猩猩，通過藥物對動物糞便EPG的影響作用來評價對動物的治療效果。川金絲猴在驅蟲前，糞便中檢測到毛尾線蟲和球蟲。在甲苯咪唑藥物治療后，球蟲消失，而毛尾線蟲的感染強度由4 980個/g迅速下降到180個/g，這說明甲苯咪唑對川金絲猴毛尾線蟲的驅蟲治療效果較理想，對球蟲的治療也有一定效果。埃及狒狒和東非狒狒連續(xù)3次的感染強度沒有發(fā)生明顯變化，我們無法判定甲苯咪唑是否對它們產(chǎn)生作用。經(jīng)檢測黑猩猩只感染了蠕形住腸線蟲，驅蟲后的第一次檢測，感染強度較驅蟲前有所下降，但近半個月后的第二次檢測時，感染強度快速增大。這表明鹽酸左旋咪唑對黑猩猩蠕形住腸線蟲有良好的效果，很好地抑制住了蠕形住腸線蟲對黑猩猩的侵害。

3 分析與討論

在對哈爾濱北方森林動物園6種圈養(yǎng)靈長類動物的寄生蟲檢測中，我們發(fā)現(xiàn)，寄生蟲種類單一、感染強度較小、感染率低、毛尾線蟲突出等特點。6種動物，感染單種寄生蟲的動物有3種，占 50.00%(3/6)；感染2種寄生蟲的有1種，占 16.67%(1/6)；未查出寄生蟲卵的有2種，占 33.33%(2/6)。黑猩猩只感染蠕形住腸線蟲，川金絲猴感染毛尾線蟲和球蟲，東非狒狒和埃及狒狒感染毛尾線蟲，毛尾線蟲為優(yōu)勢種。

據(jù)國外報道[4]，不同種類的野生靈長類動物都有線蟲感染，主要是鞭蟲(Trichuristrichura)、蛔蟲(Ascarislumbricoides)和十二指腸鉤口線蟲(Ancylostomaduodenale)，這與我們的調(diào)查結果有所差異。國內(nèi)張迪[5]等人發(fā)現(xiàn)黑猩猩感染司氏伯特絳蟲(Bertiellastuderi)，王蕓[6]等人發(fā)現(xiàn)北平頂猴(Macacaleonine)感染伯特絳蟲(Bertiellastuderi)，而我們都沒有檢測到。林慧彪[7]等發(fā)現(xiàn)野生滇金絲猴種群毛首線蟲卵陽性率為72%。胡罕等人在靈長類動物糞樣中均查出毛首線蟲卵，其中川金絲猴毛首線蟲卵陽性率為80.00%，EPG達(33 275±6 556.61)個/g。圈養(yǎng)的川金絲猴毛尾線蟲的感染率很高，達到80%以上[8]，每克糞便中毛尾線蟲卵達到10 000/g以上的占70%[9]。上述調(diào)查結果表明，毛首線蟲是危害圈養(yǎng)金絲猴的主要寄生蟲[10]。與他們測得的感染率、感染強度相比，我們測得川金絲猴的最高感染率僅為71.43%(5/7)，EPG最高4 980個/g，遠遠小于以往報道。這表明哈爾濱北方森林動物園靈長類動物的管理預防做得很好，有效地控制了寄生蟲對靈長類動物的侵害。通過本次實驗，我們認為圈養(yǎng)川金絲猴驅蟲最好做到間隔1個月進行1次驅蟲，這樣可以使川金絲猴體內(nèi)的毛尾線蟲保持在最低水平，同時對靈長類動物持續(xù)階段性地進行寄生蟲檢查也是十分必要的。

非人靈長類腸道寄生蟲感染率受很多因素的影響[11]。最常見的影響因素就是外部環(huán)境周期性的波動，即季節(jié)性[12]。同樣地，激素以及免疫機制的不同可能會影響寄生蟲種類對宿主的選擇。本研究中，川金絲猴童童由于個體差異，體質(zhì)較弱可能是其毛尾線蟲持續(xù)感染的主要因素[13]。動物園中，圈養(yǎng)動物生活在相對封閉潮濕的飼養(yǎng)環(huán)境中，這也增大了寄生蟲感染率[14]。此外毛尾線蟲和蠕形住腸線蟲獨特的生活史也是圈養(yǎng)動物寄生蟲病流行的重要因素。毛尾線蟲的發(fā)育不需要中間宿主[15]，在普通環(huán)境中需3個星期左右發(fā)育成侵襲性幼蟲，幼蟲在動物盲腸中很難驅凈，川金絲猴對毛尾線蟲又特別易感。蠕形住腸線蟲雌蟲會在宿主肛門和會陰部周圍產(chǎn)卵，并在該處發(fā)育成為感染性蟲卵[16]。當非人靈長類相互理毛時，蟲卵易存留在皮膚或指尖，經(jīng)手口傳播，幼蟲在其小腸內(nèi)孵化，到大腸中發(fā)育為成蟲[17]。在實際管理中，動物園管理人員無法使動物體表及環(huán)境中的蟲卵完全去除。

[1] 葉玭婧，姚輝，向左甫.非人靈長類腸道寄生蟲研究進展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學，2013，41(12)：5384-5388，5391.

[2] Ryan S J，Walsh P D.Consequences of non-intervention for infectious disease in African great apes[J].PLoS One，2011，6(12)：e29030.

[3] Jones-Engel L，May C C，Engel G A，et al.Diverse contexts of zoonotic transmission of simian foamy viruses in Asia [J].Emerging Infectious Diseases，2008，14(8)：1200-1208.

[4] Thurber M I，Ghai R R，Hyeroba D，et al.Co-infection and cross-species transmission of divergentHepatocystislineages in a wild African primate community[J].International Journal for Parasitology，2013，43(8)：613-619.

[5] 張迪，李明杰，徐立新，等.圈養(yǎng)幼齡黑猩猩感染斯氏伯特絳蟲的鑒定[J].畜牧與獸醫(yī)，2012，44(9)：55-56.

[6] 王蕓，袁飛舟，徐彩銀，等.北平頂猴伯特絳蟲的分子鑒定及驅蟲效果試驗[J].中國獸醫(yī)雜志，2014，50(10)：18-21.

[7] 林慧彪，李延鵬，段繼霞，等.滇金絲猴腸道寄生線蟲的生防捕食線蟲真菌篩選[J].四川動物，2016，35(1)：31-37.

[8] 胡罕，王靜，裴俊鋒，等.野生動物體內(nèi)寄生蟲感染現(xiàn)狀[J].經(jīng)濟動物學報，2010，14(3)：173-176.

[9] 顧永熙，夏述忠，曹杰，等.金絲猴毛尾線蟲驅蟲藥物篩選及驅蟲程序實驗[J].中國獸醫(yī)雜志，2002，38(11)：12-13.

[10] 魏蘭英，姜昌富，韓家俊，等.武漢動物園靈長類動物的腸道寄生蟲調(diào)查[J].動物學雜志，1990，25(2)：3-6.

[11] 羅琴，譚立娉，胡偉，等.動物園野生動物消化道寄生蟲感染調(diào)查[J].中國動物傳染病學報，2015，23(1)：27-32.

[12] 李梅，楊光友.我國金絲猴寄生蟲種類及其疾病研究概況[J].動物醫(yī)學進展，2015，36(6)：155-158.

[13] Muehlenbein M P，Pacheco M A，Taylor J E，et al.Accelerated diversification of nonhuman primate malarias in southeast Asia：adaptive radiation or geographic speciation?[J].Molecular Biology and Evolution，2015，32(2)：422-439.

[14] 胡新波，黃淑芳，何鑫，等.環(huán)境豐容對川金絲猴毛尾線蟲感染的影響分析[J].野生動物學報，2014，35(4)：399-402.

[15] 黃淑芳，胡新波，于學偉，等.圈養(yǎng)條件下川金絲猴毛尾線蟲感染控制方法的研究[J].野生動物學報，2014，35(2)：160-166.

[16] 李明杰，程家求，鄧長林.黑猩猩司氏伯特絳蟲感染的診治[J].金陵科技學院學報，2011，27(1)：77-80.

[17] Soeiro M N C，Werbovetz K，Boykin D W，et al.Novel amidines and analogues as promising agents against intracellular parasites：a systematic review[J].Parasitology，2013，140(8)：929-951.

Captive nonhuman primates； Coccidium； Hairy nematodes；Enterobiusvermicularis； Treatment effeat

哈爾濱北方森林動物園川金絲猴出現(xiàn)稀便多和攝食樹葉減少的異常癥狀，經(jīng)初步診斷疑似寄生蟲感染。隨后我們在川金絲猴(Rhinopithecusroxellana)糞便中檢測到大量的毛尾線蟲(Trichurissp.)和少量的球蟲(Isosporasp.)。通過給予川金絲猴甲苯咪唑進行藥物治療。同時，對動物園未表現(xiàn)出癥狀的其他5種靈長類動物，包括埃及狒狒(Papiohamadryas)、東非狒狒(Papioanubis)、豚尾猴(Macacanemestrina)、灰斑懸猴(Cebusnigrivittatus)和黑猩猩(Pantroglodytes)進行腸道寄生蟲的檢測。結果顯示，在埃及狒狒和東非狒狒的糞便中檢測出毛尾線蟲，黑猩猩檢測到蠕形住腸線蟲(Enterobiusvermicularis)，豚尾猴和灰斑懸猴均未檢測到寄生蟲。埃及狒狒和東非狒狒給予甲苯咪唑(Mebendazole Tablets)，黑猩猩給予鹽酸左旋咪唑(Levamisole Hydrochloride Tablets)進行治療。結果表明，治療效果良好。

Diagnosis and Treatment of Parasitosis in CaptivePrimates and Effectiveness Evaluation

He Xiangbao1Hao Chunxiao2Li Ruonan1Zhang Haijun3Guan Chunyu1

(1.Harbin Northern Forest Zoo，Harbin，150322，China；2.College of Wildlife Resources，Northeast Forestry University，Harbin，150040，China；3.Erdos Livestock Breeding Improved Workstation，Erdos，017000，China)

A golden monkey at the Northern Forest Zoo was found eating less leaves and defecated more loose feces in mid-June 2016.Preliminary diagnosis indicated parasitic infection.Fecal samples of the golden monkey were examined on 17 June 2016.We identified manyTrichurissp.and and fewIsosporasp.The veterinarian treated the Golden Monkey with Mebendazole tablets.At the same time，we conducted eggs inspection of other primates includingPapiohamadryas，Papioanubis，Macacaleonine，CebusnigrivittatusandPantroglodytes.Eggs ofTrichurissp. were found in the feces ofPapiohamadryasandP.anubis.Eggs ofEnterobiusvermiculariswere found in feces ofPantroglodytes.We did not find any parasite infection inMacacaleonineorCebusnigrivittatus.PapiohamadryasandP.anubiswere treated with Mebendazole tablets.Pantroglodyteswere given levamisole hydrochloride tablets.The treatments proved effective.

東北林業(yè)大學國家級實驗教學示范中心建設專項——本科實踐教學研究子項目立項

何相寶，男，41歲，碩士，高級工程師；主要從事野生動物飼養(yǎng)與繁殖的研究。 E-mail：he191@sina.com

2016-09-29

S858.93

A

修回日期：2016-11-24

發(fā)表日期：2017-05-10

2310-1490(2017)02-200-05