現代生物技術在植物檢疫中的作用

李雪琴+李紅梅++++++馮鋒++湯長征

[摘要]：當前，我國的動植物產品大量出口到國外，也有很多產品從國外進口，使得我國的植物檢疫需求不斷提升。在本文中，我們將對現代生物技術進行簡要的介紹，并探尋其在植物檢疫中的重要作用。

[關鍵詞]：現代生物技術；植物檢疫；重要作用

[引言]：我國植物檢疫技術雖然經過了一段時間的發展，但是其檢測手段過于陳舊，已經無法滿足當前我動植物產品進出口貿易的需求，因此，我們應注重對檢疫手段的創新和升級。當前，免疫學、生物學等生物技術在植物檢疫中發揮了優秀作用，因此在下文中，我們將對這些現代生物技術進行介紹和分析。

1、免疫學技術在植物檢疫中的應用

1.1免疫熒光技術

免疫熒光技術主要是以抗體作為基礎的檢測手段，在植物檢疫中發揮了重要作用，當前主要用在植物組織、種子和土壤中細菌和真菌的檢測當中。通過對免疫熒光技術的使用，能夠有效檢測出導致菜豆發橫生能萎蔫的病菌，并且靈敏度非常高，能夠有效對假陽性反應問題進行解決。免疫熒光技術分為直接免疫熒光法和間接免疫熒光法兩種。其中，間接免疫熒光法的應用范圍比較廣，能夠使一抗與含有熒光色素的二抗進行結合，他們發出的熒光能夠由免疫熒光顯微進行檢測。不過，免疫熒光技術在應用的過程中也存在著一定的局限性，對于設備的要求比較高，設備造價比較昂貴，操作所需時間比較多，并且有的時候會受到植物和土壤中熒光的干擾，從而給觀察帶來了一定的阻礙。

2、1.2

酶聯免疫吸附技術自從誕生以來，廣泛應用在植物病毒、真菌等檢測之中，例如，在病毒方面，能夠用作種子中的大豆花葉病毒、苜蓿花葉病毒、大麥條紋花葉病毒、煙草花葉病毒、黃瓜花葉病毒、煙草環斑病毒、等病毒的診斷和檢測；真菌方面，疫霉、腐霉、黑盤菌、等真菌的ELISA試劑盒已被商業化生產，并已廣泛應用。

1.3免疫電鏡技術

免疫電鏡技術是從上世紀六七十年代開始投入應用的，具有快速、準確、節約材料等特點，并且保存時間比較長，還可以郵寄，因此免疫電鏡技術當前已經得到廣泛的應用，尤其是在植物病原真菌、病毒等類似檢測中得到了應用。免疫電鏡技術與酶聯免疫法相比，雖然在靈敏度上相似，但是比酶聯免疫發更加直觀和準確，對于一些難以鑒定的木本植物病毒也能夠實現檢測。免疫電鏡技術可以直接檢測感染病毒的組織抽取也，處理對病毒定性之外，還能夠用在植物粗汁液中病毒粒體的定量分析中。由于免疫電鏡技術具有非常多的優點，因此在當前受到了歡迎，是較為理想的檢測技術之一。

2、核酸技術在植物檢疫中的作用

核算技術最開始是在上世紀八十年代至九十年代出現的，剛開始利用核酸雜交技術對植物病原進行檢測，并且對核酸雜交技術和免疫學技術的優缺點進行對比，其中能夠明確得出，核酸雜交技術不管是在速度上還是靈敏度上還是在檢測率上都比免疫學方法有著大幅度的提升。尤其是PCR技術，能夠直接對病原物序列進行檢測，從而使檢測準確性大大提升。核酸技術主要包括核酸探針、RFLP技術、PCR技術等。

2.1核酸技術

核酸探針是使用經過標志（同位素或非同位素）并用于檢測出互補核酸序列的一段寡聚核苷酸。當前，核酸探針技術已運用于植物病害診斷和植物病原物的檢測之中。典型的核酸雜交技術是將少批的核酸注入在硝酸纖維膜或尼龍膜上，再浸入含特異性探針的雜交液中，經過放射顯影或酶標顏色反響檢測。核酸雜交技術雖然在檢測病原菌方面表現出它的優勢，但由于其煩瑣操作以及缺少靈敏的探針標志而限制了其普及運用。同位素標志靈敏度高，但同位素標志費用高、實驗條件嚴峻，且有放射性危害，標志好的探針在幾周內其放射活性就衰退到不能運用，因而不宜大規模推行。非放射性的生物素抑制了這些缺陷，因而非放射生物素-親和性系統被運用于各種病害檢測，而在類病毒的檢測上光生物素標志探針具有與同位素標志一樣的靈敏度。目前運用于柑桔裂皮病檢測的3種生物素：光生物素、生物素肼標志中，DIG標志的靈敏度最高，運用最廣，由于非同位素標志具有同位素標志無與倫比的優越性；靈敏度高、費用少、對人體無害、保管時間長并且比較穩定，非常適宜進出口檢疫技術的需求，它必將成為一種有力的檢測工具。

2.2PCR技術

PCR技術的全程叫做生物學的聚合酶鏈反應技術，是一種DNA體外擴增技術，能夠將含有所需擴增的靶DNA雙鏈經過高溫變性成為單鏈，然而在退火中加入的寡聚合核苷酸引物與DNA模板進行結合，在經過十幾個循環之后，靶DNA的含量將特異性增長了百萬倍，因此使得DNA分子的分析能力和檢測能力得到有效提升。由于生物學的聚合酶鏈反應技術能夠快速、簡便地進行檢測，因此在植物病害診斷和病原物檢測方面發揮了非常大的作用和潛力。隨著研究的不斷深入，PCR技術在應用的過程中需要比較昂貴的儀器設備和專業化的技術支持，當前僅僅在實驗室中才能夠操作，難以實現普及和推廣。

3、結語

隨著時代的不斷發展，生物技術也實現了不斷地創新和發展，在植物檢疫中得到了更加廣泛的應用，我們應積極對當前快速發展的生物技術進行了解，從而提高植物檢疫的效果。

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