膀胱尿路上皮癌中信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄活化因子6和基質(zhì)金屬蛋白酶-2的表達(dá)

鄭 超 王 卓 曹余光

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院泌尿外科，遼寧 錦州 121000)

膀胱尿路上皮癌中信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄活化因子6和基質(zhì)金屬蛋白酶-2的表達(dá)

鄭 超 王 卓 曹余光

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院泌尿外科，遼寧 錦州 121000)

目的檢測(cè)膀胱尿路上皮癌中信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄活化因子(STAT)6和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2的表達(dá)，分析其與臨床病理特征的關(guān)系。方法63例膀胱尿路上皮癌患者術(shù)后組織為觀察組，21例膀胱正常黏膜組織為對(duì)照組。應(yīng)用免疫組化(SP)方法檢測(cè)STAT6和MMP-2的表達(dá)。結(jié)果觀察組STAT6和MMP-2表達(dá)陽性率明顯高于對(duì)照組。觀察組STAT6和MMP-2表達(dá)均與腫瘤的浸潤性、是否累犯膀胱周圍組織相關(guān)，STAT6表達(dá)與腫瘤最大徑和腫瘤級(jí)別相關(guān)。線性相關(guān)分析顯示二者無相關(guān)性。結(jié)論膀胱尿路上皮癌中STAT6和MMP-2表達(dá)升高對(duì)腫瘤的遷移和進(jìn)展有一定促進(jìn)作用，STAT6對(duì)促進(jìn)腫瘤形成和高級(jí)別轉(zhuǎn)化可能有促進(jìn)作用。STAT6和MMP-2之間無明顯協(xié)同作用。

膀胱；尿路上皮癌；信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄活化因子(STAT)6；基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2

膀胱癌主要見于中老年人，尿路上皮癌是最常見的類型，病變形成時(shí)細(xì)胞有明顯異型，且高度異型的細(xì)胞使腫瘤處于進(jìn)展?fàn)顟B(tài)〔1〕。基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2是細(xì)胞外基質(zhì)降解的重要蛋白，高表達(dá)時(shí)可以引起基底膜破壞，使腫瘤細(xì)胞易于遷移〔2，3〕。信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄活化因子(STAT)6具有廣泛的參與細(xì)胞因子和生長因子信號(hào)傳導(dǎo)的作用，可以調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移〔4〕。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)膀胱尿路上皮癌中STAT6和MMP-2的表達(dá)特征，分析二者的關(guān)系及臨床意義。

1 資料與方法

1.1臨床資料 2014年10月至2016年9月我院確診為膀胱尿路上皮癌患者63例為觀察組，留取術(shù)后的蠟塊組織，納入均經(jīng)病理醫(yī)師進(jìn)行復(fù)查確診，并符合世界衛(wèi)生組織(WHO)中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①惡性腫瘤病史；②泌尿生殖系統(tǒng)發(fā)育異常；③伴林奇綜合征。其中男32例，女31例，年齡52～72(平均61.4)歲。其中高級(jí)別尿路上皮癌29例，低級(jí)別尿路上皮癌34例。21例膀胱正常黏膜組織為對(duì)照組，其中男11例，女10例，年齡54～70(平均61.0)歲。兩組性別、年齡無明顯差異。

1.2免疫組化(SP)方法檢測(cè)STAT6和MMP-2的表達(dá) 兩組術(shù)后留取的組織均常規(guī)經(jīng)甲醛溶液固定、取材、脫水、包埋，切片后應(yīng)用SP法檢測(cè)、應(yīng)用二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，操作均按說明書進(jìn)行，做好質(zhì)量控制工作。

1.3STAT6和MMP-2結(jié)果的判定 STAT6以細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞，MMP-2以細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞。以著色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞百分比綜合評(píng)價(jià)陽性標(biāo)準(zhǔn)：著色強(qiáng)度評(píng)分：0分，無顯色；1分，弱顯色；2分，中顯色；3分，強(qiáng)顯色。陽性細(xì)胞百分比評(píng)分：0分，<5%；1分，5%～10%；2分，11%～30%；3分，31%～50%；4分，>50%。取兩項(xiàng)評(píng)分之和的值作為最終評(píng)分結(jié)果。0～2分為陰性，>2分為陽性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)及線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組STAT6和MMP-2陽性率的比較 兩組STAT6和MMP-2陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表1。

2.2觀察組不同臨床特征STAT6和MMP-2陽性率的比較 STAT6和MMP-2的表達(dá)均與腫瘤的浸潤性、是否累犯膀胱周圍組織顯著相關(guān)(P<0.05)，STAT6表達(dá)與腫瘤最大徑和腫瘤的級(jí)別顯著相關(guān)(P<0.05)。見表2。

2.3觀察組STAT6和MMP-2的相關(guān)性 STAT6和MMP-2呈正相關(guān)(r=0.42，P=0.025)。

表1 兩組STAT6和MMP-2陽性率比較〔n(%)〕

表2 觀察組不同臨床特征STAT6和MMP-2陽性率比較〔n(%)〕

3 討 論

膀胱黏膜被覆的是尿路上皮細(xì)胞，其癌變過程可以由低級(jí)別向高級(jí)別癌轉(zhuǎn)化，同時(shí)腫瘤細(xì)胞具有高度的侵襲性，在此過程中，轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白出現(xiàn)明顯的表達(dá)失調(diào)〔5〕。STAT蛋白最初是在干擾素誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)過程中發(fā)現(xiàn)的，目前已分離出7種STATs基因和表達(dá)的蛋白。其最基本的生理作用是廣泛參與生長因子的信號(hào)傳遞，促進(jìn)細(xì)胞的增殖和分化，同時(shí)調(diào)節(jié)胚胎發(fā)育和細(xì)胞凋亡等生物學(xué)作用〔6，7〕。人類STAT6的基因定位在12q13～24，是一種DNA結(jié)合蛋白，由850個(gè)氨基酸殘基組成。研究認(rèn)為在白細(xì)胞家族的刺激下，通過Jak激酶的作用，胞質(zhì)中原處于非磷酸化的STAT6蛋白被磷酸化，形成二聚體，進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，識(shí)別核內(nèi)特異的DNA結(jié)合元件并與之結(jié)合，從而啟動(dòng)下游特定基因的轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)生相應(yīng)的生物學(xué)效應(yīng)〔8，9〕。膀胱癌是高度惡性的腫瘤，部分患者即使行膀胱全切術(shù)，也不能完成阻止腫瘤的進(jìn)展，這主要與尿路上皮癌的高遷移性有關(guān)，在腫瘤細(xì)胞遷移過程中，細(xì)胞外基質(zhì)與腫瘤細(xì)胞之間關(guān)系更為重要〔10〕。MMPs家族與腫瘤密切相關(guān)，MMP-2是家族中的重要成員，也是明膠酶的一種，可以有效降解基底膜(上皮與深層基質(zhì)之間的屏障)，主要是降解Ⅳ型膠原〔11，12〕。研究顯示在腫瘤細(xì)胞高度增殖過程中，MMP-2能以酶原形式大量分泌，不僅能在細(xì)胞表面活化其他促轉(zhuǎn)移的細(xì)胞因子，還可以引起促進(jìn)血管新生等生物學(xué)作用〔13，14〕。

本研究結(jié)果提示STAT6和MMP-2二者表達(dá)升高是促進(jìn)膀胱癌形成的重要因素，也提示STAT6和MMP-2可能具有癌基因樣的作用。二者表達(dá)升高可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞向肌層的生長及侵入肌層甚至浸潤到膀胱壁外，使腫瘤細(xì)胞的惡性生物學(xué)特征表達(dá)的更加明顯。STAT6高表達(dá)時(shí)可以促進(jìn)腫瘤生長，腫瘤細(xì)胞增生活躍，異型性明顯〔15，16〕，同時(shí)STAT6高表達(dá)也使腫瘤細(xì)胞分級(jí)更高，腫瘤惡性程度明顯提高〔17，18〕。本文結(jié)果提示二者對(duì)腫瘤的作用不在同一個(gè)通路上。STAT6的主要作用可能是通過促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖繼而引起相關(guān)生物學(xué)行為的改變，而MMP-2以促進(jìn)腫瘤遷移性為主，其高表達(dá)過程也使腫瘤細(xì)胞更適合播散，同時(shí)MMP-2還具有多向生物學(xué)功能，如對(duì)間質(zhì)血管生成的調(diào)控作用、對(duì)轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白的調(diào)節(jié)作用等。因此關(guān)注兩種蛋白在膀胱癌中的表達(dá)可能對(duì)研究腫瘤的轉(zhuǎn)移有一定價(jià)值。

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〔2017-06-27修回〕

(編輯 苑云杰)

鄭 超(1971-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事泌尿系統(tǒng)疾病研究。

R73

A

1005-9202(2017)17-4310-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2017.17.067