胃腺癌組織微管解聚蛋白1和突變型P53的表達及意義

王 芳 趙 珺 楊生森 馬臻奇 張洪芳 綻永華 郜 茜

(青海大學附屬醫院消化內科，青海 西寧 810001)

胃腺癌組織微管解聚蛋白1和突變型P53的表達及意義

王 芳 趙 珺1楊生森 馬臻奇 張洪芳 綻永華 郜 茜

(青海大學附屬醫院消化內科，青海 西寧 810001)

目的應用免疫組化方法檢測胃腺癌中微管解聚蛋白(Stathmin)1和突變型P53(TP53)的表達，分析二者的關系及意義。方法確診為胃腺癌的患者共72例為A組，經病理學確診為胃黏膜高級別上皮內瘤變的術后組織32例為B組，經病理學確診為胃黏膜低級別上皮內瘤變的內鏡咬檢組織32例為C組，距腫瘤邊緣>5 cm的非腫瘤性胃黏膜組織15例為D組，均留取蠟塊組織，應用免疫組化SP法檢測4組Stathmin1和TP53的表達。結果4組Stathmin1和TP53表達的陽性率差異均有統計學意義(P<0.01)。A組Stathmin1和TP53的表達與腫瘤最大徑、增殖指數密切相關；Stathmin1的表達與腫瘤脈管侵犯密切相關，二者均與腫瘤的淋巴結轉移和神經侵犯無相關性。相關分析顯示A組Stathmin1和TP53呈正相關。結論胃腺癌中Stathmin1和TP53高表達對腫瘤形成和進展有重要作用。Stathmin1和TP53有明顯的正向協同作用。

胃腺癌；微管解聚蛋白(Stathmin)1；突變型(T)P53；免疫組化

胃腺癌是上皮源性腫瘤，與胃黏膜上皮細胞的不典型增生和上皮內瘤變的程度有關〔1〕。病變進展中可以觀察到多種基因和蛋白的表達失調。微管解聚蛋白(Stathmin)1是一種細胞蛋白質，作為一種細胞信號調節因子，在微管的不穩定性中扮演著十分重要的角色〔2，3〕。研究顯示Stathmin1在惡性腫瘤中的表達升高，可能參與多種生物學作用〔4〕。本文關注胃腺癌組織Stathmin1的表達特征及其與突變型(T)P53的關系，分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 2014年1月至2016年2月青海大學附屬醫院確診為胃腺癌的患者共72例為A組，均行手術根治，并經病理醫師確診，符合世界衛生組織(WHO)的診斷標準。男39例，女33例，年齡58～78(平均63.4)歲，其中高分化15例，中分化17例，低分化40例。經病理學確診為胃黏膜高級別上皮內瘤變術后組織32例為B組，其中男17例，女15例，年齡56～74(平均65.5)歲。經病理學確診為胃黏膜低級別上皮內瘤變的咬檢組織32例作為C組，其中男18例，女14例，年齡55～70(平均62.4)歲。排除標準：①近3個月有嚴重感染；②有先天性疾病；③合并其他器官惡性腫瘤的患者。距腫瘤邊緣>5 cm的非腫瘤性胃黏膜組織15例為D組，其中男7例，女8例，年齡59～75(平均65.9)歲。4組一般臨床資料無明顯差異，具有可比性。

1.2Stathmin1和TP53表達檢測方法 留取的組織均應用中性甲醛溶液固定超過24 h，經取材后，常規脫水，石蠟包埋，切取4 μm切片置于膠片上，應用免疫組化SP法檢測Stathmin1和TP53的表達，二氨基聯苯胺(DAB)顯色。操作均由病理科技師完成，按說明書進行，做好質控，減少誤差。

1.3Stathmin1和TP53結果的判讀 Stathmin1的陽性部位是細胞質，TP53陽性部位是細胞核，以出現棕黃色顆粒為陽性。先在100倍鏡下選擇上皮細胞集中的區域進行觀察，然后在400倍鏡下選擇5個視野計數，取平均值。以陽性率<10%定為陰性，≥10%定為陽性。

1.4統計學方法 采用SAS6.12統計軟件進行χ2檢驗和線性相關性分析。

2 結 果

2.14組Stathmin1和TP53陽性率的比較 A、B、C、D組中Stathmin1和TP53的表達有顯著降低趨勢(P<0.01)。見表1。

2.2A組不同臨床病理特征中Stathmin1和TP53表達陽性率比較 Stathmin1和TP53的表達與腫瘤最大徑、增殖指數密切相關，Stathmin1的表達與腫瘤的脈管侵犯密切相關，二者均與腫瘤淋巴結轉移和神經侵犯無相關性。見表2。

2.3A組Stathmin1和TP53表達相關性 Stathmin1和TP53呈正相關(r=0.49，P=0.044 0)。

表1 4組Stathmin1和TP53陽性率的比較〔n(%)〕

表2 A組不同臨床病理特征中Stathmin1和TP53表達陽性率的比較〔n(%)〕

3 討 論

胃腺癌形成過程受P53調節通路調控〔5〕。P53是最早發現的腫瘤相關基因之一，有 “分子警察 ”之稱〔6〕。其有兩種類型，一種是野生型，一種是T。野生型P53基因是一種抑癌基因，但是在正常機體很難檢測到〔7，8〕。TP53是一種腫瘤促進基因，不僅可以消除正常的P53功能，還可以調節多種基因的表達〔9，10〕。孔守芳等〔11〕通過檢測宮頸上皮內瘤變組織中Stathmin1和P53的表達，發現二者在復發組中的表達明顯升高，認為二者聯合檢測可以作為宮頸上皮內瘤變術后預后判斷的生物學指標。Stathmin1是由149個氨基酸組成的蛋白，分子量為19 kD，其結構包括3部分：N端的結構調節域、中心區和C端的蛋白〔12〕。Stathmin1蛋白在細胞周期的各期中對微管解聚活性均有一定作用。研究認為在有絲分裂的間期，Stathmin1以非磷酸化的形式存在，可以加速微管解聚，促使紡錘體形成〔13〕。在早期，Stathmin1經過磷酸化的作用使其活性消失，在晚期去磷酸化而重新激活，紡錘體解體，Stathmin1可以對細胞的增殖有影響〔14〕。有學者通過研究Stathmin1對轉移的作用，發現其高表達時可以促進腫瘤細胞遷移。而下調Stathmin1表達能減少轉移的頻率〔15〕。

本研究提示Stathmin1和TP53高表達是正常上皮-低級別上皮內瘤變-高級別上皮內瘤變-腺癌的重要調節因素，即二者可以促進腫瘤性病變的形成過程。Stathmin1和TP53高表達可以促進腫瘤的生長繁殖和細胞數量的增加，細胞異型性明顯，分化程度低，腫瘤的體積增大。本文結果提示Stathmin1高表達可以促進脈管侵犯。本實驗提示Stathmin1對脈管的作用可能具有直接侵襲性，或者是對血管的侵襲作用，而對淋巴結播散無明顯的作用。本文提示Stathmin1和TP53二者呈現正向協同作用，Stathmin1可能對激活TP53起重要的促進作用〔16〕。有觀點顯示紫杉類化療藥主要作用于細胞的G2晚期和M期末，可以抑制微管的裂解，引起微管排列異常，使紡錘體失去正常功能而促進細胞凋亡〔17〕。Stathmin1和TP53均與紫杉醇類化療藥物的效果相關，間接提示二者的相關性〔18，19〕。但是Stathmin1和TP53之間調節的具體機制有待后續研究證實。

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〔2017-04-19修回〕

(編輯 苑云杰)

郜 茜(1975-)，女，副主任醫師，主要從事消化系統疾病研究。

王 芳(1982-)，女，主治醫師，主要從事消化系統疾病研究。

R73

A

1005-9202(2017)17-4299-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2017.17.062

1 青海大學醫學院基礎醫學部病原生物教研室