超聲波法提取蕎麥粉中黃酮類化合物的工藝研究

張國濤

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超聲波法提取蕎麥粉中黃酮類化合物的工藝研究

張國濤

（榆林學院， 陜西 榆林 719000）

為獲得最佳的蕎麥粉黃酮超聲提取工藝，在考察單因素的基礎上，采用四因素三水平的正交試驗，獲得最佳的超聲提取黃酮工藝條件為：乙醇濃度65%，料液比為1∶45，超聲溫度60 ℃，超聲時間25 min。在最優工藝條件黃酮得率最高，為20.5 mg/g。

蕎麥；黃酮；超聲萃取

蕎麥獨特的生長環境使其具有很高的營養價值，其所含的蛋白質和B組維生素均比大米要高很多[1]。此外蕎麥還還具有許多的藥學特性，如具有降血糖、降血脂和減少自由基的抗氧化活性[2-6]。蕎麥的這些藥學作用是蕎麥中所含特殊營養成分的結果，黃酮類化合物在其中就發揮很大的作用[7-10]。研究蕎麥中黃酮類化合物含量和種類，以及如何從蕎麥中獲得高產率的黃酮類化合物是開發蕎麥深加工產品的理論基礎，對提高蕎麥的附加值具有重要科學意義。

傳統提取黃酮類化學物的方法有醇提法、堿水提取法、堿水稀醇提取法、酶法和有機溶劑提取法[11-13]。由于傳統提取工藝耗時、繁瑣和提取率低等特點，高效的現代提取方法逐漸被人們所采用，主要有超臨界流體提取法、微波提取法和超聲波提取法等。本文采用實驗條件簡單易實現的超聲波法提取蕎麥中黃酮類化合物，確定最優的超聲波提取工藝條件。

1 實驗部分

1.1 材料和試劑

本實驗所用的蕎麥從本地農村購買的當年產蕎麥。乙醇采用分析純，蘆丁為國內產的編號為BW6265的標準品。

1.2 實驗儀器

采用的粉碎機為九陽的多能料理機機，型號為JYL-C022。超聲波清洗器采用歌能的型號G-100S的設備。紫外分光光度計采用島津的UV-1780型號的設備。

1.3 實驗方法

1.3.1 樣品處理

對收集的蕎麥樣品首先進行脫殼處理，對脫殼后的蕎麥采用多功能料理機進行粉碎處理，然后收集過20目篩的蕎麥粉樣品，裝在塑料袋封口放在冰箱冷藏備用。

1.3.2 黃酮化合物的定量分析

黃酮的測定方法采用蘆丁作為標準品，具體的實驗步驟見參考文獻[14]。

1.3.3 實驗設計

分別在100 mL 不同濃度的乙醇溶液中加入不同克數的蕎麥粉、考察在不同的超聲時間和超聲溫度下蕎麥黃酮萃取率的情況。在此基礎上設計四因素三水平的正交實驗，確定最佳的提取蕎麥粉黃酮的超聲工藝，并對最優工藝條件進行驗證實驗。

2 實驗結果與討論

2.1 單因素實驗

2.1.1 提取劑濃度對黃酮提取率的影響

考察了不同乙醇濃度提取蕎麥粉中黃酮的得率，具體結果見圖1所示。

圖1 乙醇濃度對黃酮提取率的影響

當乙醇濃度較低（45%）時，有大量的水溶性糖類和蛋白質等物質溶出，雖然可溶物較多，但黃酮得率卻不高。而當乙醇濃度大于等于55%時，蕎麥粉的黃酮得率明顯提高。在乙醇濃度為65%時，蕎麥粉的黃酮得率值達到最大。隨著乙醇濃度繼續增大，蕎麥粉的黃酮得率有輕微的下降趨勢，這與賈雪峰的報道結果相似[15]。

2.1.2 超聲萃取時間對黃酮產率的影響

不同超聲時間下蕎麥粉黃酮的得率見圖2所示。

圖2 萃取時間對黃酮產率影響

整體上隨著超聲時間的增加，蕎麥粉黃酮的得率均有不同程度的提高，尤其在5~15 min之間。而當超聲時間超過15 min后，這種增長趨勢減緩，可見繼續延長超聲時間 ，對黃酮萃取率影響不大。

2.1.3 蕎麥黃酮萃取率隨超聲溫度的變化情況

本文考察了超聲溫度在40~80 ℃之間對蕎麥粉黃酮得率的影響，結果見圖3所示。

在超聲溫度為40~60 ℃之間時，隨著超聲溫度的增加，蕎麥粉黃酮得率增加；但當溫度繼續增高時，也即在60~80 ℃之間，隨著超聲溫度的增加蕎麥粉黃酮的得率反而有所下降。由此可以得出60 ℃之前，溫度的增加有利于黃酮的溶解，但溫度高于60 ℃時反而會抑制黃酮的析出。

圖3 溫度對黃酮提取率影響

2.1.4 料液比對蕎麥粉黃酮提取率的影響

不同料液比條件下蕎麥粉黃酮提取率的結果見圖4所示。從圖中不難看出一定量的蕎麥粉隨著乙醇溶液消耗體積的增多，黃酮得率增加。不過在料液比為1∶30之后，隨著乙醇溶液消耗體積的增加，黃酮得率的增加趨勢明顯減弱，說明繼續增加乙醇溶液的用量對黃酮得率的提高意義不是很大。

2.2 正交實驗

2.2.1 正交實驗方案及結果

圖4 液料比對黃酮提取率影響

在單因素不同水平實驗的基礎上，設計正交實驗。分別選取各個因素的三個水平，以9（34）正交表安排實驗，具體見表1。

對表1中的數據進行分析，其中極差最大的列為（時間）列，因此時間對黃酮提取率的影響最大，正交實驗的方差分析也證明這點。例如在表2中可以看出，在=0.05水平，以極差最小列（料液比）列作為誤差列，（時間）列具有顯著性。乙醇濃度、溫度和料液比對蕎麥黃酮提取率的影響程度均不及超聲時間，且三者對蕎麥黃酮提取率的影響程度依次減弱。對乙醇濃度、料液比、超聲時間和超聲溫度四個因素的均值進行分析，得出最優的工藝組合為2323，即蕎麥粉用65%的乙醇溶液，以1∶45的料液比在環境溫度為60 ℃的水浴中超聲25 min，黃酮提取率最高。

表1 正交實驗結果

表2 方差分析表

2.2.2 最佳工藝條件驗證

在上述正交實驗獲得的最佳工藝條件下對蕎麥粉的黃酮進行提取實驗，通過計算得出蕎麥粉的黃酮得率為20.5 mg/g，該實驗結果優于上述正交實驗中的所有實驗，因此可確定通過正交實驗獲得的提取蕎麥粉黃酮的最優提取工藝條件是合理的。

3 結論

首先分析單個因素對蕎麥黃酮萃取率的結果影響，然后設計正交試驗的因素水平方案。通過正交試驗的結果分析，最終確定最佳的蕎麥黃酮提取工藝條件為：乙醇濃度65%，超聲溫度60 ℃，超聲時間25 min，料液比為1∶45。

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Study on the Optimum Ultrasonic Extraction Process of Flavonoids Compounds in Buckwheat Powder

（Yulin University, Shaanxi Yulin 719000, China）

Using orthogonal test of four factors and three levels, the optimum ultrasonic extraction process conditions of flavonoids compounds in buckwheat powder were obtained as follows: the ethanol concentration 65%, the rate of liquid to material 1:45, the ultrasonic temperature 60℃, and the ultrasonic time 25 min. Under the optimum ultrasonic extraction process conditions, the highest yield of flavonoids compounds can reach to 20.5 mg/g.

Buckwheat; Favone; Ultrasonic extraction

TQ 028

A

1671-0460（2017）08-1524-03

陜西省科技計劃項目，項目號：2011KW-27。

2017-01-10

張國濤（1982-），男，陜西榆林市人，講師，碩士，2009年畢業于深圳大學材料化學專業，研究方向：從事天然產物活性成分研究。E-mail：99452715@qq.com。