尿液培養念珠菌的菌群分布與藥敏分析

答 嶸，吳友偉，石 紅，劉萬靜，王 偉

(西安交通大學第一附屬醫院：1.檢驗科；2.神經外科，西安 710061)

·經驗交流·

尿液培養念珠菌的菌群分布與藥敏分析

答 嶸1，吳友偉1，石 紅1，劉萬靜1，王 偉2△

(西安交通大學第一附屬醫院：1.檢驗科；2.神經外科，西安 710061)

目的 通過分析尿液培養中念珠菌菌群分布與藥敏試驗結果，探討泌尿系念珠菌感染的臨床特點。方法 回顧性分析該院2012年11月至2016年3月臨床患者尿液培養為念珠菌的實驗室資料，采用WHONET5.6軟件進行數據統計分析。結果 共包含非重復分離菌株286株，其中白色念珠菌為120株(41.96%)，光滑念珠菌74株(25.87%)，熱帶念珠菌72株(25.17%)，以及近平滑念珠菌11株(3.85%)。最常見于重癥監護病房患者，共60株(20.98%)。白色念珠菌與光滑念珠菌多見于女性。近平滑念珠菌對氟康唑敏感率為100.00%，白色念珠菌、光滑念珠菌、熱帶念珠菌均出現不同程度耐藥。結論 泌尿系念珠菌感染多見于重癥患者，白色念珠菌最常見，非白色念珠菌需引起重視。

尿液培養；念珠菌；菌群分布；藥敏試驗

泌尿系感染是臨床常見病癥，由于免疫受損患者不斷增加、廣譜抗生素的濫用、侵入性裝置或操作的增加，真菌所致的泌尿系統感染逐漸增多。在住院患者中，一旦存在微生物的定植，泌尿系統是最常發生感染的解剖結構。泌尿系感染雖然多由細菌感染引起，但是患者罹患真菌感染，或真菌雖未引起感染但是定植泌尿系統是臨床醫生面臨的一個棘手的問題。尿液培養是泌尿系感染病原學診斷的金標準，念珠菌在泌尿系真菌感染中最常見[1]。本研究回顧性分析本院尿液培養念珠菌生長的473份標本的病原學分布與藥敏分析結果，為預防與治療念珠菌泌尿系感染提供臨床依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究回顧性分析2012年11月至2016年3月本院臨床送檢尿液標本中分離培養念珠菌的種類與藥敏試驗結果。

1.2 方法

1.2.1 儀器與材料 微生物鑒定系統包括VITEK MS全自動快速質譜微生物檢測系統(法國生物梅里埃公司)，ATB鑒定藥敏系統(法國生物梅里埃公司)，API ID32C鑒定試劑盒，ATBFUNGUS 3藥敏試劑盒。培養基包括血瓊脂平板(法國生物梅里埃公司)，麥康凱平板(法國生物梅里埃公司)，沙保羅平板(法國生物梅里埃公司)。采用ATCC MYA2950光滑念珠菌進行、ATCC 64677光滑念珠菌、ATCC 6258克柔念珠菌進行質量控制。

1.2.2 標本采集與處理 臨床無菌采集尿液標本立即送檢至檢驗科。條碼掃描后，在生物安全柜中定量接種至培養基，37℃培養箱孵育。經過5 d培養后無真菌生長，此標本即為陰性。

1.2.3 病原菌鑒定和藥敏試驗 生長的陽性菌落按照操作規程用全自動快速質譜微生物檢測系統或API ID32C鑒定試劑盒進行鑒定，ATBFUNGUS 3藥敏試劑盒檢測其對抗真菌藥的敏感性。

1.3 統計學處理 采用世界衛生組織細菌耐藥性監測網提供的WHONET5.6軟件進行數據統計分析。

2 結 果

2.1 菌種分布 本研究共包括分離株473株，其中非重復分離株為286株。白色念珠菌最多，為120株(41.96%)，其次為光滑念珠菌74株(25.87%)、熱帶念珠菌72株(25.17%)、近平滑念珠菌11株(3.85%)、克柔念珠菌3株(1.05%)、鏈狀念珠菌2株(0.70%)、釀酒酵母2株(0.70%)、杜氏念珠菌1株(0.35%)、中間念珠菌1株(0.35%)。

2.2 科室分布 尿液培養念珠菌陽性標本患者最常見于重癥監護病房60株(20.98%)，其次為神經內科35株(12.24%)、腎內科26株(9.09%)、呼吸內科22株(7.69%)、干部病房21株(7.34%)、感染性疾病科19株(6.64%)、神經外科19株(6.64%)、泌尿外科18株(6.29%)、內分泌科14株(4.90%)、肝膽外科11株(3.85%)，其他41株(14.39%)。

2.3 年齡分布 白色念珠菌在各個年齡組均最常見，20～60歲年齡組中所占比例低于常見念珠菌的40.00%，而非白色念珠菌占60.00%以上(表1)。

表1 尿液培養常見念珠菌在不同年齡患者分布比例(%)

2.4 性別分布 白色念珠菌(女56.70%，男43.30%)與光滑念珠菌(女77.00%，男23.00%)多見于女性，熱帶念珠菌(女47.20%，男52.70%)與近平滑念珠菌(女9.10%，男90.90%)多見于男性。

2.5 藥敏試驗結果分析 尿液培養念珠菌陽性標本氟康唑藥敏試驗結果按照NCCLS M27-A 1997折點，MIC ≤8 μg/mL為敏感(S)，MIC 16～32 μg/mL為劑量依賴型敏感(SDD)，MIC≥64 μg/mL為耐藥(R)。見表2。

表2 尿液培養念珠菌氟康唑藥敏試驗結果(%)

3 討 論

泌尿系感染在世界范圍內廣泛存在，主要是由于微生物侵入到泌尿系統各器官引起。近年來，念珠菌引起的泌尿系感染明顯增多[2]。Borst等[3]報道荷蘭流行率為24%，Kobayashi等[4]報道巴西流行率為22.00%。國內報道為15.87%～30.10%[5-6]，而且分離率逐年升高[7]。尿液培養是泌尿系統感染診斷的金標準，但是尿液中即使有真菌生長也需排除污染，膀胱內留置導尿管相關的膀胱定植，原發感染或播散性真菌病[8]。本研究對本院2012年11月至2016年3月的尿液培養真菌陽性的標本進行回顧性分析，其中共包括分離株473株，而非重復分離株僅286株，提示真菌所致泌尿系統感染患者臨床多次送檢尿液培養均為陽性且培養結果一致。真菌泌尿系感染最常由念珠菌引起[1]。本研究中尿液培養的所有真菌均為念珠菌，其中白色念珠菌為120株，達到全部非重復分離株的41.96%。光滑念珠菌為74株(25.87%)，熱帶念珠菌為72株(25.17%)，近平滑念珠菌11株(3.85%)。一項研究表明白色念珠菌為44.00%，光滑念珠菌為28.00%，熱帶念珠菌為17.00%，克柔念珠菌為5.50%[9]。Achkar等[10]在美國10家醫學中心進行的另一項研究發現白色念珠菌是所有念珠菌中最常見的，可以達到52.00%，光滑念珠菌為16.00%，熱帶念珠菌為8.00%。邵峰等[11]研究發現泌尿系感染真菌中，白色念珠菌為50.40%，熱帶假絲酵母菌為16.20%，克柔念珠菌為6.30%，光滑念珠菌為5.40%。本研究結果與上述研究結果相似，提示白色念珠菌在真菌所致泌尿系統感染中為主要病原菌。所有已知的念珠菌種都能夠引起泌尿系統感染，白色念珠菌是最常見的菌種。但是在世界許多地方，非白色念珠菌已成為泌尿系統感染主要菌種,成為臨床感染新的威脅[12-13]。本研究顯示非白色念珠菌為166株，占非重復分離株的58.04%，提示非白色念珠菌在泌尿系統感染中不容忽視。

念珠菌已逐漸成為住院患者泌尿系統感染的主要病因，尤其是重癥患者[1]。本研究結果顯示尿液培養念珠菌陽性的患者中前10位科室中涵蓋各個內、外科，其中重癥監護病房的患者所占比例最高，有60例，為20.98%。可能與其患者多為臥床患者，長期留置導尿的患者較多，加之長期臥床患者發生墜積性肺炎概率增高，長期使用抗生素，導致菌群失調有關。本研究數據表明各個年齡分組中，白色念珠菌均為最常見的念珠菌，在20～60歲年齡組中所占比例低于常見念珠菌總數的40.00%，而非白念珠菌占60.00%以上，提示非白色念珠菌在青壯年泌尿系統感染中具有重要意義。本研究數據顯示白色念珠菌與光滑念珠菌多見于女性，而男性則常見熱帶念珠菌與近平滑念珠菌。

氟康唑是目前臨床應用最為廣泛的抗真菌藥，能夠明顯促進泌尿系中念珠菌的清除。其耐藥率處于波動狀態，且在不同酵母菌耐藥率不同[14]。本研究對主要的4中念珠菌藥敏試驗結果進行了分析，除近平滑念珠菌各非重復分離株均對氟康唑均敏感外，白色念珠菌、光滑念珠菌、熱帶念珠菌均出現不同程度的耐藥，尤其是熱帶念珠菌，氟康唑非敏感率超過20%。數據顯示光滑念珠菌與熱帶念珠菌對氟康唑敏感率較白色念珠菌低，提示臨床應用氟康唑治療的選擇壓力會促進非白色念珠菌的增加。因此，早期快速的病原學診斷對于臨床合理使用氟康唑具有重要指導意義。

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國家自然科學基金資助項目(81000767)；西安交通大學第一附屬醫院基金資助項目(2014YK30)。

答嶸(1975-)，副主任技師，博士，主要從事臨床微生物學的研究。

△通信作者，E-mail：wei_wangdoc@163.com。

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.24.023

R446.5

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1671-8348(2017)24-3390-02

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