高慧新 包道健 田 慧
廣西中醫藥大學,廣西 南寧 530200
廣山藥總DNA提取方法的比較
高慧新 包道健 田 慧*
廣西中醫藥大學,廣西 南寧 530200
目的:建立一種穩定高效獲得廣山藥總DNA基因組的提取方法,為同科屬及同類植物總DNA提取提供參考依據,便于應用分子生物學進行鑒定。方法:通過采用試劑盒法、改良CTAB法和SDS法對廣山藥的新鮮葉子、新鮮塊莖、干燥塊莖和新鮮嫩莖進行DNA提取,在進行瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度法進行純度檢測。結果:3種方法均可以從不同的提取部位中提取到基因組DNA,但通過天根新型植物DNA提取試劑盒提取到的DNA純度最高,CTAB法次之,SDS法最差。結論:利用市售總DNA提取試劑盒提取DNA,方法簡便高效,所提DNA效果好。
廣山藥;DNA提取;試劑盒;CTAB;SDS
廣山藥來源于薯蕷科薯蕷屬植物褐苞薯蕷DioscoreapersimilisPrain et Burkill[1],又名廣西淮山,野生于海拔100~1950m的山坡、路旁、山谷雜木或灌叢中。我國南方各地也均有栽培,主產于廣西桂平、玉林、靈山、陸川、平南等[2]。褐苞薯蕷以根莖入藥,中醫用其補脾養胃、生津益肺、補腎澀精;壯醫用其“調谷道”氣道水道,補肺腎[1]。褐苞薯蕷在廣西、福建、海南等地被作為藥用與食用的山藥習用品由來已久[3]。褐苞薯蕷是重要的藥用植物資源,近年來,其以產量大、適應力強等優點,占據了藥材和食品市場的重要部分,充分說明了對其研究的必要性。
DNA分子標記技術是近年來應用在中草藥研究中的新技術,為中草藥基因圖譜建立、遺傳多樣性評估、分子標記輔助育種等研究提供了有價值的工具[4]。……