油茶粕中黃酮化合物的分離鑒定及抗氧化性研究

高進勇,高永平,余炎炎,李 歡,盧志萍,卜付軍,班龍海

(1.信陽學院 理工學院,河南信陽 464000;2.信陽市林業科學研究所,河南信陽 464031;3.河南省國有泌陽馬道林場,河南泌陽 463721)

油茶粕中黃酮化合物的分離鑒定及抗氧化性研究

高進勇1,高永平1,余炎炎1,李 歡1,盧志萍1,卜付軍2,班龍海3

(1.信陽學院 理工學院,河南信陽 464000;2.信陽市林業科學研究所,河南信陽 464031;3.河南省國有泌陽馬道林場,河南泌陽 463721)

為了探索油茶粕中黃酮化合物的分子組成及其抗氧化活性,本研究運用優化的分離純化方法對油茶粕中黃酮進行粗提和HZ816大孔吸附樹脂富集純化,然后再經硅膠柱對其黃酮化合物層析,得到2種黃酮化合物,分別記為化合物Ⅰ和化合物Ⅱ。隨后利用核磁共振、質譜、紅外和紫外光譜對上述分離得到的2種黃酮化合物進行結構鑒定。結果表明:這2種物質分別為山奈酚3-O-[2-O-β-D-木糖-6-O-α-L-鼠李糖]-β-D-葡萄糖苷(化合物Ⅰ)和山奈酚3-O-[2-O-β-D-半乳糖-6-O-α-L-鼠李糖]-β-D-葡萄糖苷(化合物Ⅱ)。對分離的黃酮化合物采用 1,1-二苯基-3-硝基苯肼自由基清除法(DPPH法)、鄰苯三酚自氧化法在體外進行抗氧化實驗,結果顯示總黃酮、化合物Ⅰ和化合物Ⅱ清除DPPH自由基半抑制濃度(IC50)分別為0.44、1.88、2.41 mg/mL,清除超氧陰離子IC50分別為1.38、1.13、1.29 mg/mL。

油茶粕,黃酮苷,分離純化,結構,抗氧化

黃酮類化合物是一類生物活性很強的物質[1]。大量研究表明,黃酮類物質具有抗菌、抗病毒、抗發炎、抗過敏以及血管舒張作用[2-4];此外,它還能抑制脂質過氧化作用(LPO)、多種酶的活性、血小板凝聚、毛細管滲透性以及脆性;黃酮的此類效果大都與它的抗氧化性相關[5]。油茶粕是油茶籽提取油脂之后的副產物,含有多種有效成分,其中0.6%～1.71%[6]為山奈酚、柚皮素及其衍生物等黃酮類生物活性物質[7-9]。研究者們對茶餅粕中的這些活性成分進行分析分離研究,并運用于飼料開發等方面,但由于其分離提純等方法的低效性,其利用層次依然較低。

從油茶粕中提取分離純化黃酮類化合物的常規方法是溶劑提取、熱回流提取、超聲波輔助提取和微波輔助提取[10]。對于油茶粕黃酮的分離純化多采用中壓柱層析法,制備型高效液相色譜,高速逆流色譜分離純化等進行分離純化[11]。陳虹霞[12]等采用茶籽餅粕經過乙醇水溶液提取,浸膏采用甲醇溶解并冷凍后去除不溶物,通過中低壓色譜制備得到黃酮苷類化合物,再進一步通過高效液相制備得到黃酮苷化合物Ⅰ和Ⅱ;侯留鑫[13]采用醇提,提取液冷藏靜置12 h后過濾,經濃縮后進行大孔吸附樹脂純化,得茶葉籽黃酮。此后進行ODS柱分離,然后進行兩次Sephadex LH-20分離,用40%體積分數的甲醇洗脫,得到純度為98%的茶葉籽黃酮單體。這些提取純化方法步驟繁瑣且提取率較低,因此,為了改進簡化油茶粕中黃酮類化學成分的提取方法,本文利用大孔吸附樹脂、硅膠柱層析、結晶方法對油茶粕中的黃酮類化合物進行分離純化,采用高效液相、質譜、紅外光譜和核磁共振等方法對黃酮進行鑒定,并對提取純化的黃酮進行體外抗氧化分析研究,以期得到更高的分離提取率,并為提高其醫藥方面的應用范圍,提高油茶的綜合開發利用價值提供技術支撐。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

油茶粕 河南綠達山茶油股份有限公司提供;黃酮標準品 信陽市食品藥品監督管理局提供;大孔吸附樹脂HZ816 鄭州華溢科技新材料有限公司;柱層析硅膠 200～300目 青島海洋化工有限公司;提取過程中:水 超純水,乙醇 食用級;液相色譜試劑:甲醇 色譜純,天津康科德科技有限公司;乙酸乙酯、甲醇,乙醇等均為分析純,天津博迪化工股份有限公司。

高效液相色譜儀 島津公司;依利特C18(Φ4.6 mm×200 mm,4 μm)色譜柱 大連依利特有限公司;低壓玻璃層析柱(Φ1.0 cm×40 cm,Φ1.0 cm×50 cm) 上海滬西分析儀器有限公司;X-4顯微熔點測定儀 上海精密科學儀器有限公司;傅里葉紅外光譜 美國PE公司;LC-MS液質聯用儀 日本島津公司;核磁共振儀,400 MHz 德國Braker公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 油茶粕黃酮的薄層色譜法(TLC)定性分析 將硅膠H預制板(10 cm×10 cm,0.2 mm)置于110 ℃烘箱中活化1 h,取出后點樣5 μL,以乙酸乙酯:甲醇:水(100∶35∶10,v/v)為展開劑,展開距離8 cm,將硅膠板在碘缸中進行顯色,計算其Rf值,計算公式為:Rf=薄層色譜法中原點到斑點中心的距離與原點到溶劑前沿的距離的比值。

1.2.2 油茶粕黃酮高效液相色譜法(HPLC)測定 按照色譜柱為依利特C18色譜條件,在5 min內流動相甲醇濃度從20%上升到45%,然后45%甲醇濃度保持10 min;柱溫條件為30 ℃,流速為1.0 mL/min,進樣量10 μL,檢測波長266 nm;以黃酮標準品為參照。

標準曲線制作:精密稱取黃酮標準品5 mg,用甲醇溶解后定容至100 mL,配制濃度為2、4、6、8、10 μg/mL。進樣至HPLC檢測,以濃度(X)為橫坐標,峰面積(Y)為縱坐標制作黃酮的標準曲線,黃酮的回歸方程為:Y=2.26×106X+1731(R2=0.9996)。測定樣品時采用歸一化法計算樣品中黃酮含量。

黃酮得率(%)=樣品濃度×稀釋倍數×提取總體積/油茶粕干重×100

樣品純度(%)=樣品濃度×稀釋倍數×體積/樣品干重×100

1.2.3 油茶粕總黃酮的提取及分離 準確稱量100.0 g油茶粕,用10倍量95%乙醇60 ℃加熱提取2次,每次2 h,提取液減壓回收乙醇至無醇味,加適量超純水,配制成一定濃度的油茶粕黃酮粗提液。應用1.0 cm×40 cm的凝膠層析柱對油茶粕粗提物經HZ816大孔吸附樹脂進行初步的分離純化,動態吸附工藝條件(以5.0 mg/mL黃酮,流速1.0 BV(床層體積)/h,上柱量10.5 BV)和動態洗脫條件(體積分數為30%乙醇洗脫油茶粕總黃酮,洗脫流速1.0 BV/h,洗脫液體積4 BV)。收集30%洗脫液濃縮凍干得到油茶粕總黃酮。

1.2.4 硅膠柱層析純化油茶粕黃酮 精確稱取經大孔吸附樹脂純化后的總黃酮凍干品1.0 g,加入少量甲醇溶解進行硅膠柱層析,以硅膠(200～300目)濕法裝柱分離純化。層析基本條件:上樣量1/45(g樣品/g硅膠),以乙酸乙酯:甲醇:水(200∶35∶10,v/v)為洗脫液,以 0.8 BV/h的流速洗脫、分部收集洗脫劑。以TLC定性分析,按照方法1.2.1進行TLC法檢測洗脫液,合并Rf值相同的洗脫液,得到2個黃酮組分:化合物Ⅰ和化合物Ⅱ。化合物Ⅱ直接由洗脫液經甲醇結晶得到。化合物Ⅰ需重復一次硅膠柱層析,收集洗脫液經甲醇結晶得到。

1.2.5 水解反應 稱取化合物Ⅰ和化合物Ⅱ各200 mg,加入10 mol/L的鹽酸溶液10 mL,水浴加熱4 h,過濾,得苷元(沉淀)和糖(溶液)。沉淀經TLC(展開劑為氯仿∶甲醇∶水=12∶1∶0.3),母液用NaOH調至中性,過濾,經TLC(展開劑為正丁醇∶丙酮∶水=4∶5∶1),用茴香醛-硫酸噴霧顯色。

區塊鏈技術的應用對于信用風險防范有利也有弊，優勢具體表現在區塊鏈技術共識機制的去中心化特性更能靈活應對網絡攻擊，黑客的一次成功攻擊必須篡改區塊鏈中51%以上的節點數據，區塊鏈中的節點越多數據越難篡改。缺點在于城市商業銀行作為地方法人銀行機構，市場把控能力相對全國性商業銀行而言較弱，故而形成的銀行聯盟較小，需慎重設立節點銀行白名單制。如在區塊鏈票鏈業務中制定銀行承兌匯票承兌人白名單制度，初步圈定可信任節點銀行。如針對城市商業銀行主要信貸服務對象為中小企業，其普遍具有規模小、財務管理制度不規范、經營狀態相對不穩定的特點，區塊鏈技術的分布式記賬方式可清晰跟蹤企業的每一交易，實現有效監督。

1.2.6 利用紅外、質譜以及核磁共振鑒定油茶粕黃酮的結構 根據薄層色譜(TLC)以及 HPLC 結果的初步推斷,進行初步鑒定。再用核磁共振、質譜、紅外進行結構鑒定。

紅外光譜分析:波數測量范圍為400～4000 cm-1,光譜分辨率為4 cm-1,信號掃描累加16次。實驗時,分別取化合物Ⅰ和化合物Ⅱ少許,加入200倍量的溴化鉀,在瑪瑙乳缽中混合均勻,研磨,將混合粉末轉移到模具中,在壓片機上壓片,放入樣品室,分別測定各自紅外吸收光譜圖。

質譜測定條件:樣品注射流速:240 μL/min;霧化氣流速:7.0 L/min;霧化壓力,34.5 kPa;霧化溫度:350 ℃;毛細管電壓為3.5 kv,掃描范圍:m/z 100～1500。

核磁共振分析:溶劑DMSO-d6,內標為四甲基硅烷(TMS),測定溫度 303 K。氫譜測定頻率為400 MHz,碳譜測定頻率為125 MHz。

1.2.7 油茶粕黃酮體外抗氧化能力實驗 以最優工藝制備的油茶粕黃酮(油茶粕總黃酮、化合物Ⅰ和化合物Ⅱ)為原料進行體外抗氧化活性實驗。分別配制質量濃度為0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL的油茶粕黃酮,采用DPPH法測定DPPH自由基清除率[14]。分別配制質量濃度為0.5、0.75、1.0、1.25、1.5、1.75、2.0 mg/mL的油茶粕黃酮,采用鄰苯三酚自氧化法測定超氧陰離子清除率[15]。將油茶粕黃酮的質量濃度對DPPH自由基、超氧陰離子的清除率作圖并進行線性擬合,根據擬合的線性方程,當清除率為50%時所對應油茶粕黃酮的質量濃度即IC50,以IC50值作為評價油茶粕黃酮的抗氧化能力指標。

1.3 數據處理與分析方法

采用DPS軟件、Origin8.0、Excel 2010進行實驗數據處理、分析及繪圖。

2 結果與分析

2.1 分離純化

本實驗所用的油茶粕中黃酮總含量為2.2 g/100 g茶粕,總黃酮提取量為1.9 g/100 g茶粕,油茶粕總黃酮得率為1.9%,經HZ816大孔吸附樹脂及硅膠柱層析富集純化后,其中化合物Ⅰ得率為0.87%,化合物Ⅱ得率為0.95%,按此條件制備的總黃酮純度為85.2%。按照方法1.2.4得到2個黃酮組分:化合物Ⅰ和化合物Ⅱ,其Rf值分別為0.59(化合物Ⅰ)與0.38(化合物Ⅱ),經測定純度分別達89.3%和92.5%,化合物Ⅱ在甲醇中結晶純度達到98.4%。化合物Ⅰ經重復一次硅膠柱層析,經甲醇結晶,純度達到95.3%。

圖1 總黃酮樣品HPLC圖譜Fig.1 HPLC spectra of total flavonoids

圖2 化合物ⅠHPLC圖譜Fig.2 HPLC spectra of compoundⅠ

圖3 化合物ⅡHPLC圖譜Fig.3 HPLC spectra of compoundⅡ

圖4 化合物Ⅰ的紅外光譜圖Fig.4 FT-IR spectrum of compoundⅠ

2.2 黃酮單體的結構鑒定

由圖4可知,3400.19 cm-1處吸收峰為黃酮分子中-OH的伸縮振動峰,2971.01 cm-1為苯環上C-H伸縮振動峰,1656.18cm-1處吸收峰為C-O的伸縮振動,1608.53,1505.20和1450.22 cm-1為苯環骨架伸縮振動信號,1359.77,1280.28,1209.19,1177.48,1066.52 cm-1處的吸收峰為C-O的伸縮振動峰,837.99 cm-1處的吸收峰為=C-H的面外變形振動峰,與文獻報道一致[12,16-17]。

由圖5質譜圖譜給出ESI-MS分子離子峰m/z:765.3 [M+K],749.3 [M+Na],725.3 [M-H],以上數據與文獻對照[6,10,12]一致,確定化合物Ⅰ的分子量為726。

圖5 化合物Ⅰ的質譜圖Fig.5 ESI-MS spectrum of compoundⅠ

1H-NMR圖譜在低場區出現了三個活潑酚羥基質子信號δ12.647(1 H,s);δ10.812(1 H,s),δ10.172(1 H,s),分別歸屬為5-OH,7-OH,4′-OH。1H-NMR還顯示δ8.03和δ6.88(各2H,d,J=7.2Hz),分別歸屬于B環的2′、6′與3′、5′信號,δ6.19和δ6.4(d,1H,J=1.8 Hz)分別歸屬與A環的H-6和H-8。13C-NMR譜給出了30個碳信號,δ115.61和δ131.42的峰均比其他峰高,顯示這兩個峰分別可能是兩個位移相同的C信號疊加而得到的,所以推測化合物Ⅰ有32個碳。其中有3個位移為δ100左右的碳信號,提示化合物可能含有兩個六碳糖和一個五碳糖,苷元為15個碳信號。δ115.61和δ131.42這兩個峰的C信號歸屬于B環的C-3′、5′和C-2′、6′。δ177.84為典型的羰基C-4信號。δ164.39,161.69,160.32,156.83,156.33,131.42,121.36,104.37,99.09和94.09分別歸屬于C-7,C-5,C-4′,C-9,C-3,C-2,C-1′,C-10,C-6,C-8信號。綜上所述,苷元的化學位移值及特征與文獻報導[12]山奈酚基本一致,只是C-2向低場位移了10.1 ppm,C-3和C-4向高場移動了3.25 ppm和1.3 ppm,由此可見山奈酚C-3位-OH可能與糖相連,且木糖等的苷化使C-2信號移動約10 ppm[18-19]。13C-NMR給出了δ98.60,100.86和104.86三個糖的端基C原子信號。1H-NMR給出了三個端基糖質子信號δ5.57,5.20和4.58。化合物Ⅰ經鹽酸水解后用薄層色譜法檢測有鼠李糖,葡萄糖。未檢出木糖,可能水解不完全,但根據ESI-MS給出的分子量顯示另外一個糖應為五碳糖-木糖。δ104.86,74.22,76.52,70.75,66.11分別歸屬于木糖的C-6,C-5,C-4,C-3,C-2,C-1;δ100.86,69.96,71.02,68.64,72.61,65.38分別歸屬鼠李糖的C-6,C-5,C-4,C-3,C-2,C-1;δ98.60,82.05,77.15,69.85,76.21,65.38分別歸屬葡萄糖的C-6,C-5,C-4,C-3,C-2,C-1。綜合以上結果顯示,13C-NMR和1H-NMR數值與文獻對照[12,20-22],認為化合物Ⅰ結構為:山奈酚3-O-[2-O-β-D-木糖-6-O-α-L-鼠李糖]-β-D-葡萄糖苷。

由圖6可知,3386.05 cm-1處有強吸收為黃酮分子中-OH的伸縮振動峰,2926.40 cm-1為苯環上C-H振動,1661.55 cm-1處吸收峰為C-O伸縮振動,1609.88 cm-1,1499.02 cm-1和1449.65 cm-1為苯環骨架伸縮振動信號,與文獻報道[6,10,12]黃酮的特征吸收一致。

圖6 化合物Ⅱ紅外光譜圖Fig.6 FT-IR spectrum of compoundⅡ

圖7質譜圖譜給出ESI-MS的準分子離子峰m/z:795.3 [M+K],779.3 [M+Na]和755.3 [M-H],確定化合物Ⅱ的分子量為756。

圖7 化合物Ⅱ質譜圖Fig.7 ESI-MS spectrum of compoundⅡ

1H-NMR(TMS,DMSO-d6,400 MHz)圖譜低場區出現了三個活潑酚羥基質子信號δ12.639(1H,s),δ10.796(1H,s),δ12.639(1H,s),分別歸屬為5-OH,7-OH,4′-OH。這些信號在向樣品中加重水(D2O)后即消失。1H-NMR還顯示δ8.0和δ6.9(各2H,d,J=7.2Hz),分別歸屬于B環的2′、6′與3′、5′信號,δ6.19和δ6.4(d,1H,J=1.8 Hz)分別歸屬與A環的H-6和H-8。13C-NMR(TMS,DMSO-d6,400 MHz)譜給出了31個碳信號,δ115.08和δ131.05的峰均比其他峰高,顯示這兩個峰分別可能是兩個位移相同的C信號疊加而得到的,所以推測化合物Ⅰ有33個碳。其中有3個位移為δ100左右的碳信號,提示化合物可能含有三個六碳糖,苷元為15個碳信號。δ115.08 ppm和δ131.05這兩個峰的C信號歸屬于B環的C-3′、5′和C-2′、6′。δ177.68為典型的羰基C-4信號。δ162.84,159.85,158.47,156.16,133.31,157.90,121.43,102.09,98.72,和99.85分別歸屬于C-7,C-5,C-4′,C-9,C-3,C-2,C-1′,C-10,C-6,C-8信號。綜上所述,苷元的化學位移值及特征與文獻[12]山奈酚基本一致,只是C-2向低場位移了11 ppm,C-3和C-4向高場移動了3.29 ppm和1.18 ppm,由此可見山奈酚C-3位-OH可能與糖相連。化合物Ⅱ經鹽酸水解后經薄層色譜法檢測有半乳糖、鼠李糖和葡萄糖。綜合質譜,紅外及其核磁共振顯示及文獻值[16，20-23]認為化合物Ⅱ結構為:山奈酚3-O-[2-O-β-D-半乳糖-6-O-α-L-鼠李糖]-β-D-葡萄糖苷。

2.3 體外抗氧化能力

運用兩種檢測方法對油茶粕總黃酮,化合物Ⅰ和化合物Ⅱ進行DPPH自由基和超氧陰離子清除測定,結果表明其三種物質均具有較好清除效果,且濃度在0.05～1.0 mg/mL存在劑量效應關系。在DPPH清除實驗中可以看出,在一定的濃度劑量下,油茶粕中的總黃酮和分離到的化合物Ⅰ和化合物Ⅱ均表現出良好的清除DPPH自由基的能力,但清除能力低于VC。油茶粕總黃酮在濃度為0.53 mg/mL時,對DPPH自由基的清除率達到了50%以上,清除率明顯高于化合物Ⅰ和化合物Ⅱ,考慮油茶粕中還含有其他種類的黃酮,有待進一步分離。總黃酮、化合物Ⅰ和化合物Ⅱ清除DPPH自由基IC50分別為0.44、1.88、2.41 mg/mL。在對超氧陰離子清除實驗中三者均具有很強的清除能力,且三者清除率相當。該結果表明油茶粕黃酮具有很強的抗氧化活性。總黃酮、化合物Ⅰ和化合物Ⅱ清除超氧陰離子自由基IC50分別為1.38、1.13、1.29 mg/mL，與DPPH自由基清除結果不同，可能與不同的評價方法機理不同有關。實驗結果顯示油茶粕黃酮具有很大的開發價值,今后可應用于抗氧化食品配料的開發。

圖8 油茶粕黃酮的DPPH·清除率Fig.8 DPPH free radical scavenging rate of total flavonoids,compounds Ⅰ and Ⅱ

圖9 油茶粕黃酮的超氧陰離子清除率Fig.9 Superoxide anionfree radical scavenging rate of total flavonoids,compounds Ⅰ and Ⅱ

3 結論與討論

油茶粕中含有豐富的黃酮類化合物,但油茶粕黃酮單體的制備報道較少。陳虹霞[12]等采用茶籽餅粕經過乙醇水溶液提取,浸膏采用甲醇溶解并冷凍后去除不溶物,通過中低壓色譜制備得到黃酮苷類化合物,再進一步通過高效液相制備得到黃酮苷化合物Ⅰ和Ⅱ;王成章[24]等的專利公開了一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法,其采用乙醇提取中壓柱層析加高效液相色譜制備得到純度95%以上的黃酮苷單體兩個。本實驗通過研究油茶粕黃酮化合物的醇提及大孔吸附樹脂富集,硅膠柱層析分離純化,得到化合物Ⅰ和化合物Ⅱ單體。采用紅外,質譜,核磁共振手段對化合物Ⅰ和化合物Ⅱ進行結構鑒定,這2種物質分別為山奈酚3-O-[2-O-β-D-木糖-6-O-α-L-鼠李糖]-β-D-葡萄糖苷(化合物Ⅰ)和山奈酚3-O-[2-O-β-D-半乳糖-6-O-α-L-鼠李糖]-β-D-葡萄糖苷(化合物Ⅱ)。本實驗不需要大型精密設備,操作簡單,能有效的對油茶粕中活性成分黃酮化合物進行分離,有望為進一步放大實驗和工業化生產提供了重要依據。

李利敏等[25]采用 HPLC 法分析測定了不同品種油茶蒲提取物多酚類物質組成,發現不同品種之間酚類物質組成差別比較大。本實驗初步發現油茶粕黃酮對DPPH自由基和超氧陰離子自由基均有較強的清除能力,總黃酮、化合物Ⅰ和化合物Ⅱ清除DPPH自由基IC50分別為0.44、1.88、2.41 mg/mL,清除超氧陰離子自由基IC50分別為1.38、1.13、1.29 mg/mL。實驗結果期望為其構效關系的研究奠定基礎;為油茶粕黃酮在食品和藥品領域的開發提供參考依據。

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Extraction,antioxidant activity of flavonoids from oil-tea camellia seed cake

GAO Jin-yong1,GAO Yong-ping1,YU Yan-yan1,LI Huan1,LU Zhi-ping1,BU Fu-jun2,BAN Long-hai3

(1.Xinyang University,School of Science and Technology,Henan,Xinyang 464000,China；2.Xinyang Forestry Science Research Institute,Henan,Xinyang 464031,China；3. Madao Forestry Farm of Henan Province,Biyang 463721,China)

To explore the molecular composition and antioxidant activity of flavonoids in oil-tea camellia seed cake,the optimized extraction and purification method was used to purify the flavonoids in the seed cake and the HZ816 macroporous adsorption resin was used for the enrichment and purification,then the silica gel column was used to chromatograph the flavonoid compounds and two flavonoid compounds were obtained,which were designated as compounds Ⅰ and Ⅱ. The two flavonoid compounds were identified by nuclear magnetic resonance,mass spectrometry,infrared and ultraviolet spectroscopy. The results revealed that:the two substances were kaempferol 3-O-[2-O-β-D-xylopyranosyl-6-O-α-L-rhamnopyranosyl]-β-D-glucopyranoside(Ⅰ)and kaempferol 3-O-[2-O-β-D-galactopyranosyl-6-O-α-L-rhamnopyranosyl]-β-D-glucopyranoside(Ⅱ). The antioxidant test was carried out on the isolated flavonoid compounds using 1,1-diphenyl-3-nitrophenylhydrazine radical scavenging(DPPH method)and pyrogallol autoxidationinvitro. The results showed that the IC50of DPPH free radicals of the total flavonoids,compound I and compound II was 0.44,1.88,2.41 mg/mL respectively,and the IC50of superoxide anion free radicals was 1.38,1.13,1.29 mg/mL respectively.

oil-tea camellia seed cake;flavonoids;extraction;structure;antioxidant activity

2016-12-27

高進勇(1984-)，女，碩士，講師，主要從事生物制藥研究,E-mail:jygao0019@163.com。

十一五國家科技支撐項目(2009BADB1B010209);河南省高等學校重點科研項目(15A180060);大學生創新創業訓練計劃項目(CX20170074)。

TS201.1

A

1002-0306(2017)15-0035-06

10.13386/j.issn1002-0306.2017.15.008