豬瘟感染病例的診斷與防控

彭 濤 ，古金元，胡東方，陳同煜，王玉超，劉思當＊

(山東農業大學動物科技學院，山東 泰安 271000）

豬瘟感染病例的診斷與防控

彭 濤 ，古金元，胡東方，陳同煜，王玉超，劉思當＊

(山東農業大學動物科技學院，山東 泰安 271000）

豬瘟仍是嚴重危害我國乃至全球養豬業最嚴重的傳染病之一，給養豬業造成了嚴重的經濟損失。通過對一小型規模化豬場豬瘟臨床病例的現場調查，剖檢診斷、病理組織觀察及病原學的檢測等進行綜合診斷，分析了疾病的發生原因，制定防控方案，使疫情迅速得到了控制。

豬瘟；流行病學調查；診斷；防控

豬瘟是由黃病毒科豬瘟病毒 ( classical sw ine fever virus ， CSFV )引起的一種豬的急性、發熱、接觸性傳染病和致死性病毒病，具有高度傳染性和致死性。在我國曾稱之為“爛腸瘟”，而歐洲稱之為“古典豬瘟”，這主要是為了區別非洲豬瘟[1]。根據臨床癥狀可將該傳染病分為急性、亞急性、慢性、非典型性和隱型豬瘟。2016年11月山東聊城市某豬場外購40 d左右保育豬1 000頭，進行育肥，購進豬只前被告知已經免疫過豬瘟、豬偽狂犬病、豬圓環病毒病疫苗，故購進后再未進行疫苗免疫。引進豬場15～20 d后，豬場陸續開始出現豬只死亡，未死亡發病豬只出現發燒、呼吸道癥狀，個別豬只消瘦，被毛雜亂，軀干末端呈紫紅色，豬場養殖人員懷疑豬群遭到豬瘟病毒感染，因此對發病情況比較嚴重的豬只進行了緊急接種，劑量為50頭份/頭，然而病豬情況沒有好轉。通過對發病豬剖檢診斷、病理組織學觀察及病原學檢測，最終診斷為豬瘟病毒感染。

1 材料與方法

1.1 材料

取發病豬場病死豬2頭，剖檢并采集病豬的淋巴結、脾、肺、腎、腸道等器官組織，一部分用磷酸鹽緩沖液（PBS）研磨提取病毒DNA/RNA進行病毒檢測；一部分置于10%福爾馬林溶液中固定，用于組織病理學檢查。

1.2 病理組織學觀察

將用福爾馬林固定好的組織，進行沖水、脫水、透明、石蠟包埋、切片等步驟做成組織切片，然后將組織切片用蘇木素-伊紅(HE)染色法進行染色，最后在光鏡下觀察組織病理學變化。

1.3 DNA/RNA提取

將凍存的淋巴結、脾、肺、腎、腸道等組織，各取豆粒大置于滅菌的勻漿器中，加入1 mL冰浴的滅菌PBS，研磨至組織液黏稠無明顯顆粒時，將勻漿物轉移至滅菌1．5 mL離心管中。而后置于-20 ℃冰箱中進行反復冷凍3次后，將勻漿液9 000 r/min離心3 min后將上清吸入新的滅菌離心管內備用。

病料中病毒DNA或RNA的提取采用北京全式金 Easy Pure Viral DNA/ RNA Extraction kit，操作過程嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.4 RT-PCR檢測

用提取的DNA/RNA，分別對豬瘟病毒、豬藍耳病毒、偽狂犬病病毒和豬圓環病毒進行RT-PCR/PCR擴增檢測。

2 結果

2.1 臨床表現

豬場內發病豬群精神沉郁，發熱，體溫在40～42 ℃之間，呈現稽留熱，喜臥、弓背、寒顫及行走搖晃；食欲減退或廢絕，有的發生嘔吐，初期便秘，后期腹瀉，糞便惡臭，帶有黏液或血液；結膜發炎，流膿性分泌物，鼻流膿性鼻液；病豬的耳后、腹部及四肢內側等出現針尖狀出血點，腹股溝淋巴結腫大，有的病豬極度消瘦。

2.2 剖檢變化

剖檢可見陰鞘積尿，包皮出血；下頜淋巴結腫脹、充血、出血，外表呈紫紅色，切面如大理石狀；膀胱積尿，脾臟淤血腫大，邊緣有暗紅色出血性梗死灶，腎臟散在分布陳舊性針尖大出血點，剖開結腸可見腸黏膜覆蓋假膜，剝離后可見結腸黏膜出血潰瘍，盲腸見隆起狀紐扣樣潰瘍，胃黏膜充血、出血，散在潰瘍灶，桃體出血散在壞死灶（圖1）。

圖1 病豬剖檢病變

2.3 組織病理學觀察

肺泡壁增厚，結締組織增生，毛細血管充血。腎小球充血、出血，腎間質出血，腎小管上皮細胞壞死脫落。腸絨毛上皮細胞壞死、脫落，黏膜固有層充血、炎性細胞浸潤（圖2）。

圖2 病豬組織病理學變化

2.4 RT-PCR診斷

采取下頜淋巴結、腸系膜淋巴結、腹股溝淋巴結、肺臟、脾臟、腎臟、大腦等組織研磨，用研磨液提取DNA/ RNA，利用RT-PCR/PCR方法，對豬瘟病毒、豬藍耳病毒、偽狂犬病病毒、豬圓環病毒2型進行檢測，檢測結果為豬瘟病毒陽性（圖3)。

圖3 凝膠電泳圖

3 討論

根據剖檢診斷、病理組織學觀察及病原學的檢測結果，最終確定該豬場為豬瘟感染。

一旦易感豬群發生了豬瘟，基本上沒有特效的藥物可以治療，將會造成非常嚴重的經濟損失，只有進行有效的疫苗接種，使機體產生較強的免疫力和對豬瘟病毒的抵抗力，才有抵御豬瘟病毒侵害的可能[2]。

首先，要制定一個科學合理的免疫程序。仔豬一般在30日齡和60日齡時，各接種1次疫苗，有些污染嚴重的豬場，可以進行超前免疫。種豬一般每年3次普免或跟胎免疫[3]。

第二，需要加強免疫監測。 免疫監測是減少豬瘟流行的重要方法，從免疫豬群中定期抽樣，檢測豬群抗體是否達到保護水平。豬場在生產實踐過程中，要根據自身情況，綜合發病季節、發病日齡、母源抗體水平等多方面因素，制定一個科學合理的免疫接種方案。疫苗免疫接種后，要加強豬群的抗體水平監測，不僅能了解豬群免疫的效果，有利于豬場合理科學的免疫，而且還能通過抗體水平，檢查疫苗免疫的效果，避免因各方面因素干擾出現豬瘟免疫失敗的情況[4]。

第三，同時要加強病原監測。 病原監測是疫病防治的重要基礎。目前豬瘟的發病特點和流行趨勢與之前相比發生了重大的改變，以點狀散發為主，非典型豬瘟病例較多，而典型發病病例較少，主要表現是免疫耐受、持續感染和隱性感染。因為點狀散發和死亡病例少，往往不能引起豬場的重視，造成對豬瘟防控的忽視，從而造成豬瘟疫情長期持續存在。加強豬瘟病原監測，既可及時了解豬瘟病毒的現實存在，增強對豬瘟的重視；又能隨時掌握流行毒株遺傳基因的變異，監控新毒株或變異株的出現，為相關機構提供科學的制定豬瘟防控決策的數據。

最后，豬場種豬群的凈化尤為重要。帶毒的隱性感染的母豬，可以通過胎盤垂直傳播到胎兒，或水平傳播豬瘟病毒。帶毒的隱性感染的種公豬也會傳播豬瘟病毒，既可水平傳播豬瘟，又可通過配種或精液傳播給母豬；并經母豬垂直感染仔豬，帶毒的仔豬又可以繼續水平傳播豬瘟，這是造成豬瘟病毒持續感染的重要原因，也是造成我國豬瘟長期持續存在，以及散發流行惡性循環的主要根源。所以引種時，必須要選擇無豬瘟流行的種豬場，經過隔離檢疫，及時淘汰感染種豬，在確保引進豬群安全健康的情況下，進行本場常規免疫后，方可轉入生產區進行飼養。豬場最好應堅持自繁自養的原則，最好是建立無特定病原體豬群。事實證明，采取科學合理的免疫程序、定期進行抗體的監測、定期進行病原的監測以及堅決淘汰感染種豬和無害化處理病死豬等綜合的防控措施，逐步凈化種豬群，實現無帶毒健康種群是目前我國控制豬瘟流行的一條有效途徑[5]。

[1] 殷震，劉景華．動物病毒學[M]． 2版．北京：科學出版社，1997：1197-1206．

[2] 涂長春．中國豬瘟流行病學現狀與防制研究[D]．北京： 中國農業大學，2004 ．

[3] 王琴．豬瘟流行現狀及中國豬瘟凈化策略[J]．中國豬業，2012 (10)：45-47．

[4] 韋顯凱，鄒聯斌，屈素潔，等．廣西部分地區豬群主要疫病免疫抗體監測和免疫效果分析[J]．中國畜牧獸醫，2010，37(1)：161-163．

[5] 蔡奕琪，朱燕秋，王銳彬．2001-2008年豬瘟抗體和豬瘟病毒監測結果分析[J]．養豬，2009(3)： 73-74．

2017-06-01）

本研究由國家重點研發計劃項目“豬重要疫病免疫防控新技術研究”子課題“規模化豬場科學合理的免疫程序的研究（2017YFD0500605）”支持。

彭濤（1995-），男，山東淄博人，碩士，主要從事動物臨床病理學研究.

*通訊作者簡介：劉思當，山東省農業大學教授，博士生導師.E-mail:liusidang@126.com