鐵皮石斛組培苗生根技術研究

郜李彬 曹征宇 顧韻莉 周亞輝 （上海市浦東新區農業技術推廣中心 201201）

鐵皮石斛組培苗生根技術研究

郜李彬 曹征宇 顧韻莉 周亞輝 （上海市浦東新區農業技術推廣中心 201201）

為加快鐵皮石斛的繁殖速度、降低其生產成本、實現鐵皮石斛的產業化生產，通過設計不同生根培養基配方和不同培養條件，進行了其生根試驗研究。結果表明，生根培養基配方對鐵皮石斛組培苗出根率的影響最大，其次為光照強度，但光照時間對出根率的影響不顯著。鐵皮石斛組培苗生根的最佳實驗室環境條件為光照強度為2 000 Lx，培養室溫度調控在（20±2）℃，最佳生根培養基為1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+香蕉汁100 mg/ L。

鐵皮石斛；生根培養；光照強度；光照時間；生根培養基；出根率

鐵皮石斛為蘭科多年生附生草本植物，屬國家二級保護的貴重瀕危藥材。由于受品種特性的影響，鐵皮石斛對生長環境條件的要求非常苛刻，且野生鐵皮石斛的自然繁殖能力極弱、生長緩慢，目前已禁止采摘。而通過植物組培技術，可有效加快鐵皮石斛的繁殖速度、降低生產成本、實現鐵皮石斛的產業化生產，其中提高鐵皮石斛組培苗的生根效率是實現其產業化生產的重點和難點。筆者以鐵皮石斛組培苗為試驗材料，通過設計不同生根培養基配方和不同培養條件進行其生根試驗研究，以期為鐵皮石斛產業化生產提供幫助。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗材料為增殖所得的鐵皮石斛組培苗。

1.2 生根試驗

在超凈工作臺上將鐵皮石斛組培苗進行切割，切去種苗殘葉、老葉和基部褐化老化組織，按照2葉1心的標準，把鐵皮石斛組培苗切割分離成高度為1.5 cm左右的單株，接入不同生根培養基中，每瓶接種1株，重復10次，放入培養室中在不同環境條件下進行生根培養，接種后45 d進行出根率觀察比較。

培養環境條件中，光照強度設計了1 000、2 000、4 000 Lx 3個梯度；光照時間設計了6、12、18 h/d 3個梯度；培養室溫度均調控在（20±2）℃；培養基配方為：（1）MS、（2）MS+NAA 0.1 mg/L、（3）MS+NAA 0.5 mg/L、（4）MS+NAA1.0 mg/L、（5）1/2MS、（6）1/2 MS+NAA 0.1 mg/L、（7）1/2 MS+NAA 0.5 mg/L、（8）1/2 MS+NAA 1.0 mg/L，各培養基中均添加香蕉汁100 mg/L、蔗糖3%和瓊脂0.6%，pH 5.6～5.8。合計216個處理。

2 結果與分析

經過45 d的生根培養，每個處理中隨機選取3瓶進行生根率的統計分析（因數據較多，僅羅列各因素的平均出根率），將統計所得的數據用SPSS17軟件進行多因素方差分析。

由表1、表3和表4可看出，在其他試驗條件不變的情況下，培養基配方（6）的鐵皮石斛組培苗平均出根率最高，達78%，顯著高于其他培養基配方；平均出根率位居第2的是培養基配方（2），平均出根率為33%；其次是培養基配方（3）、（7），平均出根率分別為30%、26%；其余培養基配方的平均出根率均低于20%，生根效果較差。在其他試驗條件不變的情況下，當光照強度為2 000 Lx時，鐵皮石斛組培苗的平均出根率最高，達44%，顯著高于光照強度為1 000、4 000 Lx。光照時間對鐵皮石斛組培苗的出根率影響不大，在光照時間為6、12、18 h/d時，平均出根率分別為29%、28%、22%。

表1 鐵皮石斛組培苗在不同因素下的平均出根率分析

表2 誤差方差等同性的 Levene 檢驗分析

檢驗零假設，即在所有組中因變量的誤差方差均相等。表2中Sig.值小于5%，說明試驗數據具有統計學意義。

表3 光照強度對平均出根率影響的顯著性分析

為研究不同環境條件因素對出根率的影響，用SPSS17進行主體間效應檢驗。由表5可知，光照強度和培養基配方的Sig.值均小于5%，說明出根率的變化由光照強度和培養基配方所決定，不同強度的光照和不同的生根培養基配方對鐵皮石斛組培苗的出根率影響顯著；而光照時間的Sig.值為0.495，大于5%，說明不同光照時間對鐵皮石斛組培苗出根率的影響作用不顯著。

表4 不同培養基配方對平均出根率影響的顯著性分析

表5 主體間效應的檢驗分析

3 結論與討論

試驗結果表明，對鐵皮石斛組培苗出根率影響最大的因素是生根培養基配方，光照強度對出根率也有一定影響，而光照時間對出根率的影響較小。因此，綜合上述試驗結果考慮，促使鐵皮石斛組培苗生根的最佳實驗室環境條件：光照強度為2 000 Lx、培養室溫度調控在（20±2）℃，最佳生根培養基為1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+香蕉汁100 mg/L。

2016-12-07