黃芪不同炮制品對脾虛小鼠胃腸功能的影響與多糖含量的相關性分析

趙薇　冼小敏

[摘要]目的 探討黃芪不同炮制品對脾虛小鼠胃腸功能的影響與多糖含量的相關性。方法 選取體重接近的健康小鼠60只，隨機分成對照組、模型組、黃芪生品試驗組、蜜黃芪試驗組、米黃芪試驗組、麩黃芪試驗組。每組10只小鼠。采用苯酚一濃硫酸比色法測定黃芪不同炮制品多糖的含量，采用炭末標記法研究黃芪不同炮制品對大黃致瀉的脾虛小鼠的胃排空率及小腸推進率的影響，分析兩者的相關性。結果 黃芪不同炮制品對脾虛小鼠的胃排空率及小腸推進率的影響：蜜黃芪>米黃芪>麩黃芪>生黃芪。相對于模型組來說，黃芪不同的炮制品對胃排空率及小腸推進率均有一定的抑制。相對于生黃芪而言，經輔料炮制的黃芪對胃排空率及小腸推進率抑制較高。不同的黃芪炮制品對于脾虛小鼠胃排空率及小腸推進率的影響不同。蜜黃芪>米黃芪>麩黃芪>生黃芪。經輔料炮制后的黃芪的胃排空率與小腸推進率與對照組無顯著性差異，表明經治療后胃腸功能已接近正常水平。結論 黃芪不同炮制品抑制脾虛小鼠胃排空率及小腸推進率與多糖的含量成一定的正相關性。

[關鍵詞]黃芪；炮制品；脾虛小鼠；胃腸功能；多糖含量；相關性

[中圖分類號] R283.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2017）07（b）-0145-03

[Abstract]Objective To investigate correlation of effects of different processed products of Astrsgalus membranaceus on gastrointestinal function of spleen deficiency mice and polysaccharides content.Methods 60 healthy mice were selected and randomly divided into the control group，the model group，the Astragalus quality test group，the honey Astragalus test group，the rice Astragalus test group and the Astragalus membranaceus experimental group.There were 10 mice in each group.Determination of content of Astragalus Polysaccharides of different processed products of colorimetric method using phenol sulfuric acid，and the gastric emptying rate of carbon powder in small intestine of mice with spleen deficiency of Huangqi markers of different processed products of rhubarb lapactic advance rate and compare correlation between.Results Different processed products of spleen deficiency mice gastric emptying rate and intestinal propulsive rate： the influence of honey Astragalus Astragalus，astragalus，rice bran，astragalus.Compared with the model group，the different processed products of Astragalus had some inhibition on the rate of gastric emptying and the rate of small bowel propulsion.Compared with the Astragalus membranaceus，the Astragalus membranaceus prepared by the adjuvant inhibited the gastric emptying rate and the intestinal propulsive rate.The effects of different Astragalus processed products on gastric emptying rate and intestinal propulsive rate of spleen deficiency mice were different.Honey astragalus root > rice astragalus root > Astragalus membranaceus > Astragalus membranaceus.There was no significant difference in the gastric emptying rate and the small intestinal propulsive rate between the processed Astragalus and the control group，indicating that the gastrointestinal function was close to the normal level after treatment.Conclusion The gastric emptying rate and intestinal propulsive rare of spleen deficiency mice controlled by different processed products of Astragalus membranaceus have positive correlation with polysaccharides content.

[Key words]Astragalus membranaceus；Drug Processing；Spleen deficiency mice；Gastrointestinal function；Polysaccharides content；Correlation

《中國藥典》規定，黃芪是豆科植物蒙古黃芪、膜莢黃芪的干燥根。黃芪最先記載在《神農本草經》，味甘微溫，入肺脾經，具有補氣固表的作用[1-2]。現代藥學研究提示，黃芪多糖是黃芪有效成分含量最高的一種，也是其主要的活性成分[3-4]。黃芪經過蜜、米、麥麩炮制后，可增強補脾益氣的功效。中藥的成分復雜，不同的炮制方法會使其有效成分發生變化，因而了解其藥性隨著炮制的不同而出現化學成分的變化至關重要[5]。本文探討黃芪不同炮制品對脾虛小鼠胃腸功能的影響與多糖含量的相關性，為近一步闡明黃芪的炮制機理提供一定的依據。

1試驗材料

1.1動物

ICR小鼠，18～22 g，60只，雌性各半，購于遼寧省實驗動物資源中心，許可證號：SCXK（遼）2016-0004。

1.2試藥

Heλios γ紫外分光光度計（Thermo Electron Corporation），BP211D電子天平（賽多利斯），葡萄糖對照品（批號：110833-201205，中國食品藥品檢定研究院提供）；所用試劑（AR）：大黃、黃芪購于廣州市藥材公司中藥飲片廠。

2方法

2.1黃芪的炮制

蜜黃芪：取凈黃芪片，加25%煉蜜（1/3開水稀釋），拌勻，悶潤至蜜被吸盡，文火炒至深黃色且不粘手時，取出并放涼；米黃芪：將20%米置于鍋內翻炒至冒煙，加入黃芪片炒至深黃色取出，篩去米并放涼；麩黃芪：將15%麥麩置于鍋內翻炒至冒煙，加入黃芪片炒至深黃色取出，篩去麥麩并放涼。

2.2黃芪及其炮制品水煎液的制備

取生黃芪及各黃芪炮制品各100 g，分別加石油醚500 ml，回流脫脂2次，1 h/次，再用80%乙醇回流提取2次，2 h/次，棄去乙醇提取液，將藥渣分別加8倍量的水，于90℃水浴提取2次，2 h/次，合并濾液，濃縮成含2 g /ml黃芪水煎液，密封，放冰箱冷藏以備用[6]。

2.3黃芪及其炮制品水煎液多糖含量的測定

標準曲線制備：分別量取葡萄糖標準溶液（0.05 mg/ml）2、4、6、8、10、12、14、16 ml于25 ml容量瓶中加蒸餾水定容，取標準液1 ml于 10 ml具塞試管中，加入5%的苯酚溶液1.0 ml，搖勻后迅速加入5 ml濃硫酸顯色，振蕩5 min。置于沸水浴中加熱30 min，取出后冷卻至室溫。另取1 ml蒸餾水同法做成空白參比溶液，測定吸光度（A），以A為縱坐標，葡萄糖濃度（C）為橫坐標，求出標準回歸方程。

樣品含量測定：精密吸取黃芪炮制品水煎液各1 ml，于100 ml 容量瓶中加蒸餾水定容，移取2 ml于10 ml具塞試管中，以下同標準曲線制備方法。采用蒸餾水同法做空白參比溶液，分別測定A，代入回歸方程計算樣品濃度，然后計算黃芪不同炮制品中多糖含量[7]。

2.4大黃水煎液的制備

將生大黃在8倍水中浸泡0.5 h，煮沸40 min。用紗布過濾，再加入6倍水煮沸20 min，用紗布過濾，將2次濾液合并，在60℃水浴中濃縮成大黃水煎劑（濃度為1 g/ml），高壓滅菌后，冷藏保存。

2.5胃排空及小腸推進試驗

選取體重均等小鼠60只，隨機分成對照組、模型組、黃芪生品試驗組、蜜黃芪試驗組、米黃芪試驗組、麩黃芪試驗組，每組10只小鼠。對照組小鼠給予口服生理鹽水，每只20 ml/kg，1次/d，一直給予至試驗結束。模型組、試驗組給予口服大黃水煎劑，每只20 ml/kg，1次/d，在給予這些小鼠大黃水灌服后，每天觀察小鼠的精神、食欲、糞便等情況。觀察一直到小鼠的脾虛模型已經建立成功后為止[8]。當小鼠的脾虛模型經建立后，建模組給予生理鹽水，每只20 ml/kg。試驗組分別給予生黃芪、蜜黃芪、米黃芪、麩黃芪水煎液，每只20 ml/kg，1次/d，一直連續14 d。于末次灌胃60 min后，按30 ml/kg灌胃半固體黑色糊（取羧甲基纖維素鈉10 g，置于250 ml水中，待完全溶解后，加入奶粉16 g，淀粉8 g，蔗糖8 g和活性炭粉末2 g，攪拌均勻，即得），20 min后脫頸椎處死小鼠，開腹，結扎胃賁門和幽門，取胃，用濾紙拭干后稱全重，剪開胃體，洗去胃內容物后拭干，稱凈重。以胃全重和胃凈重的差值為胃內殘留物重，半固體糊重量與胃內殘留物的差值為胃排空量，計算胃排空量占所灌半固體糊重量的百分比為胃內殘留率。同時取出小腸，將小腸拉成直線，測量小腸的全長及幽門至黑色半固體糊前沿的距離。計算胃排空率和小腸推進率[9]。小腸推進率=炭末推進距離/小腸全長×100%；胃排空率=（半固體糊重量-胃內殘留量）/半固體糊重量×100%。

2.6統計學方法

采用SPSS 18.0統計學軟件進行數據分析，計量資料數據用均數±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；計數資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

3結果

3.1黃芪不同炮制品多糖含量

不同炮制品中多糖類成分含量存在差異，蜜黃芪（9.68%）>米黃芪（7.57%）>麩黃芪（6.81%）>生黃芪（5.24%），其中蜜黃芪最高，生黃芪最低，與黃芪比較，其余3種炮制品多糖含量均較高（P<0.05）。

3.2黃芪不同炮制品對脾虛小鼠胃排空率與小腸推進率的影響

與對照組比較，模型組的胃排空率、小腸推進率顯著升高，差異有統計學意義（P<0.05），說明造模成功。相對于模型組來說，黃芪不同的炮制品對胃排空率及小腸推進率均有一定的抑制。相對于生黃芪而言，經輔料炮制的黃芪對胃排空率及小腸推進率抑制較高。不同的黃芪炮制品對于脾虛小鼠胃排空率及小腸推進率的影響不同。蜜黃芪>米黃芪>麩黃芪>生黃芪。經輔料炮制后的黃芪的胃排空率與小腸推進率與對照組無顯著性差異（P>0.05），提示經治療后胃腸功能已接近正常水平（表1）。

4討論

中醫認為，“脾為后天之本”，具有統率機體防御能力的功能。大量實驗與臨床研究提示，“脾虛”時消化系統功能處于紊亂狀態，機體的細胞免疫和體液免疫狀態均有不同程度的降低，以細胞免疫功能最為明顯[10]。黃芪具有促進小腸蠕動，改善機體胃腸功能的作用[11]。黃芪多糖的主要生物活性是調節機體免疫力，并且其他的生物活性很大程度上都基于其對機體免疫系統的調節作用[12-13]。

由于黃芪的成分較為復雜[14]，本文多糖的提取是采用石油醚，乙醇處理藥材，除去了單糖，再用水提取；多糖的含量測定則采用的是苯酚-濃硫酸比色法[15]。

本試驗結果顯示黃芪不同炮制品對脾虛小鼠消化道機能下降導致胃排空率與小腸推進率升高均都有明顯抑制作用，而且抑制作用的強弱與多糖含量成現一定的正相關性。

綜上所述，黃芪補脾益氣作用可能與黃芪多糖提高小鼠免疫力有關，也為如何近一步完善黃芪的炮制工藝有一定借鑒作用。

[參考文獻]

[1]仝欣.黃芪主要活性成分的藥理作用[J].時珍國醫國藥，2011，22（5）：1246-1249.

[2]吳發寶，陳希元.黃芪藥理作用研究綜述[J].中藥材，2004， 27（3）：232-234.

[3]張薔，高文遠，滿淑麗.黃芪中有效成分藥理活性的研究進展[J].中國中藥雜志，2012，37（21）：3203-3204.

[4]姜琛璐，湯承，蹇宇，等.黃芪多糖免疫調節作用研究進展[J].食品科學，2013，11（34）：327-331.

[5]李利明.不同炮制方法對黃芪化學成分的影響[J].中醫中藥科學，2014，14（17）：85-87.

[6]張洪波，任春曉.黃芪葉提取及黃芪多糖測定方法研究[J].黑龍江醫藥，2005，18（1）：6-8.

[7]陳玉霞，林峰，莫娟，等.兩種黃芪多糖提取方法比較[J].試驗室研究與探索，2015，34（3）：19-30.

[8]羅燕，谷新利，惠文巧，等.黃芪多糖對脾虛小鼠消化吸收功能的影響[J].黑龍江畜牧獸，2009（9）：110-112.

[9]祝婧，鐘凌云，龔千鋒，等.升麻不同炮制品對脾氣虛動物胃腸功能的影響[J].中國試驗方劑學雜志，2015，21（21）：1-4.

[10]田洛，宜依，范榮軍，等.酸堿提取法提取黃芪多糖[J].吉林大學學報，2006，44（4）：652-657.

[11]傅紫琴，蔡寶昌，卞長霞.山藥及其麩炒品德多糖成分對脾虛小鼠胃腸功能的影響[J].藥學與臨床研究，2008，16（3）：181-183.

[12]吳永平，曹園，曹正中.黃芪活性成分最佳提取工藝探討[J].時珍國醫國藥，2001，12（10）：876-877.

[13]王汝俊，傅定中，王建華，等.補中益氣湯對“脾虛”大鼠胃黏膜易損傷性的復健作用研究[J].廣州中醫學院學報，1995，12（3）：31-32.

[14]周金黃，王建華.中藥藥理與臨床研究進展[J].北京：軍事醫學科學出版社，1995：183.

[15]黃立群.黃芪活性成分的藥理活性研究進展[J].赤峰學院學報（自然版），2009，25（9）：119-120.

（收稿日期：2017-06-01 本文編輯：馬 越）