散發(fā)型阿爾茨海默病患者血清IL-18水平的研究

敖娟，湯俊芬

（廣州市第一人民醫(yī)院南沙醫(yī)院，廣東 廣州 511400）

散發(fā)型阿爾茨海默病患者血清IL-18水平的研究

敖娟，湯俊芬

（廣州市第一人民醫(yī)院南沙醫(yī)院，廣東 廣州 511400）

目的探討外周血清IL－18水平與散發(fā)型阿爾茨海默病 （AD）的相關(guān)性及其臨床意義。方法采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）直接檢測AD組 （n＝73）和同期年齡、性別、教育與之相匹配的正常對照組 （n＝51）的外周血清中IL－18水平，根據(jù)MMSE評分和教育年限將AD組分為輕、中、重度三組。結(jié)果AD組與正常對照組的外周血清IL－18水平分別為 （338．75± 135．31）pg／mL和 （226．02±108．73）pg／mL，AD組顯著高于正常對照組 （P＜0．01）；AD組的IL－18水平與AD的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，即重度 ＞中度＞輕度，組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0．05），IL－18水平與AD患者的MMSE評分呈負(fù)相關(guān) （r＝－0．490，P＜0．001）。結(jié)論散發(fā)型AD患者外周血清中IL－18水平較正常人升高，且與疾病嚴(yán)重程度有關(guān)。

IL－18；阿爾茨海默??；免疫炎性反應(yīng)

阿爾茨海默病 （Alzheimer disease，AD）又稱為老年性癡呆，是老年人常見的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病。目前，AD的病因尚未明確，眾多因素可能與其相關(guān)，如年齡、環(huán)境、遺傳、神經(jīng)毒性、神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)功能障礙、免疫炎性反應(yīng)等。研究表明免疫炎性反應(yīng)在AD的發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用，IL－18作為一種炎性因子，可能參與了衰老、神經(jīng)炎癥、神經(jīng)退行性變等的病理過程［1］。IL－18參與AD的發(fā)病可能是通過激活的小膠質(zhì)細(xì)胞釋放IL－18等炎性因子，而IL－18又能反饋性促進(jìn)β淀粉樣蛋白沉積、激活小膠質(zhì)細(xì)胞，從而導(dǎo)致 AD的發(fā)生［2－3］。本研究通過測定AD患者和正常對照組外周血清中IL－18水平，比較AD組與正常對照組外周血清中IL－18表達(dá)水平的差異，以探討IL－18在AD發(fā)病機(jī)制中所起的作用。

1 資料與方法

1．1 研究對象AD組來自于廣州市第一人民醫(yī)院、廣州市第一人民醫(yī)院南沙中心醫(yī)院自2013年10月至2016年10月的門診與住院患者，共 73例，年齡為61～83歲，其中男性 38例，女性35例，均符合DSM－IV、NINCDS／ADRDA的診斷標(biāo)準(zhǔn)且沒有家族史。正常對照組來自于廣州市第一人民醫(yī)院南沙中心醫(yī)院健康體檢中心，共51例，年齡、性別、學(xué)歷均與AD組相匹配，年齡在 64～83歲之間，其中男性 26例，女性 25例，無記憶障礙主訴，且檢查無認(rèn)知障礙，MMSE評分在27～30分之間。AD組和正常對照組彼此間均無血緣關(guān)系，均無任何感染或炎性反應(yīng)的癥狀和體征，無主要的內(nèi)科疾病和自身免疫性疾病；CRP水平≤20 mg／L。

1．2 研究方法采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)方法 （ELISA）測定血清IL－18水平，試劑盒由美國eBioscience公司提供。抽血當(dāng)日進(jìn)行血清分離，并將血清于－80℃冰箱進(jìn)行編號保存，實(shí)驗(yàn)結(jié)果用SM－3型酶標(biāo)儀 （北京天石醫(yī)療公司生產(chǎn)）于450 nm及630 nm波長處進(jìn)行雙波長測定，操作嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行。

1．3 觀察指標(biāo)統(tǒng)計(jì)AD組和正常對照組的性別、年齡、教育、BMI值、血壓、清晨空腹血糖、膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、MMSE評分等，檢測AD組與正常對照組的外周血清IL－18水平。

1．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析數(shù)據(jù)采用SPSS 18．0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)結(jié)果以均數(shù) ±標(biāo)準(zhǔn)差表示。疾病關(guān)聯(lián)分析采用Pearson相關(guān)分析。P＜0．05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0．01表示差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2．1 AD組和正常對照組的基線資料比較AD組 （73例）和正常對照組 （51例）的性別、年齡、教育、BMI值、血壓、清晨空腹血糖、膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白經(jīng)比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＞0．05）。正常對照組和AD組的MMSE評分為 （28．94±0．88）分和 （17．75±6．06）分，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （t＝15．544，P＝0．000＜0．01）。

2．2 外周血清中IL－18水平與AD的相關(guān)性分析正常對照組和 AD組外周血清中 IL－18的水平分別為 （226．02±108．73）和 （338．75±135．31）pg／mL，AD組顯著高于正常對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （t＝4．938，P＝0．000＜0．01）。根據(jù)MMSE評分及受教育年限將AD組分為輕、中、重度三組，其外周血清IL－18水平分別為 （283．73±86．63）pg／mL、 （360．29±130．72）pg／mL、 （555．20±192．22）pg／mL，中度組顯著高于輕度組（t＝2．829，P＝0．006），重度組顯著高于輕度組 （t＝3．111，P＜0．05），亦顯著高于中度組 （t＝2．944，P＝0．006），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.3 外周血清中IL-18水平與MESS評分的相關(guān)性分析AD患者外周血清中IL－18的水平與MMSE評分呈負(fù)相關(guān)關(guān)系 （r＝－0．490，P＜0．001，圖1），隨著MMSE評分的降低，AD患者的IL－18水平逐漸升高，提示IL－18水平與AD患者的疾病嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。

圖1 AD患者外周血清IL－18與MMSE評分的相關(guān)性分析

3 討論

免疫炎性反應(yīng)一直是近來研究的熱點(diǎn)，大量證據(jù)表明，免疫炎性反應(yīng)在AD的發(fā)生、發(fā)展中起到重要作用，但是炎性反應(yīng)在AD的病理過程中具體起著怎樣的作用目前仍不清楚［1］。流行病學(xué)調(diào)查顯示，NSAIDs可能對AD患者起到保護(hù)作用，這說明神經(jīng)炎性反應(yīng)可能與AD有關(guān)。

以往眾多證據(jù)［4－5］表明 IL－1α、 IL－1β、 IL－6、 TNF－α等炎性因子會(huì)增加AD的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，除此之外，IL－1超家族的另一成員IL－18在 AD患者腦組織中的水平是升高的［5］，IL－18在體內(nèi)具有廣泛的分布，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)，如海馬、紋狀體、下丘腦、小腦、大腦皮質(zhì)均可檢測到［6］。IL－18的作用是多樣化的，它能夠促進(jìn)T細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞免疫反應(yīng)并分泌IFN－γ、INF－α、IL－1β等炎性因子，并通過增強(qiáng)TH1和NK的細(xì)胞毒性，以及FasL的表達(dá)來介導(dǎo)細(xì)胞毒性反應(yīng)。IL－18無論是對免疫調(diào)節(jié)、抗感染還是慢性炎癥性疾病都發(fā)揮了非常重要的作用［7］。IL－18對免疫炎性反應(yīng)和神經(jīng)免疫反應(yīng)的作用是雙向的，它在自身免疫性疾病、局部缺血、外傷、中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染等疾病中既有保護(hù)作用，也有損害作用。

在本研究中，AD患者的外周血清中IL－18水平顯著高于正常對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0．05）。蛋白的表達(dá)涉及轉(zhuǎn)錄、翻譯諸多環(huán)節(jié)，且IL－18與炎性反應(yīng)、腫瘤、免疫、內(nèi)分泌等疾病相關(guān)，因此患者的個(gè)體情況可能對結(jié)果產(chǎn)生很大的影響，故選擇受試者時(shí)應(yīng)盡可能排除干擾因素，以保證結(jié)果的可靠性。本研究中，AD組的IL－18水平與AD的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，即重度 ＞中度 ＞輕度，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。既往研究［8］表明，IL－18對INF－γ有強(qiáng)烈的誘生能力，從而促進(jìn)趨化因子、巨噬細(xì)胞炎性蛋白、IL－8等因子的產(chǎn)生，而這些因子又能夠反過來促進(jìn)IL－18的生成，這樣就有可能導(dǎo)致一個(gè)惡性循環(huán)，從而加重病情，這與本研究中外周血清中IL－18水平與AD的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)是一致的，因此推測IL－18可能參與了AD的發(fā)生與發(fā)展，檢測AD患者外周血清中IL－18的水平，可在一定程度上反映AD患者的免疫應(yīng)答程度。

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（責(zé)任編輯：鐘婷婷）

Study on the Level of Serum Interlukin-18 in Peripheral Blood of Patients with Sporadic Alzheimer's Disease

AO Juan,TANG Junfen
(Nansha Hospital of Guangzhou First People's Hospital,Guangzhou 511400,China)

ObjectiveTo study the correlation of interleukin-18(IL-18)in peripheral blood with sporadic Alzheimer's disease(AD) and its clinical significance.Methods73 cases of AD patients(AD group)and 51 cases of normal control group with matched age,gender and education at the same period were selected.ELISA was used to detect the IL-18 level in peripheral blood of both groups.AD patients were divided into the mild group,moderate group and severe group according to their MMSE score and education years.ResultsThe IL-18 level in peripheral blood of AD group was(338.75±135.31)pg/mL,significantly higher than(226.02±108.73)pg/mL of normal control group(P<0.01).The IL-18 level in AD group was directly proportional to the severity of AD,suggesting that IL-18 level was highest in severe group,following by moderate group,and then mild group(intra-group comparison,all P<0.05).The IL-18 level was negatively correlated with MMSE score in AD patients(r=-0.490,P<0.001).ConclusionsThe IL-18 level in peripheral blood is higher in AD patients than in normal individuals,also,it's related to the severity of AD.

Interleukin-18(IL-18);Alzheimer's disease(AD);Immune inflammatory reaction

R742

：A

10.3969/j.issn.1674-4659.2017.08.1109

2017－04－07

敖娟 （1986－），女，江西新余人，碩士研究生學(xué)歷，醫(yī)師，研究方向：癡呆。