檢測未成熟粒細胞在膿毒癥診斷中的應用價值

馬 科，張婭娟，詹明華，連晶晶，李寶亮

(河北北方學院附屬第一醫院 a.檢驗科; b.醫務處， 張家口 075000)

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檢測未成熟粒細胞在膿毒癥診斷中的應用價值

馬 科a，張婭娟b，詹明華a，連晶晶a，李寶亮a

(河北北方學院附屬第一醫院 a.檢驗科; b.醫務處， 張家口 075000)

目的 分析未成熟粒細胞(immature granulocyte，IG)在膿毒癥診斷中的檢測價值。方法 選取河北北方學院附屬第一醫院2016年9月至12月間就診健康體檢人員50例、非膿毒癥感染患者44例和膿毒癥患者56例，抽取靜脈血液標本檢測未成熟粒細胞(IG#，IG%)、降鈣素原(PCT)、白細胞(WBC)、中性粒細胞(NEUT)含量進行統計分析，應用受試者工作特征曲線分析檢測未成熟粒細胞(IG#和IG%)在膿毒癥診斷中的應用價值。結果 膿毒癥患者和非膿毒癥感染患者血液中未成熟粒細胞(IG#，IG%)、降鈣素原(PCT)、白細胞(WBC)、中性粒細胞(NEUT)含量均顯著高于正常健康人員，膿毒癥患者未成熟粒細胞(IG#和IG%)含量雖高于非膿毒癥感染患者，但無統計學差異。檢測未成熟粒細胞(IG#，IG%)診斷膿毒癥的曲線下面積(area under the curve，AUC)依次為0.862、0.867，當IG#和IG%參數cut-off值為0.065、0.75時，敏感度為0.679、0.768，特異性為0.980、0.840，約登指數為0.659、0.608，陽性似然比為33.95、4.80，陰性似然比為0.33、0.28。結論 檢測未成熟粒細胞為膿毒癥診斷監測的一個新的炎癥指標，但檢測未成熟粒細胞并不能用于區分患者感染的嚴重程度。

未成熟粒細胞;受試者工作特征曲線;膿毒癥

膿毒癥(sepsis)指由感染引起的全身炎癥反應綜合征(systemic inflammatory response syndrome，SIRS)，是感染、燒傷、創傷、休克等急危重患者的嚴重并發癥，臨床患者死亡率較高，是ICU患者死亡的主要原因[1-3]。膿毒癥早期發現困難，確診時患者病情已發展至危重，盡管臨床采取抗感染治療、早期目標導向治療(early goal-directed therapy，EGDT)等多種治療方案，膿毒癥的死亡率依然較高，治療費用高且醫療資源消耗巨大[4-6]。

目前臨床診斷膿毒癥的檢測項目主要有降鈣素原(PCT)、C反應蛋白(CRP)、血細胞計數和血培養，由于膿毒癥患者病情復雜，依據現有檢測方法確診膿毒癥較病情發展相對滯后，尤其是早期膿毒癥(early-onset sepsis，EOS)診斷十分困難，一旦確診病程已進入中晚期階段，能為臨床提供一種快速、準確鑒別診斷膿毒癥的檢測項目，第一時間給予患者治療顯得極其重要[7-8]。早期研究發現，膿毒癥患者血液中中性桿狀核粒細胞含量增高，臨床把患者中性桿狀核粒細胞計數與白細胞總數比率超過10%作為膿毒癥、感染性疾病診斷的炎癥指標。近期研究發現，感染、膿毒癥患者病程早期骨髓釋放早幼粒細胞、中幼粒細胞、晚幼粒細胞等未成熟粒細胞(immature granulocyte，IG)進入外周血中，檢測未成熟粒細胞作為炎癥指標在感染疾病、膿毒癥的診斷治療過程中發揮作用[9-10]。未成熟粒細胞在人外周血中含量極低，計數常低于0.1(109/L)，應用傳統顯微鏡涂片鏡檢方法不能準確計數未成熟粒細胞，新一代全自動血液分析儀應用核酸熒光染色技術，可準確計數高熒光強度的未成熟粒細胞[11-12]。本研究應用Sysmex XN-2000全自動血細胞分析儀檢測患者外周血未成熟粒細胞絕對值(IG#)和百分比(IG%)，探討未成熟粒細胞在膿毒癥診斷治療中的應用價值，豐富膿毒癥的檢測方法，為膿毒癥的早期診斷、治療提供實驗依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取河北北方學院附屬第一醫院2016年9月至12月間健康體檢人員外周血標本50例作為正常對照組，其中男26例，女24例，年齡22～60歲，平均年齡(32.5±9.8)歲；非膿毒癥感染患者44例作為非膿毒癥組，其中男21例，女23例，年齡30～61歲，平均年齡(43.2±10.8)歲；膿毒癥感染患者56例作為膿毒癥組，其中男30例，女26例，年齡35～65歲，平均年齡(45.5±10.5)歲。所有人員對本次研究的具體情況均知情同意，符合本院醫學倫理委員會標準。

1.2 膿毒癥診斷標準

患者感染引發全身炎癥反應，經實驗室檢驗證實有細菌感染或有高度可疑感染灶，同時具備以下2項或2項以上體征：(1)體溫>38 ℃或<36 ℃；(2)外周血白細胞計數>10.0×109/L或<4.0×109/L；(3)中性桿狀核粒細胞計數比>10%；(4)心率>90次/min；(5)呼吸頻率>20次/min或動脈二氧化碳分壓(PaCO2)<32 mmHg。

1.3 儀器和試劑

血細胞計數儀器選取Sysmex XN-2000全自動血細胞分析儀，使用原廠配套試劑及Sysmex專用質控品(Sysmex e-Check) 進行檢測，采集標本使用EDTA-K2抗凝管保存。PCT使用UPT上轉發光免疫分析儀測定，標本使用肝素鋰抗凝管保存。

1.4 標本采集與檢測

標本采集依據《全國臨床檢驗操作規程(第4版)》要求，抽取患者靜脈血液標本2ml置于EDTA-K2抗凝管中檢測白細胞(WBC)、中性粒細胞(NEUT)、未成熟粒細胞含量(IG#，IG%)，同時抽取3ml靜脈血標本置于肝素鋰抗凝管中檢測降鈣素原(PCT)，標本采集后2小時內完成檢測。試驗期間每天采用質控物對儀器進行監測，質控結果符合要求。

1.5 檢測IG含量在膿毒癥診斷中的作用

抽取正常對照組、非膿毒癥組和膿毒癥組三組人員靜脈血液標本檢測未成熟粒細胞(IG#，IG%)、降鈣素原(PCT)、白細胞(WBC)、中性粒細胞(NEUT)含量，IG#和IG%參數數據使用非參數檢驗(kruskal-wallis H檢驗)分析，PCT、WBC和NEUT參數數據使用獨立樣本t檢驗分析，比較各組之間檢測指標差異。繪制受試者工作特征曲線 (receiver operating characteristic curve，ROC曲線)，計算IG#和IG%參數的曲線下面積(AUC),分析檢測IG#和IG%診斷膿毒癥的靈敏度、特異性、約登指數等指標，探討檢測未成熟粒細胞在膿毒癥診斷中的應用價值，為膿毒癥的早期診斷和治療提供依據。

1.6 數據整理與統計學處理

2 結果

3組患者血液IG#、IG%、PCT、WBC和NEUT水平比較：膿毒癥感染患者和非膿毒癥感染患者血液IG#、IG%、PCT、WBC和NEUT水平均顯著高于正常非感染患者(P<0.01)，膿毒癥患者血液IG#、IG%、WBC和NEUT水平雖高于非膿毒癥感染患者，但無統計學差異(P>0.05)，膿毒癥患者PCT水平顯著高于非膿毒癥感染患者(P<0.01)，見表1。

表1 膿毒癥組、非膿毒癥組和正常對照組3組患者檢測指標

a) 與正常對照組比較，P<0.01; b) 與膿毒癥組比較，P<0.01

運用受試者工作特征曲線對未成熟粒細胞IG#和IG%參數進行分析，曲線下面積(area under the curve，AUC)依次為0.862、0.867，當IG#和IG%參數cut-off值為0.065、0.75時，敏感度為0.679、0.768，特異性為0.980、0.840，約登指數為0.659、0.608，陽性似然比為33.95、4.69，陰性似然比為0.33、0.28，見表2、圖1。

表2 未成熟粒細胞IG#及IG%參數的曲線下面積(AUC)

圖1 IG#和IG%參數的ROC曲線

3 討論

盡管對膿毒癥發病機制的研究取得了很大的進展，近年臨床患者因感染引發膿毒癥比率逐年增高，膿毒癥病死率依然高于30%。膿毒癥早期診斷對于疾病的預防與治療顯得極其重要，是膿毒癥治療方案的首要目標。第一時間給予患者早期有效的抗菌藥物治療不僅可以降低膿毒癥的病死率，還能大幅降低醫療費用?；谶@些原因，尋找一種新穎的膿毒癥早期診斷指標是膿毒癥疾病研究領域的一個熱門[13-15]。

在研究中，我們篩選出膿毒癥患者、感染的非膿毒癥患者以及正常健康人員抽取靜脈血液標本，通過檢測未成熟粒細胞(IG#、IG%)、降鈣素原、血細胞計數等檢測指標，分析檢測未成熟粒細胞診斷膿毒癥的靈敏度、特異性、約登指數等指標，探討未成熟粒細胞作為一個新穎的炎癥檢測指標在膿毒癥診療中的應用價值。研究發現，膿毒癥患者與非膿毒癥感染患者外周血中未成熟粒細胞含量與正常健康人比較存在顯著性差異，未成熟粒細胞絕對值(IG#)和百分比(IG%)均高于正常健康人。在膿毒癥患者和非膿毒癥感染患者之間，未成熟粒細胞絕對值(IG#)和百分比(IG%)比較不存在顯著`性差異，表明未成熟粒細胞(IG#、IG%)可以作為一個新型的炎癥指標用于感染性疾病的臨床診斷，但未成熟粒細胞(IG#、IG%)不能用于區分感染的嚴重程度。運用受試者工作特征曲線 (receiver operating characteristic curve，ROC曲線)分析檢測IG#和IG%診斷膿毒癥的曲線下面積(AUC)依次為0.862、0.867，當IG#和IG%參數cut-off值為0.065、0.75時，敏感度為0.679、0.768，特異性為0.980、0.840，約登指數為0.659、0.608，陽性似然比為33.95、4.80，陰性似然比為0.33、0.28。結果表明，膿毒癥患者檢測未成熟粒細胞(IG#、IG%)的敏感性、特異性較高，診斷效果顯著，未成熟粒細胞可用于膿毒癥疾病診斷。

綜上，膿毒癥感染患者未成熟粒細胞含量明顯升高，檢測未成熟粒細胞為膿毒癥感染疾病診斷監測的一個新的炎癥指標，但檢測未成熟粒細胞并不能用于區分患者感染的嚴重程度。

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(責任編輯 楊繼森)

The Application Value of Monitoring Immature Granulocytes in Patients with Sepsis

MA Kea, ZHANG Yajuanb, ZHAN Minghuaa, LIAN Jingjinga, LI Baolianga

(a.Department of Laboratory Medicine; b.Department of Medical, the First Affiliated Hospital of Hebei North University, Zhangjiakou 075000, China)

Objective To explore the application value of immature granulocytes(IG) in patients with sepsis. Methods Blood samples were routinely taken from clinical patients in the First Affiliated Hospital of Hebei North University from September to December 2016. Three groups of patients have been analyzed and compared: healthy people(n=50), patients with local infections(n=44), and patients with sepsis(n=56).The absolute and percentage number of immature granulocyte (IG# and IG%), procalcitonin (PCT), leukocyte (WBC) and neutrophile granulocyte (NEUT) were analyzed,then we drew the receiver operating characteristic curve (ROC curve) to evaluate the function of immature granulocytes in sepsis. Results Compared with healthy people, the levels of IG#,IG%, PCT, WBC and NEUT were significantly higher in patients with local infections and patients with sepsis. But there was no statistical difference of immature granulocytes between patients with sepsis and those with local infections. The area under curve (AUC) of IG# and IG% were 0.862,0.867, respectively. When the cut -off values of IG# and IG % were presented as follows: 0.065,0.75, Sensitivity values were 0.679,0.768, Specificity values were 0.980, 0.840, Youden index were 0.659,0.608, and positive likelihood ratio were 33.95,4.80 and negative likelihood ratio were 0.33,0.28. Conclusion Immature granulocyte could be a new and powerful indicator for diagnosing and screening sepsis, not discrimination of infections severity.

immature granulocyte; the receiver operating characteristic curve; sepsis

10.11809/scbgxb2017.07.040

2017-03-10；

2017-03-30

河北省張家口市科學技術和地震局科學技術研究與發展計劃項目(1421093D)；河北省醫學科學研究重點課題計劃項目(20170795)

馬科(1977—)，男，碩士，主要從事臨床檢驗方面的研究。

format:MA Ke, ZHANG Yajuan,ZHAN Minghua,et al.The Application Value of Monitoring Immature Granulocytes in Patients with Sepsis[J].Journal of Ordnance Equipment Engineering,2017(7):184-187.

R4

A

2096-2304(2017)07-0184-04

本文引用格式：馬科，張婭娟，詹明華，等.檢測未成熟粒細胞在膿毒癥診斷中的應用價值[J].兵器裝備工程學報，2017(7):184-187.