改良負(fù)壓吸引器連接管在輔助生殖技術(shù)取卵術(shù)中的應(yīng)用

黃秀麗 甄錦壯 林 冰

改良負(fù)壓吸引器連接管在輔助生殖技術(shù)取卵術(shù)中的應(yīng)用

黃秀麗 甄錦壯 林 冰

目的：探討改良負(fù)壓吸引器連接管在不孕癥患者接受輔助生殖技術(shù)治療后行取卵手術(shù)中的應(yīng)用效果。方法:隨機(jī)選擇2016年1月～2017年1月在我院生殖中心行體外受精-胚胎移植的不孕癥患者82例, 將其隨機(jī)分為對(duì)照組40例和觀察組42例，對(duì)照組患者在行體外受精-胚胎移植技術(shù)治療取卵時(shí)穿刺卵泡抽吸卵泡液進(jìn)行采集卵細(xì)胞操作過程中，以消毒硅化膠管及玻璃接頭為負(fù)壓泵連接管連接取卵針與負(fù)壓吸引器，觀察組患者在行體外受精-胚胎移植技術(shù)治療取卵時(shí)穿刺卵泡抽吸卵泡液進(jìn)行采集卵細(xì)胞操作過程中，以經(jīng)改良后的輸液器軟管連接取卵針與負(fù)壓吸引器，比較兩組的穿刺卵泡數(shù)、卵子數(shù)、獲卵率、受精率、可利用胚胎數(shù)。結(jié)果:觀察組患者獲卵率高于對(duì)照組(P<0.05)，兩組的卵泡數(shù)、卵子數(shù)、受精率、可利用胚胎數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論:采用改良輸液器軟管連接采集卵泡可提高獲卵率，增加卵子數(shù)量，從而提高患者可利用胚胎數(shù)量。

不孕癥；輔助生殖技術(shù)；改良負(fù)壓吸引管

現(xiàn)代人由于各種原因推遲妊娠計(jì)劃導(dǎo)致不孕不育的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年增高的趨勢(shì)[1]，高齡是發(fā)生不孕不育的原因之一，另外不孕不育還受環(huán)境、自身壓力、藥物濫用等因素的影響，發(fā)病率也呈逐年上升趨勢(shì)，借助輔助生殖技術(shù)特別是體外受精治療的不孕患者也越來越多。目前人類ART主要包括宮內(nèi)受精、體外受精-胚胎移植、人工授精、卵子體外成熟、卵胞漿單精子注射、卵子、精子以及胚胎凍融技術(shù)、移植前遺傳學(xué)診斷等[2]。患者的治療目的就是獲得臨床妊娠、生育健康后代，要達(dá)到這一目的的前提是獲得優(yōu)質(zhì)的卵子，提高受精率，最終獲得更多的優(yōu)質(zhì)胚胎，但在臨床的用藥、取卵手術(shù)、胚胎培養(yǎng)-移植等多個(gè)環(huán)節(jié)都可能影響到卵子、胚胎的質(zhì)量，其中取卵術(shù)是體外受精-胚胎移植技術(shù)治療中在體外操作的第一步，取卵時(shí)所用到的設(shè)備是由取卵針、負(fù)壓吸引器及兩者間的負(fù)壓泵連接管、一次性無菌試管組成，手術(shù)時(shí)保持管道的通道及負(fù)壓的穩(wěn)定性至關(guān)重要。在本研究中，我們通過對(duì)在取卵手術(shù)中取卵針與負(fù)壓吸引器之間使用不同連接管連接，比較兩組患者的穿刺卵泡數(shù)、卵子數(shù)、獲卵率、受精率、可利用胚胎數(shù)，探討如何使用合適的負(fù)壓吸引器連接管以改善臨床預(yù)期效果。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 隨機(jī)選擇2016年1月～2017年1月在我院生殖中心行體外受精-胚胎移植(IVF-ET)的不孕癥患者82例, 年齡≤35歲，獲卵數(shù)4～20個(gè)。將患者隨機(jī)等分為對(duì)照組40例和觀察組42例，對(duì)照組平均年齡(30.2±2.9)歲；觀察組平均年齡(29.9±3.2)歲。兩組患者病因、年齡、體重、不孕年限、Gn用量及天數(shù)等一般臨床資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 對(duì)不孕患者進(jìn)入周期治療后，進(jìn)行常規(guī)的術(shù)前宣教、指導(dǎo)飲食、按醫(yī)囑合理使用促排卵藥物，定期進(jìn)行B超監(jiān)測(cè)卵泡發(fā)育情況，并定期抽血檢測(cè)性激素水平，及時(shí)調(diào)整患者的用藥劑量。當(dāng)優(yōu)勢(shì)卵泡長(zhǎng)到17～20 mm≥3個(gè)時(shí)，根據(jù)醫(yī)囑予陰道沖洗，20∶00～23∶00肌內(nèi)注射HCG 4000～10 000 U，并于注射藥物35～39 h后在靜脈麻醉下經(jīng)陰道B超引導(dǎo)下行取卵術(shù)。手術(shù)前1 d晚上囑患者22∶00后開始禁食禁飲至取卵手術(shù)結(jié)束。手術(shù)日生殖中心護(hù)士對(duì)夫妻雙方進(jìn)行身份審核(雙方身份證及結(jié)婚證、指紋),予以佩帶手腕帶、留置靜脈留置針、用溫生理鹽水1000～1500 ml沖洗陰道，囑患者排空膀胱，取截石位，為患者聯(lián)接好心電監(jiān)護(hù)儀，予面罩低流量吸氧，四肢系好約束帶。術(shù)者再為患者行陰道沖洗1次，穿上滅菌手術(shù)衣及無菌手套后予常規(guī)鋪巾；護(hù)士術(shù)前開啟B超機(jī)并調(diào)至陰道超聲界面，調(diào)出穿刺線；恒溫試管架開啟電源進(jìn)行預(yù)熱，護(hù)士穿戴滅菌手術(shù)衣及手套后，給恒溫試管架鋪無菌孔巾，將一次性無菌試管放到恒溫試管架上進(jìn)行預(yù)熱，借助負(fù)壓泵連接管將負(fù)壓瓶、BD無菌試管、取卵針連接完畢后啟動(dòng)負(fù)壓吸引器，用取卵針試吸3 ml的培養(yǎng)液進(jìn)行沖洗取卵針通路并調(diào)試負(fù)壓(負(fù)壓維持在100～120 mmHg)；陰道B超探頭套上訂做的無菌無油取卵專用避孕套，聯(lián)接線套上滅菌的布套，以防術(shù)中污染手術(shù)區(qū)域，將穿刺架接到B超探頭上，借助陰道B超找準(zhǔn)穿刺點(diǎn)，取卵針經(jīng)過穿刺架刺入卵泡內(nèi)并啟動(dòng)負(fù)壓抽吸，將卵泡液吸入連接好的一次性無菌14 ml試管內(nèi)，并迅速傳給實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行觀察撿卵、培養(yǎng)。術(shù)中護(hù)士必須密切觀察負(fù)壓吸引器與取卵針、無菌試管聯(lián)接的是否緊密，負(fù)壓是否在正常范圍內(nèi)；同時(shí)嚴(yán)防盛裝卵泡液的試管裝的卵泡液過滿而發(fā)生卵泡液溢出或返流到負(fù)壓泵聯(lián)接管內(nèi)而影響獲卵數(shù)。術(shù)中應(yīng)密切觀察患者的生命體征，配合麻醉師做好患者的體位管理，以防術(shù)中亂動(dòng)。術(shù)后醫(yī)師予陰道填塞紗條，以壓迫穿刺點(diǎn)防止發(fā)生穿刺點(diǎn)滲血。術(shù)畢用車床運(yùn)送患者到休息室休息，途中車床必須上好防護(hù)欄以防患者跌倒。在休息室臥床休息1～2 h并實(shí)時(shí)進(jìn)行生命體征的監(jiān)測(cè)，告知患者取卵術(shù)后的注意事項(xiàng)，如出現(xiàn)輕微下腹不適或拔除陰道紗條后出現(xiàn)少許陰道出血是屬于正常現(xiàn)象；當(dāng)出現(xiàn)陰道出血增多、下腹劇烈疼痛、排出的尿液呈血性尿時(shí)，必須及時(shí)找醫(yī)師看診；獲卵數(shù)多者存在發(fā)生OHSS的風(fēng)險(xiǎn)，劉風(fēng)華等[3]認(rèn)為注意休息(但避免絕對(duì)臥床)，進(jìn)易消化飲食，避免劇烈活動(dòng)或性生活以預(yù)防黃體破裂或卵巢蒂扭轉(zhuǎn)。取卵的同時(shí)護(hù)士安排患者丈夫取精，如有取精困難的可在女方取卵前一段時(shí)間先行取精并及時(shí)冷凍，為了在取卵日不能成功進(jìn)行取精時(shí)備用。對(duì)照組是以消毒硅化膠管及玻璃接頭為負(fù)壓泵連接管連接取卵針、無菌試管及負(fù)壓吸引器；觀察組是以一次性輸液器經(jīng)改良成負(fù)壓泵連接管，把一次性輸液器藥物過濾器擰開后與取卵針活塞接口連接并接上無菌試管，留取足夠長(zhǎng)的一部分軟管用消毒剪將輸液管的剩余部分剪掉，然后接上負(fù)壓瓶。分別將兩組患者獲取的卵子進(jìn)行常規(guī)體外受精培養(yǎng)，記錄穿刺卵泡數(shù)、卵子數(shù)、獲卵率、受精率、可利用胚胎數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié) 果(表1)

表1 兩組患者獲卵數(shù)、受精率、可利用胚胎數(shù)等情況比較

3 討 論

體外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期通常進(jìn)行人工超促排卵，其目的是為了刺激多個(gè)始基卵泡同步發(fā)育來獲取較多優(yōu)質(zhì)卵細(xì)胞，以便獲得優(yōu)質(zhì)胚胎來選擇移植，最終提高臨床妊娠率，然而精子與卵細(xì)胞結(jié)合形成受精卵、發(fā)育成胚胎的過程非常復(fù)雜，任何一個(gè)環(huán)節(jié)都會(huì)影響最終結(jié)果[4]。取卵術(shù)是體外受精-胚胎移植技術(shù)治療中在體外操作的第一步，是在B超的引導(dǎo)下經(jīng)陰道從卵巢組織中吸取成熟的卵母細(xì)胞，是卵母細(xì)胞離開人體到實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)箱培養(yǎng)的中間環(huán)節(jié)，由于手術(shù)時(shí)間長(zhǎng)，卵母細(xì)胞容易受各種因素影響，可能改變卵母細(xì)胞生理功能，取卵過程除了受操作者熟練程度的影響外，還受整個(gè)取卵通道穩(wěn)定性的影響。

取卵過程中是依靠負(fù)壓泵的負(fù)壓吸引作用吸取卵泡內(nèi)的卵泡液，商品化負(fù)壓泵連接管成本高，一般是采用硅化膠管及玻璃接頭經(jīng)高溫或消毒劑浸泡消毒后重復(fù)使用。采用硅化膠管及玻璃接頭經(jīng)高溫或消毒劑浸泡消毒后重復(fù)使用存在交叉污染和微生物污染的風(fēng)險(xiǎn)，使用次數(shù)越多就越容易發(fā)生，在取卵過程應(yīng)嚴(yán)格防止發(fā)生卵泡液交叉污染，在Warda等[5]研究中顯示體外受精過程中胚胎污染也可能來源于卵泡液,Martin等[6]研究報(bào)道曾發(fā)生過在取卵過程中由于卵泡液的返流導(dǎo)致污染。孫媛等[7]研究認(rèn)為IVF-ET中胚胎污染的來源主要是精液、卵泡液以及IVF培養(yǎng)體系及環(huán)境，而正常卵泡液是無菌的。如果發(fā)生微生物污染，結(jié)果將是毀滅性的，甚至?xí)饘?shí)驗(yàn)室內(nèi)的交叉污染，將導(dǎo)致患者的卵細(xì)胞、胚胎退化死亡，最終無法獲得可利用胚胎，對(duì)患者的經(jīng)濟(jì)、身心造成嚴(yán)重的損害；相對(duì)而言輸液器價(jià)格低廉，使用成本低，而且執(zhí)行一人一管一拋棄的使用原則，從而杜絕了污染的源頭，確保了取卵手術(shù)的安全性。

硅化膠管及玻璃接頭經(jīng)過反復(fù)的消毒后可使軟管塑料發(fā)生硬化、爆裂等損傷，在使用過程中可能出現(xiàn)取卵針、負(fù)壓泵兩者與連接管之間吻合不致密而發(fā)生漏氣或玻璃接頭發(fā)生破損后碎屑掉入到卵泡液內(nèi)等現(xiàn)象，以致使取卵過程中負(fù)壓不穩(wěn)定，對(duì)卵泡吸引壓力不均衡，手術(shù)操作者難以控制，如壓力過高可使卵泡壁過早破裂，卵細(xì)胞受擠壓變形而致細(xì)胞器官損傷甚至退化死亡，或因顆粒細(xì)胞脫落而出現(xiàn)較多的裸卵，卵丘復(fù)合物(Occs)中顆粒細(xì)胞是卵子體外成熟的重要支持細(xì)胞，當(dāng)裸卵出現(xiàn)過多，影響卵子的體外成熟進(jìn)程，不成熟卵子不能正常受精使受精率和可利用胚胎減少，導(dǎo)致臨床妊娠率下降；取卵時(shí)壓力過大還可能會(huì)導(dǎo)致卵子的孤雌激活，改變卵子的生理功能[8]；壓力過小使卵泡不易從卵巢組織剝離而影響獲卵，獲卵率下降的同時(shí)也會(huì)使手術(shù)操作時(shí)間延長(zhǎng)，增加了卵細(xì)胞在體外的操作時(shí)間，MII期卵子紡錘體對(duì)環(huán)境溫度的改變非常敏感，溫度降低將導(dǎo)致紡錘體消失，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，紡錘體復(fù)現(xiàn)同率明顯減少[9]。體外操作因素的損傷隨胚胎培養(yǎng)過程中體外操作次數(shù)的增加而對(duì)胚胎產(chǎn)生損害疊加效應(yīng)，胚胎質(zhì)量下降、可利用胚胎減少，最終也會(huì)使妊娠率下降。在本研究中，兩組患者的穿刺卵泡數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，觀察組卵子數(shù)高于對(duì)照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而觀察組獲卵率顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，表明觀察組的取卵設(shè)備穩(wěn)定性高于對(duì)照組，相同條件下能獲得更多成熟卵子；兩組間受精率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明兩種負(fù)壓管連接方式對(duì)卵子質(zhì)量、生理功能影響相似，也可能與本研究對(duì)象、數(shù)量有關(guān)，但觀察組獲得的可利用胚胎數(shù)高于對(duì)照組，這是獲得較多優(yōu)質(zhì)胚胎的前提，是最終影響妊娠結(jié)果的主要因素。

綜上所述，我們認(rèn)為輸液器塑料質(zhì)量穩(wěn)定，改良后的輸液器連接管存在的優(yōu)勢(shì)是：(1)連接管是一次性使用，使用成本低，能減少污染的風(fēng)險(xiǎn)。(2)不存在反復(fù)消毒所致的損壞，與取卵針、負(fù)壓泵連接吻合良好，取卵過程中能使吸引壓力保持穩(wěn)定，手術(shù)醫(yī)師操作時(shí)控制良好，對(duì)卵母細(xì)胞的影響可控，是卵母細(xì)胞質(zhì)量的良好保證，可以獲得更多的可利用胚胎，有助于提高妊娠率，改善治療結(jié)局。但由于本研究的樣本量較少，需在臨床擴(kuò)大樣本，進(jìn)一步探討其在臨床應(yīng)用所存在的優(yōu)勢(shì)，以便推廣使用。

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(本文編輯 崔蘭英)

Application of connecting pipe of modified negative pressure suction device in oocyte retrieval of assisted reproductive technology

HUANG Xiu-li,ZHEN Jin-zhuang,LIN Bing

(Shunde District Maternity and Child Healthcare Hospital of Foshan,Foshan 528300)

Objective:To explore the effect of connecting pipe of modified negative pressure suction device in the oocyte retrieval of infertility patients after treatment of assisted reproductive technology.Methods:A total of 82 patients with infertility

in vitro fertilization-embryo transfer in reproductive center from January 2016 to January 2017 were randomly divided into control group with 40 cases and observation group with 42 cases. During oocyte retrieval of in vitro fertilization-embryo transfer, the control group used sterilized silicified rubber tube and glass joint to link oocyte needle and the negative pressure suction device during the collection of egg cells, while the observation group used the modified infusion hose to connect oocyte needle and the negative pressure suction device. The number of puncture follicles, number of eggs, egg rate, fertilization rate and the number of available embryos in the two groups were compared.Results:The ovulation rate of the observation group was higher than that of the control group (P<0.05). There was no significant difference in the number of follicles, number of eggs, fertilization rate and available embryo number between the two groups (P>0.05).Conclusion:The use of improved infusion device hose to collect follicles can increase the rate of ovulation and the number of eggs, thereby increasing the number of available embryos in patients.

Infertility；Assisted reproductive technology；Modified negative pressure suction tube

528300 佛山市 廣東省佛山市順德區(qū)婦幼保健院生殖科

黃秀麗:女，本科，主管護(hù)師

2017-05-08)

10.3969/j.issn.1672-9676.2017.13.028