肺癌患者血清多效蛋白表達水平及其臨床意義

張韶巖 曾小莉 區(qū)頌雷 馬旭晨

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肺癌患者血清多效蛋白表達水平及其臨床意義

張韶巖1曾小莉2區(qū)頌雷1馬旭晨1

目的探討血清多效蛋白(PTN)在肺癌患者中的表達及其臨床意義。方法采用ELISA檢測57例非小細胞肺癌(NSCLC)患者、20例小細胞肺癌(SCLC)患者和12例正常對照組血清PIN水平，分析其對肺癌的診斷價值及與NSCLC病理分期和手術(shù)的關(guān)系。結(jié)果正常對照組PTN水平明顯低于SCLC組(P<0.001)和NSCLC組(P=0.003)，并且SCLC組PTN水平顯著高于NSCLC組(P=0.010)。ROC曲線分析PTN對肺癌診斷的AUC為0.821(95%CI0.730～0.913)(P<0.001)；對NSCLC診斷的AUC為0.794(95%CI0.684～0.904)(P=0.001)；對SCLC診斷的AUC為0.900(95%CI0.783～1.000)(P<0.001)。NSCLC患者PTN水平與病理分期(P<0.001)和腫瘤遠處轉(zhuǎn)移(P=0.019)密切相關(guān)，與病理類型和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)(P>0.05)。NSCLC患者手術(shù)后PTN水平較手術(shù)前明顯降低(P<0.001)。結(jié)論血清PTN可作為診斷肺癌的指標，PTN還可用于NSCLC病情監(jiān)測和療效判斷。

多效蛋白； 支氣管肺癌； 診斷； 臨床意義

肺癌是臨床最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)生率和病死率持續(xù)增高，居各種癌癥死亡原因的首位[1-2]。探索肺癌的生物學(xué)特征，尋找診斷肺癌的特異性腫瘤標志物是目前的研究熱點[3-7]。原癌基因pleiotrophin的表達產(chǎn)物是一種分泌性生長因子—多效蛋白(pleiotrophin, PTN)，可分泌到血液和組織液中。PTN具有刺激細胞增殖與遷移、促進血管生成、促進神經(jīng)系統(tǒng)及骨發(fā)育等功能。近年來研究發(fā)現(xiàn)PTN與腫瘤的發(fā)展和血管新生密切相關(guān)[8]，PTN在多種腫瘤中高表達，包括胰腺癌、前列腺癌、結(jié)直腸癌、膠質(zhì)細胞瘤、乳腺癌、黑色素瘤、肺癌等[9-17]。目前，血清PTN在肺癌患者中的表達情況國內(nèi)少見報道。為此，我們進行了一項回顧性臨床研究，檢測肺癌患者血清PTN水平變化，以探討其在診斷肺癌中的價值及與肺癌臨床病理分期和手術(shù)的關(guān)系。

材料和方法

一、研究對象

2015年1月至2016年12月，首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京安貞醫(yī)院胸外科經(jīng)病理確診為小細胞肺癌(small cell lung cancer, SCLC)患者20例，其中男性12例，平均年齡為(60.2±8.8)歲；女性8例，平均年齡(56.2±9.5)歲。確診為非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者57例，其中男38例，平均年齡 (61.5±9.2)歲；女19例，平均年齡(57.8±8.4)歲。NSCLC患者中，鱗癌22例，腺癌35例；48例接受手術(shù)，肺葉切除47例，全肺切除1例。按IASLC 2009年TNM標準，NSCLC患者分期如下：Ⅰ期11例，Ⅱ期25例，Ⅲ期14例，Ⅳ期7例；經(jīng)手術(shù)或組織活檢證實淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移45例(N1 26例，N2 14例，N3 5例)，手術(shù)證實無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移12例；遠處轉(zhuǎn)移7例。選取12名同期健康體檢者為正常對照組，其中男性7名，平均年齡(57.8±10.4)歲；女性5名，平均年齡(52.3±12.2)歲。兩組性別和年齡構(gòu)成比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

二、研究方法

PTN檢測：全部受試者均在未接受治療前空腹采取外周靜脈血5 ml，分離血清后置-80 ℃儲存?zhèn)溆谩Ｊ中g(shù)患者手術(shù)后第7天采集外周靜脈血5 ml，分離血清后置-80 ℃儲存?zhèn)溆谩TN酶聯(lián)免疫試劑盒購自上海西唐生物科技有限公司，按說明書操作。測定儀器為美國Thermo公司生產(chǎn)的DENLEY DRAGON Wellscan MK3酶標儀。

三、統(tǒng)計學(xué)方法

結(jié) 果

一、肺癌患者和正常對照組血清PTN水平

正常對照組PTN水平[(21.77±10.12)μg/L]明顯低于SCLC組[(42.82±14.73)μg/L](P<0.001)和NSCLC組[(34.07±12.49)μg/L](P=0.003)，并且SCLC組PTN水平顯著高于NSCLC組(P=0.010)，見圖1。

圖1 肺癌患者和正常對照血清PTN水平柱狀圖

二、PTN診斷肺癌效能比較

ROC曲線分析PTN對肺癌診斷的AUC為0.821(95%CI 0.730～0.913)(P<0.001)(圖2A)；對NSCLC診斷的AUC為0.794(95%CI 0.684～0.904)(P=0.001)(圖2B)；而對SCLC診斷的AUC為0.900(95%CI 0.783～1.000)(P<0.001)(圖2C)。經(jīng)ROC曲線分析確定PTN對肺癌的診斷臨界值為36.42 μg/L時，其敏感度為61.0%，特異度為100%；PTN對NSCLC的診斷臨界值為36.52 μg/L時，其敏感度為52.6%，特異度為100%；PTN對SCLC的診斷臨界值為36.42 μg/L時，其敏感度為85%，特異度為100%。

圖2 血清PTN診斷肺癌的ROC曲線圖；注：A： 血清PTN診斷肺癌的ROC曲線圖和AUC；B：血清PTN診斷NSCLC的ROC曲線圖和AUC；C：血清PTN診斷SCLC的ROC曲線圖和AUC。

三、NSCLC患者血清PTN水平與病理參數(shù)的關(guān)系

PTN水平在肺腺癌組和肺鱗癌組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.848)。NSCLC患者PTN水平與病理分期(P<0.001)和腫瘤遠處轉(zhuǎn)移(P=0.019)密切相關(guān)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)(P=0.368)，見表1。

臨床資料例數(shù)PTN(μg/L)P值ab病理類型0.848 肺腺癌3535.41±12.38 肺鱗癌2231.92±12.65病理分期0.000 Ⅰ期1121.59±9.14 Ⅱ期2530.34±12.73 Ⅲ期1442.32±6.18 Ⅳ期742.94±7.36 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移0.368 無1229.34±9.10 有4535.20±13.00遠處轉(zhuǎn)移0.019 無5032.22±13.15 有740.97±6.07

注：a兩組間比較采用t檢驗；b多組間比較采用方差分析

四、NSCLC患者手術(shù)前后血清PTN水平變化比較

手術(shù)治療對NSCLC患者血清PTN水平的影響 與手術(shù)前比較，NSCLC患者手術(shù)后血清PTN水平明顯降低(P<0.001)，見表2。

表2 手術(shù)前后血清PTN水平變化

注：a手術(shù)前后比較采用配對t檢驗

討 論

PTN基因是一種促生長原癌基因，PTN基因的表達產(chǎn)物被證實是一種具有分泌性和多種生物學(xué)活性的蛋白，稱為多效蛋白(pleiotrophin, PTN)。PTN在細胞的生長、分化及發(fā)育過程中均起重要作用[18]。在腫瘤相關(guān)研究中，Souttou等[19]將人腫瘤移植到小鼠體內(nèi)后發(fā)現(xiàn)小鼠血清PTN水平增高，提示PTN是由腫瘤細胞本身所分泌, 而非腫瘤基質(zhì)。研究發(fā)現(xiàn)PTN不但參與腫瘤細胞的黏附、增殖、抑制腫瘤細胞凋亡，還參與腫瘤細胞的遠處轉(zhuǎn)移[8, 20]。研究表明PTN的高表達導(dǎo)致腫瘤細胞惡性表型，而PTN的表達下調(diào)則抑制腫瘤細胞的增殖、遷移和侵襲[11]。PTN在發(fā)育成熟的組織中一般不表達或極少表達，在腫瘤患者的腫瘤組織及血清中高表達[9-17]。Wu等[15]研究發(fā)現(xiàn)PTN在黑色素細胞痣和黑色素細胞瘤中呈不同表達，且PTN可能是促黑色素細胞瘤形成的重要因素之一。最近的研究發(fā)現(xiàn)在PTN表達陽性的胰腺癌中更易于發(fā)生嗜神經(jīng)侵襲[10]，在結(jié)直腸癌中PTN促進VEGF表達并引起血管新生，PTN可能是結(jié)直腸癌的預(yù)后判斷指標[12]。J?ger等[16]研究發(fā)現(xiàn)肺癌(尤其是SCLC)患者血清PTN水平可達健康人的10.8倍。近年研究發(fā)現(xiàn)PTN/RPTP β/ζ信號通路在肺癌細胞遷徙轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用[17]。

本研究發(fā)現(xiàn)正常對照組PTN水平明顯低于SCLC組(P<0.001)和NSCLC組(P=0.003)，并且SCLC組PTN水平顯著高于NSCLC組(P=0.010)。結(jié)果提示PTN可能參與了肺癌的發(fā)生發(fā)展，并且在SCLC患者血清中PTN升高更明顯，可作為診斷SCLC的生物學(xué)指標。本研究進一步采用ROC曲線評估PTN對肺癌的診斷價值，發(fā)現(xiàn)PTN對肺癌和NSCLC診斷的AUC>0.7，特異度均為100%，敏感度分別為61.0%和52.6%，提示診斷準確性較高；PTN對SCLC診斷AUC>0.9，敏感度為85.0%，特異度為100%，提示診斷準確性最高。因此，PTN對SCLC診斷價值更高。

NSCLC的治療主要有手術(shù)、化療、放療及免疫治療、基因治療等。手術(shù)根治性切除仍然是臨床治療NSCLC最有效、最重要的方法之一。探究手術(shù)治療對腫瘤標志物的影響，可以更好地進行療效評估，對于提高腫瘤綜合治療水平有著重要的臨床意義。本研究發(fā)現(xiàn)與手術(shù)前比較，NSCLC患者手術(shù)后血清PTN明顯降低(P<0.01)。結(jié)果表明手術(shù)治療可下調(diào)NSCLC患者PTN水平，提示PTN可以作為判斷療效的生物學(xué)指標，也可為肺癌的生物學(xué)治療提供新的靶點。

為了較全面探討PTN在肺癌診斷中的意義，本研究還對PTN表達水平與NSCLC臨床資料之間關(guān)系進行了研究，發(fā)現(xiàn)NSCLC患者PTN水平在肺腺癌組和肺鱗癌組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.848)；PTN水平與病理分期(P<0.001)和腫瘤遠處轉(zhuǎn)移(P=0.019)密切相關(guān)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)(P=0.368)。研究結(jié)果還表明隨著病理分期增加，病情加重，PTN水平逐步升高，Ⅲ期和Ⅳ期患者PTN水平明顯高于Ⅰ期和Ⅱ期， 提示PTN與肺癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，PTN可能促進了癌細胞的遠處轉(zhuǎn)移，PTN可以作為病情監(jiān)測的生物學(xué)指標。

綜上所述，血清PTN可作為診斷肺癌的指標，還可用于NSCLC病情監(jiān)測和療效判斷。

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(本文編輯：張大春)

張韶巖，曾小莉，區(qū)頌雷，等. 肺癌患者血清多效蛋白表達水平及其臨床意義[J/CD]. 中華肺部疾病雜志(電子版)， 2017， 10(3)： 292-295.

Expression of pleiotrophin in serum and its clinical significance in patients with lung cancer

ZhangShaoyan1,ZengXiaoli2,OuSonglei1,MaXuchen1.

1DepartmentofThoracicSurgery;2DepartmentofClinicalLaboratory,BeijingAnzhenHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100029,China

ZengXiaoli,Email:greatzxl@163.com

Objective To investigate the serum levels and clinical significance of the angiogenic factor pleiotrophin (PTN) in patients with lung cancer. Methods Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was used to detect the serum levels of PTN in 57 patients with non-small cell lung cancer (NSCLC), 20 patients with small cell lung cancer (SCLC) and 12 healthy individuals, and their relationship with pathological stage and operation therapy foe NSCLC was explored. Results PTN expression was significantly lower in healthy individuals than that in SCLC (P<0.001) and NSCLC patients (P=0.003). PTN level was significantly higher in SCLC patients than that in NSCLC patients (P=0.010). High expression of PTN was identified as a moderately specific marker for lung carcinoma distinguished from healthy subjects with the area under the ROC curve (AUC) at 0.821(95%CI0.730～0.913) (P<0.001). Additionally, PTN was identified as a lowly specific marker for NSCLC distinguished from healthy subjects with AUC at 0.794 (95%CI0.684～0.904) (P=0.001). However, PTN was identified as a highly specific marker for SCLC distinguished from healthy subjects with AUC at 0.900 (95%CI0.783～1.000) (P<0.001). The PTN level in NSCLC patients was significantly associated with clinical stage (P<0.001) and distant metastasis (P=0.019). No association was found between PTN and other clinic pathological features such as pathological type and lymphatic metastasis in NSCLC patients. Compared with NSCLC patients before opertion, PTN level in NSCLC patients after operation was significantly decreased(P<0.001). Conclusion PTN in serum has the important values of diagnosing lung cancer. Moreover, PTN in serum can be available to estimate condition and curative effects of NSCLC.

Pleiotrophin; Bronchiogenic lung cancer; Diagnosis; Clinical significance

10.3877/cma.j.issn.1674-6902.2017.03.010

北京市衛(wèi)生系統(tǒng)高層次衛(wèi)生技術(shù)人才培養(yǎng)項目 資助(NO. 2015-3-052)

100029 北京，首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京安貞醫(yī)院 胸外科1

100029 北京，首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京安貞醫(yī)院 檢驗科2

曾小莉，Email: greatzxl@163.com

R734.2

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2016-11-01)