血清同型半胱氨酸測定在糖尿病腎病中的臨床意義

王冬梅，張秋波

茂名石化醫(yī)院，廣東 茂名 525011

血清同型半胱氨酸測定在糖尿病腎病中的臨床意義

王冬梅，張秋波

茂名石化醫(yī)院，廣東 茂名 525011

目的探討分析糖尿病腎病中血清同型半胱氨酸（Hcy）的變化和其炎癥因子的相關性。方法選取2012年2月～2016年8月于我院就診的2型糖尿病腎病患者共160例，根據(jù)尿白蛋白排泄率和血肌酐水平分為單純糖尿病組（DM組）、早期糖尿病腎病組（EDN組）、糖尿病腎病組（CDN組）和腎功能衰竭組（CRF組），以40例健康體檢者作為對照組，比較各組患者的Hcy值及生化指標，分析Hcy其糖尿病腎病患者炎癥因子IL-1、IL-6、TNF-α和hsCRP的相關性。結果5組患者比較，其GLU、HbA1c、UREA、Cr、TP、ALB、TCH和TG差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；Hcy差異有統(tǒng)計學意義（F=27.452，P＜0.01）；hsCRP、TNF-α、IL-1和IL-6差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；血清Hcy水平和hsCRP存在顯著的正相關（r=0.624，P＜0.01）、和TNF-α存在正相關（r=0.557，P＜0.01）、和IL-1存在顯著正相關（r=0.568，P＜0.01）、和IL-6存在顯著正相關（r=0. 417，P=0.017）。結論Hcy在糖尿病腎病中病情進展中具有重要作用，可作為糖尿病腎病患者腎血管損傷及病情進展評價的重要指標，且與hsCRP、IL-1、IL-6和TNF-α具有顯著的相關性。

血清同型半胱氨酸；糖尿病腎病；白介素1；白介素6；腫瘤壞死因子α

糖尿病腎病是糖尿病主要微血管病變之一，也是導致腎功能不全的重要原因[1]。由糖尿病引起的腎臟的病變包括腎微血管的損傷、腎小球濾過膜的破壞嚴重加快了糖尿病腎病患者的病情進展[2]。對于糖尿病腎病患者，如何對早期腎微血管損傷進行有效地診斷和評估，目前仍是臨床研究的難點[3]。有研究指出，在糖尿病腎病中，特別是血液中的炎癥因子與糖尿病腎病的病情進展具有密切的相關性[4]，其中各種炎癥因子可參與促使腎小球基底膜的炎癥反應，導致基底膜發(fā)生增厚，進一步導致了2型糖尿病患者的病情進展[5]。血清同型半胱氨酸（Hcy）是目前臨床中用于評價心腦血管病變的重要指標之一，Hcy也與糖尿病的病情進展具有密切的關系[6]。但其能否作為糖尿病腎病患者中的血管病變程度的評價指標，同時其與糖尿病腎病中的炎癥因子具體的相關性如何，目前研究比較少。因此，本研旨在探討糖尿病腎病中Hcy的變化和其炎癥指標的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采用前瞻性研究，選取2014年6月～2016年10月于本院就診的糖尿病腎病患者共160例，納入標準：（1）符合2型糖尿病診斷標準[7]，并確診病程2年以上；（2）年齡于18～70歲；排除標準：（1）外傷所導致的急性腎損傷患者；（2）合并慢性腎炎患者；（3）合并急性尿道感染的患者；（4）合并自身免疫性疾病患者；（5）慢性肝炎或肝功能嚴重受損的患者；（6）合并惡性腫瘤患者；（7）1個月內出現(xiàn)全身感染性疾病的患者。本研究均獲得患者知情同意和醫(yī)院倫理委員會批準。

1.2 分組方法

根據(jù)尿白蛋白排泄率（UAER）和血肌酐（Scr）水平分為單純糖尿病組（DM組），早期糖尿病腎病組（EDN組），糖尿病腎病組（CDN組），腎功能衰竭組（CRF組）。DM組為UAER＜30 mg/24 h；EDN組為UAER30～300 mg/24 h；CDN組為腎UAER＞300 mg/24 h，CRF組為Scr＞133 μmol/L，所有指標均至少在3個月內進行2次以上檢測，取平均值進行判斷，其中160例患者中，DM組共有42例，EDN組共有47例，CDN組共有44例，CRF組27例，對照組40例。

1.3 檢測指標

一般資料記錄：記錄所有患者的年齡、性別、體質量指數(shù)，記錄糖尿病患病時間。血液樣本采集：所有患者于禁食12 h后空腹抽取靜脈血，樣本用真空采血管采集，采集后迅速用離心機離心，血清和血漿樣品檢測前在-80 ℃冰箱進型保存。所有患者檢測的指標包括：空腹血糖（GLU）、糖化血紅蛋白（HbA1c）、尿素（UREA）、肌酐（Cr）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、總膽固醇（TCH）、甘油三酯（TG）、超敏C反應蛋白（hsCRP），采用貝克曼BXC600全自動生化分析儀。

Hcy、腫瘤壞死因子（TNF-α）、白介素-1（IL-1）和白介素-6（IL-6）的檢測均采用酶聯(lián)免疫吸附定量試驗法（ELISA），檢測試劑盒購自北京晶美生物科技，操作步驟嚴格按照說明書進行。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS24.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，連續(xù)變量資料以均數(shù)±標準差或中位數(shù)和四分位間距表示，正態(tài)分布資料多組間比較采用單因素方差分析，進一步組間比較采用SNK檢驗，非正態(tài)分布數(shù)據(jù)多組數(shù)據(jù)間比較采用Kruskal-Wallis檢驗，組間比較采用Bonferroni法校正后采用Mann-Whitney U檢驗，計數(shù)資料采用卡方檢測，進一步采用Fisher精確檢驗。采用Spearman相關分析方法分析血清Hcy水平與各項炎癥指標的相關性，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 一般資料比較

納入研究的5組患者之間年齡差異無統(tǒng)計學意義（F=2.42, P=0.121），性別比例差異無統(tǒng)計學意義（χ2=0.755，P=0.944），體質量指數(shù)比較差異也沒有統(tǒng)計學意義（F=1.137，P=0.314），其中4組不同分期的患者之間的患病時間差異具有統(tǒng)計學意義（F=9.447，P＜0.05），CRF組患者顯著高于DM、EDN和CDN組（P＜0.05），CDN組顯著高于DM和EDN組（P＜0.05，表1）。

表1 5組患者之間的一般資料對比

2.2 生化及炎癥指標比較

5組患者中，TCH和TG的差異無統(tǒng)計學意義（F=1.427, P=0.186；F=2.785, P=0.118），GLU、HbA1c、UREA、Cr、TP、ALB、TCH和TG的差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），Hcy差異均具有統(tǒng)計學意義（F=27.452,P＜0.01），其中CRF組患者顯著高于DM、EDN、CDN和對照組，CDN組顯著高于EDN、DM和對照組，EDN顯著高于DM和對照組，差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。5組患者中的炎癥指標，hsCRP、TNF-α、IL-1和IL-6差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01，表2）。

2.3 Hcy與炎癥指標的相關性分析

血清Hcy水平和hsCRP存在顯著的正相關（r=0.624, P＜0.01），血清Hcy水平和TNF-α存在正相關（r=0.557, P＜0.01），血清Hcy水平和IL-1存在顯著的正相關（r=0.568，P＜0.01），血清Hcy水平和IL-6存在顯著正相關（r=0. 417，P=0.017，表3）。

3 討論

糖尿病腎病是由于長期的高血糖狀態(tài)導致腎臟血流動力學異常，同時也影響了腎臟的局部代謝，導致腎小管和腎小球受損，引起腎功能障礙[8]。糖尿病腎病患者存在持續(xù)的炎癥反應狀態(tài)，其中炎癥因子在糖尿病腎病的病情進展中具有的促進作用[9]。同時，唐代謝的紊亂直接導致了糖尿病腎病患者的糖基化終末產物升高，加快了腎小球基底膜、系膜纖維化轉變，再結合長期存在的炎癥因子，導致了腎小球的進一步硬化和功能不全[10]。Hcy是蛋氨酸脫甲基代謝的產物之一，其在正常的情況下經腎臟代謝，在糖尿病腎病的代謝紊亂情況下，Hcy轉化障礙進入血中，其可促進氧自由基的產生和影響內皮功能，導致腎微小血管損傷[11]。研究[12]指出，Hcy與各種大血管病變具有顯著的相關性，Hcy與糖尿病腎病患者的微血管病變也具有密切的聯(lián)系，但對于Hcy與不同病情嚴重程度的患者是否存在相關性，同時Hcy與糖尿病腎病患者中的炎癥因子的關系目前研究得比較少，因此，本研究旨在探討其中的關系。

表2 5組患者之間的生化及炎癥指標對比

表3 Hcy與炎癥指標的相關性分析

本研究中通過對納入研究的糖尿病腎病患者根據(jù)其病情進行分組，在一般資料對比中，可以明確患病時間是糖尿病腎病病情惡化的一項重要的因素。同時比較5組患者的生化指標，包括GLU、HbA1c、UREA和Cr均提示了5組患者長時間的血糖控制狀況和腎功能之間的差異，同時5組患者之間的TP、ALB、TCH和TG比較差異均具有統(tǒng)計學意義，這表明糖尿病腎病患者慢性病情中尿蛋白排泄增多，因此總的蛋白、白蛋白均顯著下降，這也直接反應了5組患者之間的病情嚴重程度[13]。TCH和TG是糖尿病患者脂代謝異常的表現(xiàn)，其主要表現(xiàn)在長期蛋白尿下的TCH、TG和LDL-C增高、HDL-C下降，脂肪代謝異常后，容易導致脂肪在腎小球的沉積，導致腎小球硬化加重[14]。而腎臟是代謝Hcy的主要場所，難以排出的Hcy進一步引起微血管平滑肌增殖，也導致Hcy的排泄惡性循環(huán)導致進一步升高[15]。因此在本研究結果中顯示，根據(jù)糖尿病腎病患者的病情嚴重Hcy水平趨勢是顯著升高的，研究[16]指出，Hcy能借助活性氧物質促進內皮細胞組織發(fā)生氧化應激，導致內皮損傷，這表明Hcy水平升高不但反映了腎小球不斷損傷，同時Hcy水平也直接反映了糖尿病腎病的病情變化。

IL-1和IL-6是直接由于炎癥細胞誘發(fā)的細胞功能因子，同時在IL-1和IL-6的刺激下，TNF-α也會進行一步釋放，導致NO的增加，促進糖尿病腎病患者的炎癥反應，影響糖尿病腎病血管內皮的功能[17]，進一步導致腎功能受損。對于糖尿病腎病患者，其慢性炎癥因子是長期存在的[18]，本研究結果顯示，對于病情越重的患者，其IL-1、IL-6和TNF-α也會升高，而且與病情的嚴重程度具有一定的相關性。hsCRP是反映慢性炎癥的敏感性指標，本研究結果顯示隨著病情嚴重程度的增加，其也呈逐漸上升的趨勢。進一步分析Hcy水平和hsCRP、IL-1、IL-6和TNF-α的相關性，結果均顯示Hcy水平和該四項炎癥指標具有顯著的相關性，表明Hcy也參與了糖尿病腎病中的炎癥反應，其具體的機制可能為Hcy促進了血管內皮的氧化應激所產生的中間產物，參與了血管的炎癥進展，這也提示了慢性炎癥中Hcy參與其中并發(fā)揮了媒介的作用[19]。對于具體Hcy如何參與其中的具體機制，仍需要一步進行深入研究。

綜合上述，Hcy在糖尿病腎病中病情進展中具有重要作用，其可作為DN患者腎血管損傷及病情進展評價的重要指標，且與hsCRP、IL-1、IL-6和TNF-α具有顯著的相關性。

[1]Yano Y, Fujimoto S, Kramer H, et al. Long-term blood pressure variability, new-onset diabetes mellitus, and new-onset chronic kidney disease in the Japanese general population[J]. Hypertension,2015, 66(1)： 30-6.

[2]Blázquez AM, López JM, Martínez SC. Mechanisms involved in the Genesis of diabetic nephropathy[J]. Curr Diabetes Rev, 2010,6(2)： 68-87.

[3]張曉會, 趙 偉, 鄭 曉, 等. 中性粒細胞與淋巴細胞比值與2型糖尿病微血管病變的相關性研究[J]. 中華內分泌代謝雜志, 2014, 30(9)： 752-4.

[4]Katagiri D, Doi K, Matsubara T, et al. New biomarker panel of plasma neutrophil gelatinase-associated lipocalin and endotoxin activity assay for detecting sepsis in acute kidney injury[J]. J Crit Care, 2013, 28(5)： 564-70.

[5]李仁達, 夏蘇蕾. 糖尿病腎病患者與炎癥因子及胰島素抵抗關系的研究[J]. 寧夏醫(yī)學雜志, 2007, 29(6)： 520-2.

[6]亓海萍, 呂衛(wèi)華, 武 琳. 糖化血紅蛋白、同型半胱氨酸及尿微量白蛋白與2型糖尿病合并腎臟微血管病變的關系研究[J]. 中國實驗診斷學, 2015, 19(11)： 1840-3.

[7]中華醫(yī)學會糖尿病學分會. 中國2型糖尿病防治指南(2013年版)[J]. 中國醫(yī)學前沿雜志： 電子版, 2015, 22(3)： 26-89.

[8]Zheng JM, Yao GH, Cheng Z, et al. Pathogenic role of mast cells in the development of diabetic nephropathy： a study of patients at different stages of the disease[J]. Diabetologia, 2012, 55(3)： 801-11.

[9]李艷紅, 黎 艷, 李 莉, 等. 維生素D聯(lián)合鹽酸吡格列酮干預對糖尿病腎病患者血清炎癥因子的影響[J]. 廣東醫(yī)學, 2016, 37(1)： 125-7.

[10]許敏玲, 袁 帥, 丁德良. 糖尿病腎病不同進展階段的微炎癥狀態(tài)及其干預治療研究[J]. 解剖學研究, 2010, 32(2)： 121-5.

[11]Zanotti S, Canalis E. Hairy and enhancer of split-related with YRPW motif (HEY)2 regulates bone remodeling in mice[J]. J Biol Chem, 2013, 288(30)： 21547-57.

[12]甄卓麗, 陳曉銘, 周 飛, 等. 2型糖尿病腎病患者血清同型半胱氨酸水平的變化及意義[J]. 廣東醫(yī)學, 2015, 12(16)： 2556-7.

[13]喬麗麗, 李冬娥. 血清同型半胱氨酸與2型糖尿病腎病的關系[J].中華全科醫(yī)學, 2011, 9(6)： 874-5.

[14]周玉萍, 遲海燕, 王永笛. 糖尿病腎病不同分期血清同型半胱氨酸、三酰甘油、總膽固醇水平的變化[J]. 疑難病雜志, 2014, 13(11)：1137-9.

[15]Piwkowska A, Rogacka D, Audzeyenka I, et al. High glucose concentration affects the oxidant-antioxidant balance in cultured mouse podocytes[J]. J Cell Biochem, 2011, 112(6)： 1661-72.

[16]Fang X, Dong L, Chen WB, et al. Correlation of homocysteine with diabetic microangiopathy and the change after drug intervention[J].J South Med Univ, 2016, 36(11)： 1573-6.

[17]朱春海, 盧益中. 糖尿病患者血清C反應蛋白、腫瘤壞死因子α、白細胞介素6與微量白蛋白尿的關系研究[J]. 中國醫(yī)師進修雜志,2010, 33(31)： 51-2.

[18]Wada J, Makino H. Inflammation and the pathogenesis of diabetic nephropathy[J]. Clin Sci (Lond), 2013, 124(3/4)： 139-52.

[19]Fallahzadeh MK, Dormanesh B, Sagheb MM, et al. Effect of addition of silymarin to renin-angiotensin system inhibitors on proteinuria in type 2 diabetic patients with overt nephropathy： a randomized, double-blind, placebo-controlled trial[J]. Am J Kidney Dis, 2012, 60(6)： 896-903.

Clinical significance of serum homocysteine detection in diabetic nephropathy

WANG Dongmei, ZHANG Qiubo
Maoming Petrochemical Industry Hospital, Maoming 525011, China

ObjectiveTo study the serum homocysteine (Hcy) level in diabetic nephropathy patients and the its correlation of the inflammatory factors.MethodsFrom February 2012 to August 2012, a total of 160 patients with type 2 diabetic nephropathy were selected in our hospital, according to the urinary albumin excretion rate and serum creatinine level, which is divided into diabetes mellitus group (DM group), early diabetic nephropathy (EDN) group, diabetic nephropathy group(CDN) and renal failure (CRF) group, 40 cases of healthy physical examination as the control group, comparing the patients’Hcy level and their biochemical index in the five group patients, to analyze the correlation between the Hcy level and the inflammatory factor, such as IL-6, IL-1 TNF-α and hsCRP.ResultsGLU、HbA1c、UREA、Cr、TP、ALB、TCH and TG in the five group patients had no significant difference (P＜0.01), the five patients of Hcy comparative differences were statistically significant (F=27.452, P＜0.01), the inflammation indicator in the five patients, including hsCRP, TNF-α, IL-1 and IL-6 comparison had significant difference (P＜0.01), the serum Hcy levels had significant positive correlation with hsCRP (r=0.624,P＜0.01), the serum Hcy levels had significant positive correlation with TNF-α (r=0.557, P＜0.01), the serum Hcy levels had significant positive correlation with IL-1 (r=0.568, P＜0.01), serum Hcy levels had significant positive correlation with IL-6 (r=0.417, P=0.017).ConclusionHcy plays a great important role in the progression of diabetic nephropathy, it can be used as the important indexes for evaluation of renal vascular injury and disease progression in DN patients, and has significant positive correlation with hsCRP, IL-1, IL 6 and TNF-α.

serum homocysteine; diabetic nephropathy; interleukin 1; interleukin 6; tumor necrosis factor-α

2017-02-06

王冬梅，E-mail： dongmei0118@126.com；