miRNA?135a在肝癌組織中的表達及臨床意義

李文宏 曾憲成 王捷

miRNA?135a在肝癌組織中的表達及臨床意義

李文宏1曾憲成2王捷3*

目的探討miRNA?135a（miR?135a）在肝癌組織中的表達及其臨床意義。方法采用實時熒光定量PCR檢測20例肝癌組織及其癌旁組織中miR?135a的表達水平，并通過脂質體介導的方法將miR?135a模擬物（miR?135amimics）轉染肝癌細胞株HepG2，采用實時熒光定量PCR測定轉染后細胞中miR?135a的表達水平；通過平板克隆實驗和MTT法分別檢測轉染后細胞克隆形成率和存活率的變化，并對miR?135a調控相關靶細胞的基因表達水平進行檢測，觀察miR?135a在肝癌細胞維持正常功能中的作用。結果通過對20例肝癌組織及其癌旁組織中miR?135a的表達水平進行檢測，結果miRNA?135a的表達在正常組織中相對更高，且兩組之間存在顯著性差異（P＜0.05）；與陰性對照組比較，轉染miR?135amimics后HepG2細胞中miR?135a表達水平顯著提高（P＜0.05），而形成單克隆能力和細胞存活率均顯著下降（P＜0.05），同時轉染組細胞中與miR?135a細胞調控相關靶基因FOS、PI3、Jak2、Stat3的mRNA表達量相較于NC組均顯著降低（P＜0.05），表明miR?135a表達提高后抑制細胞形成單克隆能力并降低存活率。結論miR?135a在正常組織和肝癌組織中差異表達，同時當miR?135a表達提高時抑制肝癌細胞形成單克隆能力和降低細胞存活率，表明miR?135a可能通過一些相關靶基因直接或間接調控HepG2肝癌細胞的存活，在肝癌的發生過程中可能起到作用，miR?135a可能成為臨床治療肝癌和預后的重要靶點。

miR?135a；HepG2細胞；miR?135amimics；肝癌

前言

微小RNA（microRNA）是近年在真核生物中發現的一類高度保守的內源性RNA，在個體發育、細胞增殖和凋亡、腫瘤發生等過程中發揮重要的調控作用［1，2］，它主要通過與靶mRNA特異性堿基配對引起靶mRNA的降解或抑制其翻譯，同時它能調節基因的轉錄后表達［3］，參與發育、造血、器官形成、細胞增殖和凋亡，和腫瘤的發生過程［4］。……