一種豬溶菌酶來源的抗菌六肽的分離鑒定及其性質

朱德偉，蔡國林，陸健

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一種豬溶菌酶來源的抗菌六肽的分離鑒定及其性質

朱德偉1,2,3，蔡國林1,2,3，陸健1,2,3

1江南大學工業生物技術教育部重點實驗室，江蘇無錫 214122 2江南大學糧食發酵工藝與技術國家工程實驗室，江蘇無錫 214122 3江南大學生物工程學院，江蘇無錫 214122

朱德偉, 蔡國林, 陸健. 一種豬溶菌酶來源的抗菌六肽的分離鑒定及其性質. 生物工程學報, 2017, 33(6): 1046–1056.Zhu DW, Cai GL, Lu J. Purification, identification and characterization of an anti-microbial hexapeptide from Sus scrofa lysozyme. Chin J Biotech, 2017, 33(6): 1046–1056.

為提高豬溶菌酶 (lysozyme，SSL) 的抗革蘭氏陰性菌活性，將其進行了不同蛋白酶的水解，選擇抗革蘭氏陰性菌效果最好的水解產物，利用凝膠過濾色譜和反相制備色譜進行分離，對其功能成分進行液質聯用鑒定。對分離得到的物質進行抗菌活性驗證和生物信息學的分析，并在此基礎上對抗菌物質的殺菌機理進行了探討。結果表明，胰蛋白酶的水解產物具有較高的殺滅革蘭氏陰性菌的活性，進一步分離純化得到了具有抗革蘭氏陰性菌活性的六肽A-W-V-A-W-K。經化學合成驗證，該六肽既保留了SSL的部分抗菌活性，也具備殺滅多種革蘭氏陰性菌的能力。進一步分析發現其位于SSL分子C端的一個螺旋-回環-螺旋的結構中，并由此推測其殺菌機理是通過改變細胞膜的滲透性，進而使細胞內溶物流出而造成細胞死亡，而抗菌實驗也驗證了這一推測。該抗菌肽的發現為后續提高SSL的抗菌活性提供了理論依據。

豬溶菌酶，大腸桿菌，抗菌肽，抗生素，膜滲透性

由于近年來食品安全事件的頻發以及飼用抗生素濫用問題的日益凸顯，尋求安全高效的飼用抗生素替代品已經刻不容緩?！?br>