人參中總皂苷含量測定的研究

2017-06-29 09:28:59陳薇薇

食品界 2017年6期

陳薇薇

藥材與試劑

5年生園參，樣品經50℃烘干粉碎后（過40目篩），密封保存備用。

甲醇、乙醚、無水乙醇、正丁醇、濃硫酸、香草醛、氯仿；以上試劑均為國產分析純，實驗用水均為蒸餾水。

人參皂苷 Re 對照品購自中國藥品生物制品檢驗所。

儀器與設備

TU-1810 型紫外分光光度計（北京普析通用儀器）。

方法

對照品溶液的制備。取人參皂苷 Re 對照品 20mg，精密稱定，加甲醇溶解，定容至 10ml，搖勻、濾過，即得。

供試品溶液的制備。取供試品粉末約 1.0g（細粉），精密稱定，用中性濾紙包好，置索氏提取器中，加入乙醚47左右微沸回流提取1h，棄去乙醚液，供試品藥包揮干溶劑，加入甲醇浸泡過夜，次日再加入適量甲醇，90℃微沸回流提取，控制滴速 100～120滴/min，虹吸次數5～6次/h，回流3次，每次2h，以人參皂苷提盡為準（定性鑒別為陰性），合并甲醇提取液，回收溶劑，少量甲醇提取液置蒸發皿中，水浴蒸干。蒸餾水溶解提取物，加水30ml置分液漏斗中，用水飽和正丁醇50ml進行萃取，共4次。取上層液蒸干，加甲醇溶解后，轉移至10ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻、濾過即得。

人參總皂苷提取定性鑒別。供試品回流提取3次以后，取索式提取器中載供試品瓶中的溶液少量點于硅膠G薄層后的下層溶液，用10%硫酸乙醇顯色，將薄層板置通風櫥內，噴10% 硫酸乙醇溶液，105℃ 加熱。

標準曲線的繪制。精密吸取人參皂苷Re對照品 10μl、20μl、30μl、40μl、60μl 置具塞玻璃試管中，水浴揮干甲醇。分別加入8%香草醛無水乙醇試液0.5ml，72%硫酸試液 5ml，充分振蕩搖勻后置60℃恒溫水浴鍋上加熱10min，立即用冰水冷卻10min，搖勻。以試劑做空白，照分光光度法于544nm處分別測定吸光度，以吸光度為縱坐標，對照品取樣量為橫坐標繪制標準曲線。

穩定性考察。精密吸取樣品溶液20μl，按3.4項下方法顯色，并分別在顯色后0、10、20、30min測定吸光度，計算樣品中的總皂苷含量。

精密度。（1）重復性。精密吸取同一供試品溶液20μl，按方法顯色，連續測定5次，計算樣品中的總皂苷含量。

（2）重現性。精密吸取同一供試品溶液20μl，連續測定5次，按方法顯色，計算樣品中的總皂苷含量。

回收率。精確吸取供試品溶液20μL，平行5份，分別置于具塞試管中，分別精密加入Re對照品溶液（2mg/mL）20μL、30μL、40μL、50μL、60μL，計算回收率。

樣品含量測定。取樣品粉末約1.0g，精密稱定，平行稱定3份，制備供試品溶液，測定吸光度，計算樣品中的總皂苷含量。

試驗結果與分析

人參總皂苷提取定性鑒別。無紫紅色斑點（總皂苷陽性應為紫紅色斑點）。結果表明，樣品中人參總皂苷已提取完全。

線性范圍。總皂苷測定的標準曲線為 y=0.0110x-0.0145，測定方法在20至120μg范圍內線性關系較好，相關系數 r2=0.9998。

穩定性。

由上表可知，樣品顯色后在30min內的相對標準偏差為2.35%，在 30min 內樣品的穩定性較好，溶液顯色后應在30min內測定。

精密度。實驗結果見表2和表3。

由上表可知，重復性實驗的標準偏差為0.41%，重現性實驗的相對標準偏差為1.45%，說明本試驗的精密度較好。