CIK細胞對一線化療后晚期非小細胞肺癌維持治療的療效分析

王秀文 易基群 梁繼珍 潘兆軍 朱 平

?

CIK細胞對一線化療后晚期非小細胞肺癌維持治療的療效分析

王秀文 易基群 梁繼珍 潘兆軍 朱 平

目的 探討細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK) 維持治療一線化療后晚期非小細胞肺癌(NSCLC)的療效及安全性。方法 收集96例ⅢB～Ⅳ非小細胞肺癌患者，一線治療為4～6個周期的含鉑兩藥方案化療，將療效達穩定或以上的患者隨機分兩組，一組給予CIK免疫治療，一組給予支持治療，比較兩組的PFS、有效率、外周血T淋巴細胞亞群、KPS評分及評估安全性。結果 CIK組和對照組的中位PFS分別為8.0個月(95% CI 7.3～8.7)和6.0個月(95% CI 4.8～7.2)(P=0.002)。CIK組疾病控制率為81.25%，顯著高于對照組的62.50%(P<0.05)。CIK治療組患者外周血CD3+、CD3+/CD4+細胞比率較治療前顯著上升，對照組T淋巴細胞亞群沒有變化。CIK 細胞治療后患者KPS 評分為(71.53±7.96)分，較治療前顯著提高 (P<0.05)。CIK 治療組中3例出現一過性發熱，3例皮疹，2例肌肉痛。結論 CIK維持治療一線化療后穩定的晚期非小細胞肺癌患者，可提高PFS及近期疾病控制率，改善免疫功能及生活質量，安全性好。

CIK；非小細胞肺癌；維持治療

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:473～476)

化療是晚期NSCLC的主要治療手段[1]，傳統治療模式是患者先經4～6個周期的一線化療，復發后再接受二線化療。但50%～60%的患者因疾病進展時體力狀態變差而無法接受二線化療[2]。對完成4～6個周期的一線化療后疾病無進展，繼續治療可能推遲疾病進展、延長生存期和改善生活質量[3]。

單藥維持治療的不良反應遠小于含鉑兩藥方案，耐受性好，其療效得到了多項臨床研究的肯定[4]。除細胞毒及分子靶向藥物的維持治療外，過繼免疫治療備受關注。CIK源于 CD3+和 CD56+T 細胞，同時具備 T 淋巴細胞的抗腫瘤活性和 NK 細胞的殺傷活性。CIK/DC-CIK被廣泛用于肝癌、乳腺癌、胃癌、結腸癌、腎細胞癌等，并取得初步成效[5]。針對CIK治療的低毒高效特點，本研究對晚期NSCLC一線化療后穩定的患者進行CIK維持治療研究，探討CIK維持治療對該類患者的免疫功能、療效及安全性的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2010年3月至2013年3月在本院腫瘤科初治且無手術指征的ⅢB～Ⅳ期NSCLC患者,采用標準的長春瑞濱、吉西他濱、紫杉醇、多西他聯合賽順鉑/卡鉑等方案一線化療，且4～6個周期化療后無進展(即CR+PR+SD)入組，共96例。入組患者隨機分兩組，患者的一般情況見表1。兩組患者在年齡、性別、分期以及病理類型等方面差異無顯著。患者均經組織病理學確診為肺癌，KPS評分≥50分，預計生存期>3個月，治療前血常規、心電圖正常，肝腎功能各指標正常。本臨床應用程序均經醫院倫理委員會審查批準，接受生物治療患者均簽署知情同意書。

表1 兩組患者的臨床資料/例

1.2 方法

1.2.1 CIK細胞的制備及回輸 CIK組患者于清晨空腹狀態下抽取患者外周血80 ml，肝素抗凝，在符合cGMP標準的實驗室，用Ficoll淋巴細胞分離液分離并收集單個核細胞。用自體血清培養基培養，加IFN-γ1 000 U/ml，置于37 ℃、5%CO2孵箱中培養，24 h后加入IL-2 1 000 U/ml 和抗CD3單抗50～100 ng/mL。

此后每2～3天更換培養液并補加IL-2。培養至第8 天時取部分細胞進行細菌及霉菌檢測，如結果陰性則繼續培養。第13 天檢測細胞殺傷活性，用臺盼藍染色計數，總數達2×109以上后收集細胞，懸浮于1%白蛋白生理鹽水中回輸，回輸第1 天起每日皮下注射rhIL-2增強CIK細胞活性。

1.2.2 維持治療與隨訪 維持治療在4～6個周期一線化療結束后2周進行，實驗組每例患者治療2個療程，每療程回輸細胞總數>1×1010。每個周期中分5 次于培養的第15、17、19、21、23天回輸給患者；對照組患者在化療后給予一般對癥支持治療。療程間隔15天。治療結束后隨訪觀察1年。

1.2.3 觀察指標 檢測外周血T淋巴細胞表型：化療結束后2周及CIK治療2個療程結束后2周采集患者外周血2 ml，Ficoll密度梯度離心法分離淋巴細胞，流式細胞儀檢測T 細胞亞群變化。生活質量評估：以Karnofsky為標準比較化療后2周與CIK細胞免疫治療結束后2周患者的生活質量。

1.3 評價療效

48例患者均可評價療效，通過 CT、MRI、PET-CT等檢查進行療效評價，每3個月復查評估，有病情進展隨時進行療效評價。2個周期的CIK細胞維持治療后影像學評價按 RECIST 評價標準分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、疾病穩定(SD)和疾病進展(PD)。以CR+PR計算客觀有效率;以CR+PR+SD計算疾病控制率。無進展生存期(PFS)定義為自首次CIK維持治療開始至疾病進展或無法耐受不良反應。觀察評估時間至2013年2月。

1.4 隨訪及統計學分析

2 結果

2.1 療效評價

2個周期CIK細胞治療結束后經影像學評價，CIK治療組完全緩解2例，13例部分緩解，17例穩定，客觀緩解率(ORR)與對照組比較無顯著差異。但CIK治療組疾病控制率(DCR)較對照組明顯提高，存在顯著性差異(P<0.05)(表2)。

表2 近期療效比較/例

與治療前比較，*為P<0.05。

48例患者中有3例未完成2個療程的CIK細胞治療。CIK治療組的中位PFS是8.0個月(95% CI 7.3～8.7)，對照組的中位PFS是6.0個月(95% CI 4.8～7.2)，兩者的生存曲線存在顯著性差異(P=0.002)(圖1)。CIK組的PFS時間比對照組長。

圖1 兩組患者無進展生存時間曲線

2.2 外周血淋巴細胞亞群的變化

48例患者中有3例未完成2個療程的CIK細胞輸注，每個療程細胞回輸數量在1.0×1010以上。CIK細胞維持干預治療后患者CD3+、CD3+/CD4+細胞亞群比率較干預前提高，存在統計學差異(P=0.002,P=0.008)，CD3+/CD8+細胞亞群比率在CIK治療后提高，但差異無統計學意義(P=0.072)。對照組治療前后CD3+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+細胞亞群百分數比較差異無統計學意義(表3)。

2.3 CIK治療前后肺癌患者生活質量變化

CIK組治療前后48 例肺癌患者的KPS評分為(64.98±9.46)分和(71.53±7.96)分，差異有統計學意義(P<0.05)，CIK治療后患者體力狀況改善；而對照組的48例患者治療前后的 KPS 評分為(65.72±7.49)分和(64.8±8.76)分，無統計學差異。

2.4 CIK細胞治療的安全性評價

CIK細胞回輸過程中及回輸后最常見的不良反應為發熱，共3例，以低熱為主，自行緩解或對癥處理后緩解，未出現高熱、 寒戰。3例出現皮疹，2例出現肌肉酸痛，未予處理自行緩解，未出現明顯肝腎功能異常、骨髓抑制等不良反應。

3 討論

肺癌作為發病率和病死率最高的惡性腫瘤，大部分為非小細胞肺癌，其中有相當部分患者在確診時已失去手術機會[6]。以鉑類為基礎聯合第三代化療藥物是目前臨床上晚期非小細胞肺癌的一線治療方案。多項大規模臨床試驗和Meta分析結果表明，不同的一線方案在總體生存率及有效率方面并無顯著性差異[7]。NSCLC一線標準化療方案已經達成共識，但療效已達到平臺。NSCLC患者經一線標準化療而且獲得客觀緩解或疾病穩定后進行維持治療，已獲得廣泛的認可。理想的維持治療藥物應具備單藥治療有效、不良反應少、使用方便等特點。CIK細胞治療是近年發展起來的腫瘤過繼免疫治療的全新策略[8]，CIK 細胞能調節和增強患者自身免疫功能，抑制腫瘤生長和清除殘留微小病灶的作用，可以有效提高腫瘤的生存率和治愈率，防止腫瘤復發、轉移[9]。國內外的實驗結果證實，CIK細胞治療具有毒副反應少和延長生存期等優點，是1種低毒有效的治療[10-11]。Hontscha 等[10]對多項臨床試驗歸納發現，CIK治療的384 例惡性腫瘤患者中，24例獲得完全緩解，27 例患者部分緩解。多項研究發現DC-CIK或CIK細胞聯合化療用于晚期非小細胞肺癌患者，可以提高化療的臨床療效，延長PFS，毒副反應少，提高生活質量[11]。鑒于CIK細胞治療在晚期SNCLC的療效及低毒的特點，DC-CIK或CIK細胞免疫治療用于維持治療成為肺癌研究的新熱點。

本研究顯示一線化療后穩定的晚期非小細胞肺癌經CIK細胞治療2個周期，CIK治療組疾病控制率較對照組明顯提高，多數接受CIK治療的患者疾病維持穩定，羅虎等[12]亦報告CIK治療顯著提高肺癌患者治療的有效率及疾病控制率。本研究中CIK組的PFS時間較對照組延長2個月，存在統計學差異。Runmei 等[13]報道CIK聯合化療組比單純化療組治療晚期NSCLC的中位PFS顯著提高(13 vs 6個月)。Shi 等[14]研究 DC-CIK 細胞用于晚期非小細胞肺癌接受常規的兩藥聯合方案化療后的維持治療，結果顯示DC-CIK 維持治療可以延長 PFS(3.20 vs 2.56個月，P<0.05)，該實驗與本研究都表明晚期肺癌化療后進行CIK維持治療有效地提高PFS。本研究發現CIK治療后患者的CD3+、CD3+/CD4+細胞亞群百分率明顯升高，外周血T 細胞亞群發生變化，與治療前比較差異有統計學意義，對癥治療組無顯著改變，表明患者治療后免疫功能得到改善。Congguo等[15]研究發現肺癌患者CIK治療干預后4組患者T淋巴細胞亞群百分數均出現顯著提高，免疫功能增強，與本研究結果一致。同時在本研究中48例肺癌患者CIK治療后的 KPS 評分較治療前也有顯著提高，表明CIK治療明顯改善患者的生活質量，是CIK治療的優勢所在。CIK治療組少數患者出現發熱、皮疹、肌肉痛等，均易緩解，未出現肝腎功能、骨髓抑制等不良反應，安全性高，耐受性好。

表3 48例患者治療前后外周血T細胞表型變化

注：與治療前比較，*為P<0.05。

綜上所述，CIK細胞維持治療一線化療后穩定的晚期肺癌患者能夠顯著提高其近期疾病控制率，延長PFS，改善免疫功能和生存質量，安全性好。CIK細胞維持治療作為1種新的治療手段可能是未來晚期肺癌治療的方向，推薦用于常規4～6個周期化療結束穩定的晚期肺癌患者。

[1] Toh CK.The changing epidemiology of lung cancer 〔J〕.Methods Mol Biol，2009,472:397-411.

[2] Stinchcombe TE,Socinski MA.Treatment paradigms for advanced stage non-small cell lung cancer in the era of multiple lines of therapy〔J〕.J Thorac Oncol,2009,4(2):243-250.

[3] Paz-Ares LG,Altug S,Vaury AT,et al.Treatment rationale and study design for a phase Ⅲ,double-blind,placebo-controlled study of maintenance pemetrexed plus best supportive care versus best supportive care immediately following induction treatment with pemetrexed plus cisplatin for advanced nonsquamous non-small cell lung cancer〔J〕.BMC Cancer,2010,10:85.

[4] Perol M,Chouaid C,Perol D,et al.Randomized,phase Ⅲ study of gemcitabine or erlotinib maintenance therapy versus observation,with predefined second-line treatment,after cisplatin-gemcitabine induction chemotherapy in advanced non-small-cell lung cancer〔J〕.J Clin Oncol,2012,30(28):3516-3524.

[5] Helms MW,Prescher JA,Cao YA,et al.IL-12 enhances efficacy and shortens enrichment time in cytokine-induced killer cells immunotherapy〔J〕.Cancer Immunol Immunother,2010,59(9):1325-1334

[6] Jemal A，Bray F，Center MM，et al.Global cancer statistics〔J〕.CA Cancer J Clin，2011，61(2):69-90.

[7] Scagliotti GV,De Marinis F,Rinaldi M,et al.Phase Ⅲ randomized trial comparing three platinum-based doublets in advanced non-small-cell lung cancer〔J〕.J Clin Oncol,2002,20(21):4285-4291.

[8] Stroncek D,Berlyne D,Fox B,et al.Developments in clinical cell therapy〔J〕.Cytotherapy，2010,12(3):425-428.

[9] Li H,Wang C,Yu J,et al.Dendritic cell activated cytokine-induced killer cells enhance the anti-tumor effect of chemotherapy on non-small cell lung cancer in patients after surgery〔J〕.Cytotherapy,2009,11(8):1076-1083.

[10] Hontscha C，Borck Y，Zhou H，et al.Clinical trials on CIK cells:first report of the international registry on CIK cells(IRCC)〔J〕.Cancer Res Clin Oncol，2011,37(2):305-310.

[11] Yuanying Y,Lizhi N,Feng M,et al.Therapeutic outcomes of combining cryotherapy,chemotherapy and dc-cik immunotherapy in the treatment of metastatic non-small cell lung cancer〔J〕.Cryobiology,2013,67(2):235-240.

[12] 羅 虎，宮 亮，陳永峰，等.CIK維持治療中晚期肺癌的臨床觀察及影響因素分析〔J〕.第三軍醫大學學報,2013，35(6):569-572.

[13] Runmei L,Changli W,Liang L,et al.Autologous cytokine-induced killer cell immunotherapy in lung cancer:a phase ii clinical study〔J〕.Cancer Immunol Immunother,2012,61(11):2125-33.

[14] Shi SB,Ma TH,Li CH,et al.Effect of maintenance therapy with dendritic cells:cytokine-induced killer cells in patients with advanced non-small cell lung cancer〔J〕.Tumori,2012,98(3):314-319.

[15] Congguo J,Xiaoqun C,Jia L,et al.Moderating effects and maintenance of lung cancer cellular immune functions by cik cell therapy〔J〕.Asian Pacj Cancer Prev,2013,14(6):3587-92.

(編輯：吳小紅)

Effect of Cytokine-induced Killer Cells in Maintenance Therapy of Patients withAdvanced Non-small Cell Lung Cancer after Effective First-line Chemotherapy

WANG Xiuwen,YI Jiqun,LANG Jizhen,et al.

Guangzhou Red Cross Hospital,Medical College,Jinan University,Guangzhou,510220

Objective To evaluate the safety and effectiveness of cytokine induced-killer cells in maintenance therapy of advanced non-small cell lung cancer after effective first-line chemotherapy.Methods After 4～6 cycles of the 2-drug regimen treatment with platinum,the 96 patients with advanced non-small cell lung cancer in phase ⅢB or Ⅳ reached stable or much better condition.The patients were then randomly divided into 2 groups.One group was treated with CIK therapy(CIK group),and the other was treated with optimal supportive care(control group).Progression-free survival(PFS),therapeutic effects,quality of life(Karnofsky score),the changes of immune system including subsets of T cells and side effects were compared between the 2 groups.Results The median progression-free survival of the CIK group and the control group was 8.0 months(95% CI 7.3～8.7) and 6.0 months(95% CI 4.8～7.2)(P=0.002),respectively.The disease control rate(DCR) were 81.25% in the CIK group，which was significantly higher than those of the control group(62.50%,P<0.05).The ratios of CD3+ and CD3+/CD4+T cells significantly increased(P<0.05) after CIK cells therapy,while there was no significant change in the control group.KPS score significantly increased in the CIK group,which was 71.53±7.96(P<0.05).In CIK group,fever was fond in 3 cases,skin rash in 3 cases,and muscular aches in 2 cases.Conclusion The maintenance therapy of CIK cell immuntherapy is safe and effective for advanced non-small cell lung cancer patients after chemotherapy.It can improve PFS,DCR,quality of life and the immune functions of patients.

Cytokine-induced killer cells;Non-small cell lung cancer;Maintenance therapy

廣東省科技計劃項目[編號：(2011)70號-85]

510220 廣州市紅十字會醫院，暨南大學醫學院附屬廣州紅十字會醫院

易基群

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.03.037

R734.2

A

1001-5930(2017)03-0473-04

2016-04-25

2016-12-15)