聯合檢測母血HbF、AFP值在預測胎母輸血綜合征中的應用價值

劉瑩

【摘要】 目的：探討聯合檢測母血胎兒有核紅細胞（HbF）、甲胎蛋白（AFP）值在預測胎母輸血綜合征中的應用價值。方法：選取2015年5月-2016年11月間本院門診產檢的孕產婦178例，采用KB法檢測母血HbF水平，ELISA法檢測母血AFP水平，依據分娩后檢查結果為標準將所有孕產婦分為綜合征組和非綜合征組，統計分析所有孕產婦母血HbF、AFP水平及不同方法預測胎母輸血綜合征發生的情況。結果：本研究分娩結果顯示，23例（12.92%）發生胎母輸血綜合征，綜合征組母血HbF、AFP水平明顯高于非綜合征組，兩組比較差異有統計學（P<0.05）。ROC曲線分析結果顯示，單獨檢測母血HbF并以>3%為界限預測胎母輸血綜合征的敏感度、特異度、準確度分別為73.91%、89.68%、87.64%，單獨檢測母血AFP并以>1000 ng/mL為界限，敏感度、特異度、準確度分別為73.91%、90.97%、88.76%，兩者聯合檢測時，敏感度、特異度、準確度分別為100%、96.77%、97.19%，兩者聯合檢測高于兩者單獨檢測，差異有統計學差異（P<0.05）。結論：胎母輸血綜合征的發生與孕產婦產前母血HbF、AFP水平有關，檢測上述因子水平在預測胎母輸血綜合征中具有良好的敏感性、特異性和準確性，且兩者聯合檢測具有更好的預測效能，有利于指導防治該病。

【關鍵詞】 母血； 胎兒有核紅細胞； 甲胎蛋白； 預測； 胎母輸血綜合征

【Abstract】 Objective：To discuss the application value of joint detection in maternal blood HbF and AFP to predict fetomaternal transfusion syndrome.Method：From May 2015 to November 2016，178 maternal woman at our outpatient were selected，KB test was used to test the HbF level of maternal blood，ELISA was used to detect the AFP level of maternal blood，all maternal woman were divided into syndrome group and non-syndrome group according to the inspection result of after delivery，the efficiency of two methods to predict fetomaternal transfusion syndrome were analyzed.Result：After delivery，23 cases（12.92%）were diagnosed as fetomaternal transfusion syndrome，the blood HbF and AFP level of syndrome group were higher than that of non-syndrome group，the differences were statistic significant（P<0.05）.ROC curve analysis results showed that the sensitivity，specificity and accuracy of solely detected the maternal blood HbF（limited by if >3%）to predicted fetomaternal transfusion syndrome were 73.91%，89.68%，87.64%，the sensitivity，specificity and accuracy of solely detected the maternal blood AFP（limited by if >1000 ng/mL） were 73.91%，90.97% and 88.76%，the sensitivity，specificity and accuracy of joint detection were 100%，96.77% and 97.19%，which were higher than that of single detected，the differences were statistically significant（P<0.05）.Conclusion：The HbF and AFP level of maternal blood is associated with fetomaternal transfusion syndrome，both of which predict fetal blood transfusion syndrome has good sensitivity，specificity and accuracy，but the joint detection has better prediction performance and is helpful to guide the prevention and control of the fetomaternal transfusion syndrome.

【Key words】 Maternal blood； Fetus nucleated red cells； Alpha fetal protein； Predicting； Fetomaternal transfusion syndrome

First-authors address：Xiaolan Peoples Hospital of Zhongshan，Zhongshan 528415，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.13.013

胎母輸血綜合征是臨床上一組類似輸血反應的臨床癥候群，可引起胎兒貧血和發育受阻，其病死率高達33%～50%，嚴重影響母嬰的身體健康和生命安全。目前，胎母輸血綜合征的治療關鍵在于及早發現和治療，但其發病較為隱匿且缺乏特異性的先驅癥狀和診斷標準，給臨床診治該疾病帶來了嚴峻困難，故如何有效預測其發生對防治該疾病具有重要的臨床意義[1]。有研究顯示，甲胎蛋白（AFP）是一種主要來自胚胎肝細胞的糖蛋白，與胎盤屏障的完整性有關，其水平變化可有效反映母嬰間的健康狀況[2]。母血胎兒有核紅細胞（HbF）水平是指胎兒紅細胞進入母體血循環的情況，有研究表明HbF的水平可提示胎兒于母體中失血的程度[3]。對此，本研究通過檢測疑似胎母輸血綜合征的孕產婦母血中的HbF、AFP水平，以分娩結果為對照，探討不同檢測方法對胎母輸血綜合征預測的效能，以尋找一種準確、有效、快速預測該疾病的手段，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年5月-2016年11月期間于本院門診產檢的孕產婦178例為研究對象，（1）納入標準：①胎兒監護出現正弦波、胎心基線變異減少、晚期減速者[4]；②胎動減少或消失者；③本人或其家屬簽署知情同意書的孕產婦；④臨床癥狀、病史、超聲和血尿常規等檢查疑似胎母輸血綜合征，且均為單胎的初產婦。（2）排除標準：①惡性腫瘤者；②巴氏水腫兒者；③精神病病史或腦部嚴重性疾病者；④拒絕或中途退出本次研究者。依據分娩后檢查結果將所有孕產婦分為綜合征組（23例）和非綜合征組（155例）。其中綜合征組年齡21～43歲，平均（31.89±5.81）歲；孕周33～41周，平均（37.01±2.32）周；陰道分娩4例，剖宮產19例；足月產17例，早產6例。非綜合征組年齡22～42歲，平均（31.47±5.73）歲；孕周33～41周，平均（37.21±2.37）周；陰道分娩31例，剖宮產124例；足月產110例，早產45例。兩組孕產婦年齡、孕周、生產方式等一般資料比較差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。本次研究已經本院倫理委員會審批且通過，所有資料均收集完整且來源真實可靠。

1.2. 方法 所有孕產婦均給予紅細胞酸洗脫試驗法（KB）檢測母血HbF水平，即于孕14、30、36抽取孕產婦左上臂靜脈血8 mL，置入無菌抗凝試管中，取4 mL母血常規制作涂片并自然干燥1 h后用80%乙醇固定5 min，用檸檬酸鹽抗凝血，在4 ℃冰箱內保存3 d后置于酸性緩沖液（磷酸鹽檸檬酸，37 ℃，pH 3.3）中5 min，流水沖洗，待干后在蘇木素染色液中染白細胞1 min，加入0.5%伊紅染色1 min，水洗待干后鏡檢。同時取4 mL母血常規血清分離后（3000 r/min，持續12 min），取上清液采用酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測母血AFP水平（試劑盒均由湖州英創生物科技有限公司提供，所有操作均嚴格依據說明書相關規定進行）。

1.3 觀察指標及評價標準 對所有孕產婦均進行胎心監測、B超、胎動檢查，對新生兒行血常規、血色素（或引產胎兒行臍血檢查）等檢查以證實胎母輸血綜合征的發生[5]，統計分析所有孕產婦母血HbF、AFP水平及不同方法預測胎母輸血綜合征發生的情況。其中HbF紅細胞呈紅色，母體血紅細胞呈蒼白色，計數1000個紅細胞中陽性紅細胞所占百分率即為母血HbF水平。

1.4 統計學處理 使用SPSS 20.0統計軟件進行分析，計量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗；計數資料以率（%）表示，比較采用 字2檢驗，采用ROC曲線分析不同方法預測胎母輸血綜合征的效能，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組母血HbF、AFP水平比較 本研究中，分娩后檢查結果顯示有23例（12.92%）產婦發生胎母輸血綜合征，綜合征組母血HbF、AFP水平均高于非綜合征組，兩組比較差異有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.2 單獨檢測母血HbF預測胎母輸血綜合征的ROC曲線分析 結果顯示母血HbF以>3%為界限時，6例發生者漏診，16例未發生者誤診，單獨檢測其水平預測胎母輸血綜合征的敏感度、特異度、準確度分別為73.91%（17/23）、89.68%（139/155）、87.64%（156/178），見表2，圖1。

2.3 單獨檢測母血AFP預測胎母輸血綜合征的ROC曲線 結果顯示母血AFP以>1000 ng/mL為界限時，6例發生者漏診，14例未發生者誤診，單獨檢測其水平預測胎母輸血綜合征的敏感度、特異度、準確度分別為73.91%（17/23）、90.97%（141/155）、88.76%（158/178），見表3，圖2。

2.4 聯合檢測母血HbF和AFP預測胎母輸血綜合征的ROC曲線分析 結果顯示母血HbF以>3%、AFP以>1000 ng/mL為界限時，5例未發生者誤診，兩者聯合檢測其水平預測胎母輸血綜合征的敏感度、特異度、準確度分別為100%（23/23）、96.77%（150/155）、97.19%（173/178），見表4，圖3。

2.5 不同方法對胎母輸血綜合征的預測效能比較 聯合檢測母血HbF和AFP預測胎母輸血綜合征的敏感度、特異度、準確度均高于單獨檢測母血AFP或HbF，比較差異均有統計學意義（P<0.05），但單獨檢測母血AFP或HbF時兩者敏感度、特異度、準確度比較差異均無統計學意義（P>0.05），見表5。

3 討論

胎母輸血綜合征是指因某種原因胎兒血液通過胎盤時發生出血并引起胎兒貧血或母體溶血性反應的癥候群，可導致胎兒嚴重貧血、水腫，甚至死亡，其治療關鍵在于及早發現與治療[6-9]。近年來，有研究顯示，由于胎母輸血綜合征發病隱匿且缺乏特異性的先驅癥狀和診斷標準，多數胎兒在發現時已處于嚴重貧血的狀態，其病死率達30%～50%，故如何準確、有效、快速地預測該疾病的發生對指導臨床治療具有重要的臨床價值[10-13]。有研究顯示，正常情況下胎兒血液不能進入母體血循環，但當胎盤屏障受損時，可導致胎兒血液進入母體血循環引起胎兒失血及母嬰間的溶血性反應，從而導致胎母輸血綜合征的發生[14-16]。有關研究表明，甲胎蛋白（AFP）是一種主要在胎兒肝中合成的糖蛋白，可經過胎盤屏障進入母體，其水平變化可有效反映胎盤屏障的完整性[17-20]。

對此，本研究通過檢測疑似胎母輸血綜合征的孕產婦母血有核紅細胞（HbF）、AFP水平，以分娩后檢查結果為對照，發現綜合征組母血HbF、AFP水平明顯高于非綜合征組，ROC曲線分析結果顯示，單獨檢測母血HbF并以>3%為界限時，預測胎母輸血綜合征的敏感度、特異度、準確度分別為73.91%、89.68%、87.64%，單獨檢測母血AFP并以>1000 ng/mL為界限時，預測胎母輸血綜合征的敏感度、特異度、準確度分別為73.91%、90.97%、88.76%，兩者聯合檢測時，預測胎母輸血綜合征的敏感度、特異度、準確度分別為100%、96.77%、97.19%，表明胎母輸血綜合征的發生與孕產婦產前母血HbF、AFP水平有關。檢測上述因子水平在預測胎母輸血綜合征中具有良好的敏感性、特異性和準確性，這可能是由于胎母輸血綜合征在發生發展過程中，胎盤屏障被破壞而使其完整性被打破，引起AFP通過緩慢彌散以外的方式經胎盤屏障進入母體，進而使AFP直接進入母體循環而表現為母血AFP水平顯著上升。且可能由于胎盤屏障被破壞使胎兒血液可直接少量或大量迅速流入母體血循環，導致胎兒出血的發生，即表現為HbF水平上升，同時過多的胎兒血液進入母體血循環會引起母嬰間的溶血性反應，進而引起胎母輸血綜合征的發生，故檢測上述因子水平可在一定程度上預測該病的發生。

此外，本研究還發現，聯合檢測母血AFP和HbF預測胎母輸血綜合征的敏感度、特異度、準確度均高于二者單獨檢測，差異均有統計學意義（P<0.05）。表明二者聯合檢測具有更為良好的預測效能，更有利于指導該疾病的防治。在本研究中單獨檢測母血HbF時，可能由于母紅細胞與胎兒紅細胞耐酸性不同并經染色等操作，母血HbF于孕早期開始會逐漸增加，不同個體間增加的幅度存在一定的差異，檢測操作過程中易受血涂片的厚薄、人為計數主觀誤差、pH值等因素，導致了漏診誤診發生。單獨檢測母血AFP時，可能由于AFP本身能夠通過胎盤進入母血，其他如子癇前期、染色體異常等疾病可提高AFP通過胎盤進入母血的水平等原因影響其預測胎母輸血綜合征發生的準確性。但兩者聯合檢測可有效彌補兩者存在的不足，避免上述因素對胎母輸血綜合征預測效能的影響，進而提高對該疾病預測的敏感性、特異性和準確性，且兩者檢測方式均具有創傷小、操作簡便等特點，易被孕產婦接受，故聯合檢測兩者水平有利于指導對該疾病的防治。

綜上所述，胎母輸血綜合征的發生與孕產婦產前母血HbF、AFP水平有關，且兩者聯合檢測具有更好的預測效能，有利于指導對該疾病的防治。

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（收稿日期：2017-02-13） （本文編輯：周亞杰）