幾種常見野生菌多糖含量的比較

余麗 晏愛芬 張悅 高嫵媚 付瓊 字胡潤

摘要[目的]對野生食用菌中的多糖含量進行比較，為生產(chǎn)企業(yè)對多糖產(chǎn)品的開發(fā)和應(yīng)用以及消費者選擇購買食用提供參考。[方法] 以幾種常見野生食用菌為材料，采用水提醇析法進行多糖提取。選擇料液比1∶25（g∶mL），時間2 h，在溫度60 ℃下提取3次。4 ℃醇析24 h 后，經(jīng)4 000 r/min 離心20 min，去上清，將沉淀溶于水作為待測液。利用苯酚-硫酸法進行多糖含量的測定。[結(jié)果]從多糖含量的測定結(jié)果看，松茸菌最高，為7.70 mg/g；小美牛肝菌第二，為7.58 mg/g；而雞樅菌和青頭菌多糖含量差別不大。從該研究看，多糖含量高的野生菌在口感味道上更受人們喜愛，如小美牛肝菌、松茸，但同時價格也很高。說明多糖含量高低與日常生活中人們對野生菌的選擇、野生菌的價格有一定的關(guān)系。[結(jié)論]多糖含量對野生食用菌口感和鮮美味道有一定的影響。

關(guān)鍵詞野生菌；多糖；含量；測定

中圖分類號S646.9文獻標(biāo)識碼A文章編號0517-6611（2017）21-0080-03

Comparison of Polysaccharide Content of Several Common Wild Bacteria

YU Li，YAN Aifen，ZHANG Yue et al

（School of Resources and Environment， Baoshan University， Baoshan， Yunnan 678000）

Abstract[Objective] The content of polysaccharide in wild edible fungi was compared， which could provide reference for the development and application of polysaccharide products and the food selection by consumers. [Method] Several kinds of wild edible fungi were used as materials， and polysaccharide was extracted by water extraction and alcohol analysis.Material to water ratio 1∶25（g∶mL）， time was 2 h， temperature was 60 ℃， times was 3. 4 ℃ of alcoholprecipitation after 24 h ， 4 000 r/min 20 min， precipitation will dissolve in water to be checked. Determination of polysaccharide content by phenol sulfuric acid method. [Result] Results of polysaccharide content ， Tricholoma matsutake was the highest， 7.70 mg/g ，the second was Boletus speciosus，7.58 mg/g. There was little difference in the content of polysaccharides in Termitomyces striayus and Russula virescens. From the perspective of this study ， wild edible fungi with high polysaccharide content was more popular in taste and taste， such as Boletus speciosus， Tricholoma matsutake， but also has a high price. It also showed that the content of polysaccharide was related to the selection of wild bacteria and the price of wild bacteria in daily life. [Conclusion] The content of polysaccharide has a certain influence on the taste and delicious taste of wild edible fungi.

Key wordsWild bacteria；Polysaccharide；Content；Determination

保山得天獨厚的地理環(huán)境，給人們提供了豐富的野生菌資源。眾多的野生菌因其富含蛋白質(zhì)、碳水化合物、維生素及鈣、磷、鐵等礦物質(zhì)，味道鮮美，營養(yǎng)豐富，具有較高的營養(yǎng)價值和藥用價值，深受廣大消費者的喜愛，如牛肝菌、雞樅菌、松茸菌、奶漿菌等。在豐富的營養(yǎng)物質(zhì)中，多糖是一類重要的藥用真菌次級代謝產(chǎn)物，多糖及其復(fù)合物因其特殊的生物活性功能，在醫(yī)療衛(wèi)生、食品保健等領(lǐng)域都具有廣闊的應(yīng)用前景，成為天然藥物、生物化學(xué)、生命科學(xué)等領(lǐng)域的研究焦點。大量的醫(yī)學(xué)藥理研究表明，多糖類化合物具有較強的抑制癌細胞的作用，在抗衰老、抗氧化、抗病毒、增強機體免疫力等多方面也顯示出了十分重要的功能[1-4]。多糖作為一種獨特的生物效應(yīng)調(diào)節(jié)劑，對正常的細胞沒有毒副作用，早已應(yīng)用于腫瘤等疾病的臨床輔助治療和藥物治療中[5]。自20世紀(jì)70年代香菇多糖的抗腫瘤活性被日本學(xué)者千原羽田率先證實以后，食用菌多糖就引起了各界學(xué)者的廣泛關(guān)注，引發(fā)了各領(lǐng)域?qū)Χ嗵巧锘钚缘闹匾暸c研究。多糖在國際上被稱為“生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑（BRM）”，現(xiàn)已被開發(fā)成多種藥物和功能性食品添加劑。

市場上野生菌種類繁多，價格差別也很大，由于多糖作為食用真菌的代謝產(chǎn)物具有很高的食藥用價值，因此對野生菌中的多糖含量進行比較，對了解野生菌的食用價值和指導(dǎo)消費者理性消費具有一定的實用性，同時也為進一步開發(fā)利用野生菌提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1原料。

5種常見野生菌（圖1）：

奶漿菌（多汁乳菇，Lactarius volemus）；

條紋雞樅菌[黑雞樅，Termitomyces striayus（Beeli）R.Heim]；

松茸菌（Tricholoma matsutake）；

青頭菌[變綠紅菇，Russula virescens（Schaeff.ex Zant.）]；

小美牛肝菌（風(fēng)見手，Boletus speciosus Forst）。

1.1.2主要儀器及試劑。

主要儀器：755型分光光度計、恒溫水浴鍋、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、低速離心機、恒溫干燥箱、電子天平、移液槍及其他玻璃儀器。

主要試劑：葡萄糖、5%苯酚溶液（現(xiàn)配現(xiàn)用）、濃硫酸（比重1.84）、無水乙醇，以上試劑均為分析純。

1.2方法

1.2.1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線 。

1.2.1.1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。

準(zhǔn)確稱取0.1 g烘干至恒重的分析純葡萄糖粉末至燒杯中，經(jīng)多次洗滌轉(zhuǎn)入100 mL的容量瓶中并定容為濃度1.0 mg/mL的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液。

準(zhǔn)確量取上述葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)使用液：2.00、4.00、6.00、800、10.00 mL于50 mL容量瓶中，定容配制成濃度為40、80、120、160、200 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液，分別編號1、2、3、4、5。

1.2.1.2葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備。

利用苯酚-硫酸法進行多糖含量的測定：粗多糖在硫酸的作用下水解成單糖，并迅速脫水生成糖醛衍生物，與苯酚縮合成有色化合物，可用分光光度法測定樣品粗多糖含量。

具體方法為：取6支試管分別編號0、1、2、3、4、5（0號為對照），依次向編號1、2、3、4、5的試管中加入編號1、2、3、4、5的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液0.8 mL，蒸餾水1.2 mL，5%苯酚10 mL，濃硫酸5.0 mL；0號試管加入蒸餾水2.0 mL，5%苯酚1.0 mL，濃硫酸5.0 mL，然后在60 ℃水浴中反應(yīng)15 min顯色后，用755型分光光度計在波長490 nm處測定吸光度。以葡萄糖濃度（x）為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo)（y）做出葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.2多糖的提取。

綜合文獻[2，6-7]的研究，選擇料液比1∶25（g∶mL），時間2 h、在溫度60 ℃下提取3次。即分別稱取經(jīng)曬干粉碎的野生菌子實體10 g，加入250 mL蒸餾水，在恒溫水浴中浸提2 h后過濾，濾渣加入250 mL蒸餾水再重復(fù)提取2 次，將3次濾液合并，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至100 mL，冰箱中冷藏保存用于多糖的測定。

1.2.3多糖含量的測定。

取多糖提取液10 mL加入40 mL預(yù)冷（4 ℃）的無水乙醇，4 ℃醇析24 h 后，經(jīng)4 000 r/min 離心20 min，去上清，將沉淀溶于水并定容至50 mL 作為待測液。

測定時根據(jù)光密度值確定取樣的量，光密度值最好在01～0.3。為此確定松茸菌、小美牛肝菌、條紋雞樅菌取0.2 mL待測液，奶漿菌、青頭菌取0.5 mL，按葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定方法進行多糖含量的測定。用蒸餾水反應(yīng)后做對照。

2結(jié)果與分析

2.1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

用上述方法得到葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程：Y=0.005 x+0.023，R2=0.998。試驗結(jié)果見圖1。利用葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線可換算得到1 g牛肝菌的多糖量：

多糖量含量（x）=[（y-0.023）/0.005]×多糖提取液稀釋倍數(shù)×10-4（mg/g）。

2.2幾種常見野生菌多糖含量比較

利用上述方法，即熱水浸提、無水乙醇醇析沉淀、苯酚-硫酸法進行多糖含量測定，幾種常見野生菌的多糖含量見表1。

從多糖含量的測定結(jié)果看，松茸菌最高，為7.70 mg/g；小美牛肝菌第二，為7.58 mg/g。在當(dāng)?shù)匾吧羞@2種菌都深受人們喜愛，同時價格也相對較高。雞樅菌和青頭菌多糖含量差別不大。

3討論

從該試驗結(jié)果看，松茸菌多糖含量最高，為7.70 mg/g。倍受當(dāng)?shù)厝藗兿矏鄣男∶琅８尉嗵呛恳埠芨?，多糖含?/p>

為7.58 mg/g。單從多糖含量方面看，在所有受測野生菌中

松茸菌是最高的，小美牛肝菌多糖含量在受測野生菌中居第二。從該研究看，多糖含量對牛肝菌口感和鮮美味道是有一定影響的，當(dāng)?shù)鼐用裣矏坌∶琅８尉彩怯衅涓鶕?jù)的，而且多糖含量高低與日常生活中人們對野生菌的選擇、野生菌的價格有一定的關(guān)系。多糖含量高的野生菌在口感味道上更受人們喜愛，如小美牛肝菌、松茸菌，但同時也有很高的價格。松茸菌市價200元/kg以上，而小美牛肝菌也要140～160元/kg。當(dāng)?shù)仉u樅菌價格也很高，而它的鮮美主要是由于含有豐富的必需氨基酸，多糖含量相對較低。若從多糖含量考慮，雞樅菌和青頭菌相比，可以選擇相對價格較低的青頭菌。

在多糖含量的提取方法上，該試驗選擇了熱水浸提法。該方法提取多糖具有成本較低、設(shè)備簡易、穩(wěn)定性好、適用面廣、溶劑無毒無污染等優(yōu)點，已經(jīng)被實驗室、企業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域廣泛使用。利用苯酚-硫酸比色法對牛肝菌多糖含量進行測定時沒有對多糖進行純化和脫色處理，因為脫色處理會使多糖遭受損失。但使用熱水浸提法提取多糖時，由于水的極性較強，容易將樣品中的蛋白質(zhì)也一并提取出來，因此多糖提取液不易長時間儲藏。

通過幾種野生菌多糖含量的比較，可以為生產(chǎn)企業(yè)對多糖產(chǎn)品的開發(fā)和應(yīng)用提供原材料選擇的參考，同時也為消費者選擇購買食用提供參考。當(dāng)然多糖及其復(fù)合物特殊的生物活性功能的形成也不僅是多糖單方面引起的，而是一系列復(fù)雜的生化反應(yīng)完成的。這里只是從多糖含量方面進行了測定，僅供消費者參考。

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