重組禽流感病毒H5亞型二價滅活疫苗（Re-6株+Re-7株）免疫抗體監測分析

王相子 徐小艷 徐正軍 開 妍 周 偉 陳昌海

（江蘇省動物疫病預防控制中心，江蘇南京 210036）

重組禽流感病毒H5亞型二價滅活疫苗（Re-6株+Re-7株）免疫抗體監測分析

王相子 徐小艷 徐正軍 開 妍 周 偉 陳昌海

（江蘇省動物疫病預防控制中心，江蘇南京 210036）

為評估我省使用重組禽流感病毒H5亞型二價滅活疫苗（Re-6株+Re-7株）后的雞群免疫效果，更好的開展禽流感防控工作，筆者對2014-2015年全省春、秋防及日常監測所采集的規模養雞場及散養戶樣品進行了免疫抗體檢測與分析。檢測結果表明，江蘇省H5亞型高致病性禽流感Re-6株平均免疫抗體合格率為96.84%；Re-7株平均免疫抗體合格率為95.95%。大部分地區的免疫抗體效價呈現較高的一致性。種雞場的H5亞型禽流感免疫效果整體最好。2015年H5亞型高致病性禽流感Re-6株和Re-7株的免疫效果均高于2014年。

高致病性禽流感；血凝抑制試驗；免疫抗體合格率

禽流感（avian influenza，AI）在世界各地發生，具有重要公共衛生意義。高致病性禽流感被世界動物衛生組織列為必須報告的動物傳染病，我國將其列為一類動物疫病，其暴發和流行可對家禽業造成巨大的經濟損失。目前，強制免疫是我國作為防控高致病性禽流感的主要措施之一。

2014年9月開始，我省根據農業部獸醫局要求，將當時對雞群使用的重組禽流感病毒H5亞型二價滅活疫苗（Re-6株+Re-4株）替換為重組禽流感病毒H5亞型二價滅活疫苗（Re-6株+Re-7株）。為評估我省使用該疫苗后的雞群免疫效果，更好的開展禽流感防控工作，筆者對2014-2015年全省春、秋防及日常監測所采集的規模養雞場及散養戶樣品進行了免疫抗體檢測與分析。

1 材料與方法

1.1 材料

樣品來源：2014年11月～2015年11月江蘇省動物疫病預防控制中心在開展重大動物疫病春防、秋防、日常監測等工作中，隨機抽檢的雞血清樣品2372份，所檢雞群均免疫了重組禽流感病毒H5亞型二價滅活疫苗（Re-6株+Re-7株），免疫密度達100%。樣品來自全省13個市38個縣82個鄉鎮的451個場（戶）。

檢測試劑：禽流感病毒H5亞型（Re-6株）血凝抑制試驗抗原、陽性血清、陰性血清；禽流感病毒H5亞型（Re-7株）血凝抑制試驗抗原、陽性血清、陰性血清，均由哈爾濱維科生物技術開發公司提供，自配1%雞紅細胞。

1.2 方法

參照《高致病性禽流感診斷技術》GB/T 18936-2003中規定的血凝（HA）和血凝抑制（HI）試驗技術，通過血凝試驗結果配制4HAU的病毒抗原，采用血凝抑制試驗檢測血清中H5亞型高致病性禽流感免疫抗體。

1.3 結果判定

以完全抑制4個HAU抗原的血清最高稀釋倍數作為HI滴度，即血清效價。根據農業部標準，雞免疫21d后，抗體效價≥24判為免疫合格；抽檢雞群免疫抗體合格率≥70%判為合格。

2 檢測結果

共檢測雞血清樣品4742份，合格4571份，合格率96.39%。其中H5亞型Re-6株共檢測樣品2370份，合格2295份，合格率96.84%，H5亞型Re-7株共檢測樣品2372份，合格2276份，合格率95.95%。

2.1 各地區的疫苗免疫抗體合格率

在對全省13個市的免疫抗體檢測合格率進行比較后發現，全省13個市的高致病性禽流感免疫抗體合格率均高于農業部規定的70%和我省規定的80%的標準。H5亞型高致病性禽流感（Re-6株）全省平均免疫抗體合格率為96.84%；H5亞型高致病性禽流感（Re-7株）全省平均免疫抗體合格率為95.95%。詳見表1。

表1 各市免疫抗體檢測結果

2.2 不同類別雞群的免疫抗體合格率

共檢測各類養殖場戶共451個，其中種雞場11個，Re-6株共檢測樣品154份，合格153份，合格率99.35%；Re-7株共檢測樣品156份，合格153份，合格率98.08%；規模場46個，Re-6株共檢測樣品684份，合格673份，合格率98.39%；Re-7株共檢測樣品681份，合格661份，合格率97.06%；散養戶394個，Re-6株共檢測樣品1532份，合格1469份，合格率95.89%；Re-7株共檢測樣品1535份，合格1462份，合格率95.24%。詳見表2。

表2 不同類別雞群的免疫抗體檢測結果

表3 不同年份免疫抗體檢測結果

2.3 不同年份的免疫抗體合格率

2014年，全省H5亞型高致病性禽流感Re-6株共檢測樣品717份，合格690份，合格率為96.23%，Re-7株共檢測樣品723份，合格692份，合格率95.71%；2015年，全省Re-6株共檢測樣品1653份，合格1605份，合格率97.10%，Re-7株共檢測樣品1649份，合格1584份，合格率96.06%。詳見表3。

3 討論

從檢測結果來看，2014～2015年江蘇省存欄雞群的H5亞型高致病性禽流感Re-6株和Re-7株的免疫抗體合格率均達到農業部標準及我省省級標準，且免疫抗體整體水平較高，抗體水平持續平穩，說明重組禽流感病毒H5亞型二價滅活疫苗（Re-6株+Re-7株）在我省應用效果良好。

進一步對比這兩年我省13個市存欄雞群重組禽流感病毒滅活疫苗免疫效果發現，13個市的免疫抗體檢測結果之間也存在著差別。2014～2015年，13個市的H5亞型Re-6株疫苗平均免疫抗體合格率為96.84%，其中最高的市為100%，最低為87.11%；H5亞型Re-7株疫苗平均免疫抗體合格率為95.95%，其中最高的市為100%，最低為86.60%。從圖一看，首先，Re-6株與Re-7株疫苗免疫抗體合格率相比較發現，大部分地區呈現出了較高的一致性，個別地區出現兩者差異較大（免疫抗體合格率分別為97.46% 和90.68%）的情況；其次，大部分地區的免疫抗體合格率均分布在全省平均免疫抗體合格率附近，但有個別地區出現與平均免疫抗體合格率差距較大的情況。說明我省大部分地區的高致病性禽流感疫苗免疫工作正在有效地、合理地開展。

圖1 13個市重組禽流感疫苗免疫效果分布

2014～2015年，共監測來自451個養雞場（戶）的4742份樣品，其中監測種雞場11個，Re-6株平均免疫抗體合格率為99.35%，Re-7株平均免疫抗體合格率為98.08%，且每個種雞場的免疫抗體合格率均高于80%；監測商品代養雞場46個，Re-6株平均免疫抗體合格率為98.39%，Re-7株平均免疫抗體合格率為97.06%，有44個場的免疫抗體合格率高于80%，占商品代養雞場總數的95.65%；監測散養戶394個，Re-6株平均免疫抗體合格率為95.89%，Re-7株平均免疫抗體合格率為95.24%，有367戶的免疫抗體合格率高于80%，占散養戶總數的93.15%。從圖二看，首先，各類別雞群Re-6株和Re-7株免疫抗體合格率較一致；其次，三種不同類別雞群中，種雞場的H5亞型禽流感疫苗整體免疫效果較商品代養雞場、散養戶好。分析原因，種雞場和商品代養雞場多按程序免疫；而散養戶的多通過春、秋季開展的疫苗集中免疫行動進行免疫，免疫條件相對較差，因而導致有些地方出現免疫效果相對偏低的情況，因而建議有條件的地方盡量采取程序免疫的方式。

圖2 不同類別雞群免疫抗體合格率對比情況

2014年，H5亞型Re-6株免疫抗體合格率為96.23%，Re-7株免疫抗體合格率為95.71%；2015年，H5亞型Re-6株免疫抗體合格率為97.10%，Re-7株免疫抗體合格率為96.06%。比較發現，通過重組疫苗的持續使用，Re-6株和Re-7株免疫抗體合格率均有所提高，Re-6株提高了0.87%，Re-7株提高了0.35%。說明通過持續開展該疫苗的免疫，全省疫苗免疫抗體水平處于持續向好的狀態。

[1] 甘孟侯.禽流感（第二版）[M].北京：中國農業出版社，2002：181.

[2] 徐小艷.重組禽流感病毒H5亞型二價滅活疫苗免疫抗體監測與分析[J].畜牧與獸醫，2011，43（6）：50-52.