超聲提取優(yōu)選研究多葉棘豆各藥用部位鹽酸小檗堿的分布

海平 蘇雅樂(lè)其其格

摘要[目的]比較2種超聲提取工藝研究多葉棘豆莖、葉、根、種子中鹽酸小檗堿分布的不同。[方法]采用2種超聲提取工藝對(duì)蒙藥多葉棘豆莖、葉、根、種子中鹽酸小檗堿進(jìn)行提取并優(yōu)選（方法Ⅰ是先將蒙藥進(jìn)行超聲提取后放置24 h，方法Ⅱ是將蒙藥先室溫放置24 h再進(jìn)行超聲提取）。在波長(zhǎng)426 nm處用分光光度法測(cè)定，計(jì)算鹽酸小檗堿的含量和回收率。[結(jié)果]多葉棘豆莖中鹽酸小檗堿分布最多，葉、根、種子鹽酸小檗堿分布明顯減少，而2種提取工藝中方法Ⅱ優(yōu)于方法Ⅰ，加樣回收率在92.58%～110.00%，RSD在0.782 3%～0.974 9%。[結(jié)論]多葉棘豆各藥用部位鹽酸小檗堿分布不均，莖中分布明顯多，2種不同超聲提取工藝中方法Ⅱ優(yōu)于方法Ⅰ。

關(guān)鍵詞超聲提取；優(yōu)選；多葉棘豆；不同藥用部位；鹽酸小檗堿

中圖分類號(hào)S567文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)0517-6611（2017）36-0119-02

Abstract[Objective] The research aimed to compare the distribution of berberine hydrochloride in the stem， leaf， root and seed of Oxytropis myriophy by two different ultrasonic extraction techniques.[Method]Two kinds of ultrasonic extraction process were used to extract and optimize the berberine hydrochloride in the stems， leaves， roots and seeds of Oxytropis myriophy（The first technology was to extract the Mongolian medicine first by ultrasonic extraction and then placed 24 h， and the second technology was to put the Mongolian medicine at room temperature for 24 h before ultrasonic extraction.）.And calculated the content of berberine hydrochloride and recovery in 426 nm wavelength spectrophotometry.[Result]The content of berberine hydrochloride was the most in the stalk of Oxytropis myriophy， the distribution of berberine hydrochloride in leaves， roots and seeds was obviously reduced，and the second technology of extraction process was better than the first technology，the recovery rate was 92.58%-110.00%， the relative standard deviation （RSD） was 0.782 3%-0.974 9%.[Conclusion]The distribution of berberine hydrochloride is not equal in the medicinal parts of Oxytropis myriophy， and the distribution in the stems is much more significantly， and the second technology is better than the first in the two different ultrasonic extraction techniques.

Key wordsUltrasonic extraction；Optimization；Oxytropis myriophy；Different medical parts；Berberine hydrochloride

多葉棘豆，蒙古名為娜布其爾哈格-敖日道扎、查干-達(dá)可沙、達(dá)林-敖日道扎。為豆科植物多葉棘豆[Oxytropis myriophy （Pall.）DC.]的干燥全草，是常用蒙藥，具有殺粘、清熱、燥黃水、愈傷、生肌、合脈止血、消腫、軟便之功效[1]。國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)調(diào)研發(fā)現(xiàn)，對(duì)多葉棘豆的相關(guān)研究較少，已報(bào)道的化學(xué)成分主要有黃酮類[2]、木脂素類[3]、酚苷類[4]、三萜皂苷類[5]、生物堿類[6]以及多糖[7]，化合物種類和數(shù)量極為有限，藥理活性及其相關(guān)活性物質(zhì)基礎(chǔ)研究鮮見報(bào)道。鹽酸小檗堿主要用于抗炎、抗菌和解熱，其不僅可以增強(qiáng)白細(xì)胞作用，還對(duì)腫瘤（胃癌MGC803、腎癌7860和肝癌HepG2等）有較好的抑制作用[8-9]。該試驗(yàn)通過(guò)2種不同超聲提取工藝提取并測(cè)定多葉棘豆葉、莖、根、種子中鹽酸小檗堿，研究多葉棘豆中鹽酸小檗堿在各藥用部位的分布，為尋找其活性物質(zhì)提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1儀器。

FA 2004型電子天平（上海天平儀器廠）；HH-S28S型數(shù)顯恒溫水浴鍋（國(guó)華電器有限公司）；KQ-250B型超聲波清洗器（昆山市超聲波儀器有限公司）；722S型分光光度計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）。

1.1.2試劑。

無(wú)水乙醇（沈陽(yáng)市東興試劑廠）；甲醇（沈陽(yáng)市東興試劑廠）；濃鹽酸（長(zhǎng)春市化學(xué)試劑廠）；鹽酸小檗堿（中國(guó)藥品生物制品鑒定所）；以上試劑均為分析純。

1.1.3藥品。

多葉棘豆于2016年7月采集于興安盟五叉溝，室溫晾干，保存。

1.2方法

1.2.1樣品的預(yù)處理。

將干燥的多葉棘豆樣品進(jìn)行莖、葉、根、種子分開處理，再將多葉棘豆的根清洗干凈，放入烘干箱中烘干，最后用碾碎機(jī)將多葉棘豆的莖、葉、根、種子全部粉碎成樣品粉末，分別用電子天平稱取樣品5.00 g。

1.2.2標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制。

精密稱取10 mg鹽酸小檗堿對(duì)照品，置于100 mL容量瓶中，加入85 mL無(wú)水乙醇，充分?jǐn)嚢瑁渫耆芙猓偌訜o(wú)水乙醇至刻度，搖勻，此溶液濃度為0.1 mg/mL。

1.2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立。分別用移液管移取鹽酸小檗堿標(biāo)準(zhǔn)品溶液1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL置于5 mL的比色管中，標(biāo)記為1～5號(hào)，加入無(wú)水乙醇至刻度，充分搖勻，波長(zhǎng)為426 nm處以無(wú)水乙醇為空白對(duì)照，測(cè)定吸光度，以濃度（mg/mL）為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖1），得線性方程為y=12.233x-0.038 9（r=0.998 9）。

3小結(jié)

采用2種不同超聲提取工藝對(duì)多葉棘豆不同藥用部位莖、葉、根、種子的鹽酸小檗堿含量分布進(jìn)行了比較研究，結(jié)果表明，多葉棘豆的莖、葉、根、種子中鹽酸小檗堿的含量明顯不同，其中莖的含量最多，葉、根、種子的含量相對(duì)較少。說(shuō)明莖中鹽酸小檗堿分布相對(duì)多，其他部位分布相對(duì)少。多葉棘豆不同藥用部位莖、葉、根、種子的回收率也明顯不一樣，其中葉的回收率最高，莖的回收率最低，并且方法 Ⅰ 的回收率低于方法 Ⅱ 的回收率。

參考文獻(xiàn)

[1] 蒙醫(yī)學(xué)編輯委員會(huì).中國(guó)醫(yī)學(xué)百科全書·蒙醫(yī)學(xué)[M].上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1992：212.

[2] SHE G M，SUN F F，LIU B.Three new flavonoid glycosides from Oxytropis myriophylla[J].Journal of natural medicines，2012，66（1）：208-212.

[3] OKAWA M，YAMAGUCHI R，DELGER H，et al.Five triterpene glycosides from Oxytropis myriophylla[J].Chemical & pharmaceutical bulletin，2002，50（8）：1097-1099.

[4] KOJIMA K，PUREVSUREN S，NARANTUYA S，et al.Alkaloids from Oxytropis myriophylla（Pall）DC[J].Scientia pharmaceutica，2001，69（4）：383-388.

[5] 白清云.中國(guó)醫(yī)學(xué)百科全書[M].赤峰：內(nèi)蒙古科學(xué)技術(shù)出版社，1986：322.

[6] 伊希巴拉珠爾.蒙醫(yī)甘露四部.呼和浩特：內(nèi)蒙古人民出版社，2007：404.

[7] 蘇雅樂(lè)其其格，海平.多葉棘豆不同部位多糖體外抗氧化活性比較研究[J].遼寧中醫(yī)雜志，2016，10（43）：2168-2169.

[8] GHOSH R，GRAHAM H，RIVAS P，et al.Phellodendron amurense and itsmajor alkaloid compound，berberine ameliorates scopolamineinduced neurnal impairment and memory dysfunction in rats[J].Anticancer Res，2010，30：857-866.

[9] JAMES M A，F(xiàn)U H，LIU Y，et al.Dietary administyation of berberine or Phellodendron amurense extract inhibits cell cycle progressoin and Lung tumorigenesis[J].Mol Carcinog，2011，50（1）：1-7.

[10] 程華，余龍江，胡瓊月，等.分光光度法測(cè)定巖黃連不同部位總生物堿的含量[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2006，17（3）：364-365.

[11] 海平，蘇雅樂(lè)，王秀蘭.手參及其炮制品鹽酸小檗堿含量的測(cè)定[J].中國(guó)民族醫(yī)藥雜志，2009，15（3）：62-64.