青花菜不同組織氣相色譜圖譜特征

摘要 [目的]了解青花菜花冠和花莖2個不同組織的氣相色譜指紋圖譜特點。[方法]采用氣相色譜法研究了青花菜花冠和花莖氣相色譜指紋圖譜。[結果]青花菜花莖組織的氣相色譜指紋圖譜主要表現為峰1、峰2、峰3和峰4這4個峰，而在花冠中主要表現為峰1、峰2、峰3、峰4、峰5這5個峰。其中峰1、峰2、峰3、峰4為花冠和花莖的共有峰，有相同的保留時間，且峰1、峰2的面積相近，而峰3、峰4面積差異較大。[結論]青花菜不同組織的氣相色譜指紋圖譜在峰的數量上有明顯差異。

關鍵詞 青花菜；花莖；花冠；氣相色譜

中圖分類號 S635 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2017）06-0085-03

Features of Gas Chromatography Fingerprint in Different Tissues of Broccoli

WANG Dong-qun （Center of Cixi Agricultural Supervising and Testing， Cixi， Zhejiang 315300）

Abstract [Objective] The aim was to research the GC fingerprint features of scape and corolla in broccoli. [Methods] The gas chromatogram characteristics of scape and corolla in broccoli were studied by gas chromatography（GC）. [Result] The scape is mainly for the peak 1， peak 2， peak 3 and peak 4， the corolla is mainly composed of peak 1， peak 2， peak 3， peak 4 and peak 5. Peak 1， peak 2， peak 3 and peak 4 are common peaks of corolla and scape， those have the same retention time. The peak area of peak 1， peak 2 is similar， but the peak area of peaks 3 and 4 has obvious difference. [Conclusion] There are obvious differences in peak number between two different tissues in broccoli.

Key words Broccoli；Scape；Corolla；Gas chromatography

青花菜營養豐富[1]，近幾年對其相關研究也越來越多[1-3]。色譜指紋圖譜能相對全面地反映中藥的組成成分、種類及含量信息，是中藥質量標準研究的主要技術手段[4]。色譜指紋圖譜技術在蔬菜領域同樣適用[5]，但目前由于種種原因該技術在蔬菜領域的研究較少。人們在對3個不同品種的青花菜進行氣相色譜圖譜研究時，發現不同品種的青花菜有明顯不同的氣相色譜圖譜[6]，該特點在青花菜的品種區分、質量控制等領域具有廣闊的應用空間。目前對青花菜氣相色譜圖譜研究還很少，為了更深入地了解青花菜氣相色譜圖譜的特點和規律，非常有必要對其進行深入研究。

在對青花菜氣相色譜圖譜進行研究時通常會對整個青花菜進行取樣分析，忽視了青花菜不同組織如花冠和花莖氣相色譜圖譜差異。筆者用特定方法分別對青花菜的花冠和花莖進行定量檢測分析，以期掌握青花菜不同組織的氣相色譜圖譜特點和規律，為更好地研究和利用青花菜氣相色譜圖譜提供基礎性資料。

1 材料與方法

1.1 材料

2015年3月23日在慈溪市坎墩玉蘭蔬菜農場隨機抽取了品種名為“喜鵲”的青花菜樣品3個。由于該青花菜為生產晚期抽取，處于正要開花而未開花的狀態，花冠顏色微微泛黃。在實驗室分別對青花菜分花冠和花莖2取樣，3個青花菜混合，采用四分法縮份取樣，均做3個重復。選用的青花菜花冠、花莖分別見圖1、2。

主要儀器：Agilent公司6890N氣相色譜儀，配7683自動進樣器，采用火焰光度檢測器（FPD），選取DB-1701（30 m×0.32 mm×0.25 μm）作為檢測用色譜柱；IKA T18基本型高速勻漿機；TD5A-WS離心機；DSY-III氮吹儀。

主要試劑：丙酮為色譜純，乙腈為AR級。

1.2 氣相色譜條件 DB-1701色譜柱，載氣為高純氮氣，流量30 mL/min；氫氣流量為75 mL/min，空氣流量110 mL/min；柱前壓68.60 kPa，恒流方式，尾吹氮氣；進樣口溫度220 ℃，檢測器溫度25 ℃；采用不分流進樣方式，進樣量1 μL，進樣0.85 min后吹掃。柱溫程序：初始溫度100 ℃，以40 ℃/min升溫至200 ℃，再以2 ℃/min升溫至210 ℃，然后以30 ℃/min升溫至240 ℃并保留4 min，至樣品全部流出[6]。

采用保留時間定性，峰面積定量，變異系數（RSD）來判定數據穩定性。

1.3 提取與凈化 稱取25.0 g青花菜樣品置于125 mL試劑瓶中，加入乙腈50.0 mL，用勻漿機高速勻漿2 min，靜止提取30 min，充分振蕩1 min，搖勻，倒入50 mL離心管中；離心管以4 000 r/min離心5 min，吸取上層乙腈10.00 mL到10 mL帶塞玻璃試管中，用水浴80 ℃的氮吹儀吹至近干，用丙酮定容至5.0 mL[6]。

2 結果與分析

2.1 青花菜（喜鵲）不同組織的氣相色譜圖

青花菜（喜鵲）組織花冠、花莖經溶劑乙腈提取，提取液經氣相色譜儀（6890N）配火焰光度檢測器（FPD）和DB-1701毛細管柱分離檢測，分別得到圖3和圖4，為方便文字闡述，對主要的峰分別編為峰1～峰5。從圖3和圖4中可見，花莖中主要表現為峰1、峰2、峰3、峰4這4個峰，而在花冠中主要表現為峰1、峰2、峰3、峰4和峰5這5個峰。在花冠和花莖有峰1、峰2、峰3和峰4這4個保留時間相同的共有峰。峰5只在花冠中出現，而在花莖中沒有。峰4在花冠與花莖中峰高均較低。

2.2 不同組織得到的峰數量和峰面積的變化特點

花冠和花莖各做3次重復，對各峰面積進行統計，計算平均值和變異系數RSD，得到表1和表2。從表1、表2的數據比較發現，3次重復試驗的各峰面積都比較接近，花冠、花莖中各峰的面積RSD分別在4.25%～26.14%和1.29%～13.34%，可見重復試驗得到的數據比較穩定。從圖5中可見，峰1、峰2的面積在花冠和花莖中很相近，而峰3、峰4面積差異較大，且花冠中峰3、峰4面積明顯要比花莖中的大。

3 結論與討論

該試驗得出，青花菜同一組織3次重復得到的峰面積RSD比較小，可見數據穩定。通過對青花菜不同組織的氣相色譜圖譜分析表明， 花冠與花莖的氣相色譜圖譜差異明顯。青花菜不同組織在峰的數量上有明顯差異，花莖中主要表現為峰1、峰2、峰3和峰4這4個峰，而在花冠中主要表現為峰1、峰2、峰3、峰4、峰5這5個峰，且峰1、峰2的峰面積相近，而峰3、峰4面積差異較大。這也提示人們在利用青花菜作為樣本進行氣相色譜圖譜研究時，一定要考慮取樣的組織部位，最好對花冠與花莖分別制樣進行相關研究。當以整個青花菜作為研究對象時，樣品一定要充分混勻。從各峰峰面積大小來看，峰1、峰2在青花菜花冠和花莖中面積很相近，而峰3、峰4面積差異較大，且花冠中峰3、峰4面積明顯要比花莖中的大。

參考文獻

[1] 林俊城，吳秋云，高燦紅，等.青花菜硫、硒代謝競爭及其對保健功能的影響研究進展[J].中國細胞生物學學報，2011，33（4）：422-432.

[2] 陸信娟，楊峰，樊繼德.青花菜主要農藝性狀的相關分析[J].江西農業學報，2011，23（1）：49-51.

[3] 徐霞，朱智偉，應興華.西蘭花中13種有機含磷農藥在不同色譜柱上的色譜保留行為[J].理化檢驗（化學分冊），2012，48（7）：803-806.

[4] 于雪，辛瑩娟，蔣緒.色譜指紋圖譜在中藥質量控制中的應用[J].現代鹽化工，2016（3）：43-44.

[5] 李桂鳳，萬松軍，張政軍，等.一種利用HPLC指紋圖譜鑒定果蔬真偽及農殘含量的方法：CN201410270909.9[P].2014-10-29.

[6] 王冬群.3個品種青花菜氣相色譜分析[J].浙江農業科學，2016，57（4）：500-503.