雄激素受體和NF-κB在乳腺癌組織中的表達(dá)及其與臨床病理特征的關(guān)系

陳雙龍 付 莉 杜好信

(廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院乳腺外科，福建 廈門 361000)

雄激素受體和NF-κB在乳腺癌組織中的表達(dá)及其與臨床病理特征的關(guān)系

陳雙龍 付 莉1杜好信

(廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院乳腺外科，福建 廈門 361000)

目的 探討雄激素受體(AR)和核因子(NF)-κB在乳腺癌組織中的表達(dá)及其與臨床病理特征的關(guān)系。方法 200例乳腺癌患者中三陰型乳腺癌98例及非三陰型乳腺癌102例。免疫組化法檢測(cè)兩組AR、NF-κB的表達(dá)情況并收集患者臨床病理資料，分析兩指標(biāo)與臨床特征的關(guān)系。結(jié)果 三陰乳腺癌組AR表達(dá)陽性率低于非三陰乳腺癌組，NF-κB表達(dá)陽性率高于例非三陰乳腺癌組(P<0.05)；三陰乳腺癌患者AR表達(dá)陽性與乳腺癌腫瘤壞死和組織浸潤(rùn)呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，非三陰乳腺癌患者AR表達(dá)陽性與乳腺癌瘤體大小、腫瘤壞死和組織浸潤(rùn)呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)；三陰乳腺癌組織NF-κB表達(dá)陽性與乳腺癌腫瘤大小、腫瘤壞死和組織浸潤(rùn)呈負(fù)相關(guān)但與組織分級(jí)呈正相關(guān)(P<0.05)，而在非三陰乳腺癌中，NF-κB表達(dá)陽性僅與乳腺癌腫瘤大小、腫瘤壞死和組織浸潤(rùn)呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論 乳腺癌組織中AR、NF-κB異常表達(dá)，可能參與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移，可能成為理想的乳腺癌預(yù)測(cè)標(biāo)志物。

雄激素受體；核因子κB；乳腺癌

參與機(jī)體防御反應(yīng)、組織損傷和應(yīng)激、細(xì)胞分化和凋亡的轉(zhuǎn)錄核因子(NF)-κB在乳腺癌的抗凋亡機(jī)制中發(fā)揮重要作用〔1，2〕。NF-κB被激活后進(jìn)入細(xì)胞核啟動(dòng)靶基因轉(zhuǎn)錄，通過上調(diào)與細(xì)胞增殖相關(guān)的基因表達(dá)或抑制凋亡通路而發(fā)揮抗凋亡作用〔3〕。文獻(xiàn)報(bào)道，雄激素受體(AR)在乳腺腫瘤中通常過表達(dá)，與相應(yīng)配體雄激素結(jié)合后而發(fā)揮腫瘤抑制作用。本研究旨在探討AR和NF-κB在乳腺癌中的作用機(jī)制。

1 對(duì)象和方法

1.1 對(duì)象 選取2010年1月至2012年2月廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院就診的200例術(shù)前未經(jīng)過放、化療治療的乳腺癌患者手術(shù)標(biāo)本，通過B超、鉬靶X線檢查及細(xì)胞學(xué)穿刺檢查以排除類似乳腺癌的囊腫、纖維腺瘤等病變。乳腺癌患者均為女性，年齡35～75歲，平均(50.53±1.64)歲。通過對(duì)腫瘤組織免疫組化檢查為雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)和原癌基因Her-2均為陰性而將患者分為三陰型乳腺癌組(98例)及非三陰型乳腺癌(102例)。試劑：AR單克隆抗體(兔抗人)、NF-κB單克隆抗體(兔抗人)、β-actin單克隆抗體(兔抗人)、SP Human HRP Kit(DAB)試劑盒等均購(gòu)于Santa Cruz公司。

1.2 方法

1.2.1 免疫組化 收集乳腺癌患者的手術(shù)切除標(biāo)本，一部分經(jīng)多聚甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，5 μm切片，石蠟切片經(jīng)二甲苯脫蠟、乙醇梯度水化，再去除切片組織內(nèi)的內(nèi)源性過氧化酶，最后在微波爐內(nèi)加熱檸檬酸緩沖液進(jìn)行熱抗原修復(fù)。用已知陽性切片作陽性對(duì)照，用正常小鼠非免疫血清和磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作陰性對(duì)照，DAB顯色，蘇木精對(duì)比染色，100倍光鏡下觀察〔4〕。AR、NF-κB在乳腺癌組織的表達(dá)判斷按下述方法：AR、NF-κB存在于細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中，陽性表達(dá)時(shí)呈淺棕色或深棕色。根據(jù)組織的染色強(qiáng)度對(duì)陽性表達(dá)進(jìn)行分類：組織染色強(qiáng)度弱(+)，僅個(gè)別細(xì)胞經(jīng)染色呈淡黃色至棕黃色；染色強(qiáng)度強(qiáng)()，細(xì)胞經(jīng)染色呈棕黃至棕褐色；中等染色強(qiáng)度()，組織染色強(qiáng)度介于弱陽性與強(qiáng)陽性之間。染色強(qiáng)度×陽性細(xì)胞的比例(%)為每例乳腺癌組織表達(dá)的綜合計(jì)分，合計(jì)分≥1為表達(dá)陽性，計(jì)分<1則為表達(dá)陰性。

1.2.2 資料收集 收集病例的臨床資料包括：腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織分級(jí)、腫瘤壞死和腫瘤浸潤(rùn)等。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 AR和NF-κB在乳腺癌中的表達(dá)水平 三陰乳腺癌組AR陽性率〔20.41%(20/98)〕低于非三陰乳腺癌組〔73.53%(75/102)〕(P<0.05)；NF-κB陽性率〔77.55%(76/98)〕高于非三陰乳腺癌組〔47.06%(48/102)〕(P<0.05)。見圖1。

圖1 免疫組化法檢測(cè)乳腺癌組織切片組織AR、NF-κB表達(dá)(DAB，×100)

2.2 AR和NF-κB表達(dá)水平與臨床病理特征的關(guān)系 由表1可知，乳腺癌腫瘤壞死和組織浸潤(rùn)是三陰乳腺癌患者AR表達(dá)陽性的影響因素(P<0.05)；非三陰乳腺癌患者AR表達(dá)陽性與乳腺癌瘤體大小、腫瘤壞死和組織浸潤(rùn)呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。在三陰乳腺癌組NF-κB表達(dá)陽性與乳腺癌腫瘤大小、腫瘤壞死和組織浸潤(rùn)呈負(fù)相關(guān)且與乳腺癌組織分級(jí)呈正相關(guān)(P<0.05)；而非三陰乳腺癌組NF-κB表達(dá)陽性與乳腺癌腫瘤大小、腫瘤壞死和組織浸潤(rùn)呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。

表1 AR、NF-κB陽性表達(dá)與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系〔n(%)〕

3 討 論

乳腺癌是一類異質(zhì)性腫瘤，常根據(jù)其臨床病理特征和分子特征分為不同類型〔5〕。由于免疫組化有操作簡(jiǎn)單的優(yōu)點(diǎn)，應(yīng)用檢測(cè)ER、PR、CK5/6、C-erbB-2、EGFR、Ki-67為乳腺癌分型被大家推崇〔6〕。近年來隨著基因表達(dá)譜分析應(yīng)用于臨床后，乳腺癌的分子分型逐漸被人認(rèn)識(shí)，研究者根據(jù)乳腺癌的基因微陣列分析和免疫表型特征將其分為5個(gè)亞型：luminal A、luminal B、HER-2過表達(dá)型、basal-like以及normal-like乳腺癌，將其中basal-like與normal-like乳腺癌歸屬于三陰性乳腺癌，其占全部乳腺癌的10%～17%。目前關(guān)于關(guān)于其預(yù)后的判斷指標(biāo)，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了許多有臨床上有應(yīng)用價(jià)值的標(biāo)志物，例如AR、NF-κB、聚腺苷酸二磷酸核糖合成酶(PARP)1、絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)、表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)等〔7〕。AR被認(rèn)為是影響三陰性乳腺癌預(yù)后的重要因素〔8〕。有研究還發(fā)現(xiàn)，NF-κB在雌激素受體陰性的乳腺癌中表達(dá)率高于雌激素受體陽性的乳腺癌〔9〕。研究表明，AR能夠直接影響乳腺癌細(xì)胞的增殖，其表達(dá)是影響乳腺癌預(yù)后的重要因素，AR在其陽性表達(dá)的原位癌臨近浸潤(rùn)性癌中的表達(dá)量高于其在原位癌中的表達(dá)量，這表明AR與腫瘤浸潤(rùn)密切相關(guān)〔10〕，此外，還有研究表明乳腺癌中AR表達(dá)水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)〔11，12〕。已證實(shí)NF-κB具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)作用，參與應(yīng)激反應(yīng)和免疫細(xì)胞的活化、增殖、分化、凋亡及腫瘤形成等相關(guān)的基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控〔13〕，因此，NF-κB的表達(dá)與人體腫瘤發(fā)生、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移、預(yù)后有著密切關(guān)系〔14，15〕。本研究結(jié)果表明，AR、NF-κB在乳腺癌組織中異常表達(dá)，可能在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移中具有重要作用，且與某些特定的乳腺癌分子亞型可能有關(guān)系。

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〔2016-07-15修回〕

(編輯 郭 菁/滕欣航)

福建省衛(wèi)生廳青年科研課題(No.2012-2-77)

杜好信(1962-)，男，博士，主任醫(yī)師，主要從事乳腺外科研究。

陳雙龍(1979-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事乳腺外科研究。

R73

A

1005-9202(2017)09-2185-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.09.046

1 廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科