何淑玲 趙墾田 馬令法 楊敬軍 常毓巍
(1西藏農牧學院高原生態研究所,西藏林芝860000;2甘肅民族師范學院高寒生態系統研究所,甘肅合作747000)
羊肚菌(Morchella spp),屬子囊菌亞門(Aseomy?cotina),盤菌綱(Discomycetes),盤菌目(Pezizales),羊肚菌科(Morchellaceae),羊肚菌屬(Morchella)[1],享有“世界上最珍貴的稀有食用菌”之名,具有很高的滋補效果。它香味獨特、功能齊全,含有豐富的人體必需氨基酸、多種維生素、碳水化合物及蛋白質,因其菌蓋似羊肚而得名[2]。羊肚菌具有提神、醒腦、補腎等功效,并且在醫療保健領域也有重要的作用[3],此外羊肚菌,藥性平和、味道甘甜,是很好的中藥材,有消食、益腸道及健脾胃等功效[4],在食品、藥品、化妝品等方面有很大的開發利用價值[5]。目前對羊肚菌的研究較多,主要集中在對菌絲和菌核、保健、藥理、生物學特性、多糖提取等方面[6-12],有關培養料配方對羊肚菌生長及品質的作用鮮有報道[13-16]。為此筆者對三級菌種不同培養料配方對羊肚菌生長及品質的影響進行了全面研究,為進一步確定羊肚菌生長的最佳栽培種培養料配方提供理論依據,也為提高羊肚菌產量和品質提供科學基礎。
1.1供試原料與器具(1)原料:石膏、雜木屑、石灰、麩皮、蔗糖、草木灰、Ca(H2PO4)2、催菇劑、KH2PO4、MgSO4、75%酒精及羊肚菌基腳土(取自甘肅民族師范學院食用菌引種馴化基地采收羊肚菌3潮的0~30 cm的土壤)。
(2)儀器:人工氣候箱、分析天平、恒溫干燥箱、電熱爐、研缽、索氏提取器、全自動定氮儀等。
1.2試驗配方及三級種制備
1.2.1 培養料配方 配方1:雜木屑74%,麩皮20%,KH2PO41%,MgSO41%,羊肚菌基腳土1%,石膏1%,石灰1%,Ca(H2PO4)21%。配方2:雜木屑74%,麩皮20%,KH2PO41%,MgSO41%,催菇劑1%,石膏1%,石灰1%,Ca(H2PO4)21%。配方3:雜木屑74%,麩皮20%,KH2PO41%,MgSO41%,草木灰1%,石膏1%,石灰1%,Ca(H2PO4)21%。配方4:雜木屑74%,麩皮20%,KH2PO41%,MgSO41%,蔗糖1%,石膏1%,石灰1%,Ca(H2PO4)21%。
封口料共設1個配方:羊肚菌基腳土75%,麩皮15%,木屑10%。
1.2.2 三級種的制備 按不同配方比例稱好原料后將雜木屑、麩皮、羊肚菌基腳土、石灰、石膏等混合均勻,將蔗糖、KH2PO4、MgSO4、Ca(H2PO4)2一起加少許水溶解后,均勻的灑在已混合的料堆上,加水攪拌均勻,培養料捏在手里既不會流出水,又不會碎成渣為宜;同時將封口料混合后加水攪拌均勻,同樣捏在手里既不會流出水,又不會碎成渣為宜。將拌好的培養料裝入750 mL食用菌專用瓶,上端用封口料封口。再將培養料在0.12 MPa,120℃高溫高壓滅菌60 min。待滅菌后的培養料溫度降低后,將培養料和接種所用器具一起放入超凈工作臺,紫外線滅菌30 min后開始接種,用接種鏟取蠶豆大小供試二級菌種,接入到培養料中。每個配方接種15~20瓶,最后將接種好的培養料瓶置于恒溫培養箱23℃恒溫黑暗培養,等菌核長滿即可。
1.3栽培方法試驗采用田間隨機區組法,2016年9月25日將菌種播種于溫室大棚中,小區面積為3 m×4 m,一個小區播種同種配方培養料12瓶種,每個培養料配方重復3次。
1.4測定指標與方法(1)菌蓋長(cm):用游標卡尺測量被標記的10株羊肚菌的菌蓋長,取其平均值。(2)菌蓋周長(cm):用游標卡尺測量被標記的10株羊肚菌的菌蓋直徑,算出周長,取其平均值。(3)菌柄長(cm):用游標卡尺測量被標記的10株羊肚菌的菌柄長,取其平均值。(4)菌柄周長(cm):用游標卡尺測量被標記的10株羊肚菌的菌柄直徑,算出周長,取其平均值。(5)單株鮮重(g)=三潮菇的總鮮重/采摘的三潮菇的總株數。(6)單株干重(g)=三潮菇的總干重/采摘的三潮菇的總株數。(7)小區鮮產量(kg)=單株鮮重×平均每個小區采摘的三潮菇的株數/1000。(8)小區干產量(kg)=單株干重×平均每個小區采摘的三潮菇的株數/1000。
(9)灰分(%)=(W2-W0)/(W1-W0)×100
式中:W2-炭化后瓷坩堝加灰分質量(g),W0-恒重空瓷坩堝質量(g),W1-瓷坩堝加試樣質量(g)[17]。
(10)粗纖維(%)=(m1-m0)/m×100
式中:m0-瓷坩堝質量(g),m1-瓷坩堝加粗纖維的質量(g),m-試樣用量(g)[17]。
(11)粗蛋白質、氨基酸及總糖含量測定[17-18]。
1.5數據分析試驗數據采用DPS7.05統計軟件進行方差分析。
2.1不同配方栽培種對羊肚菌菌蓋變化的影響表1結果表明,供試4個配方栽培種的羊肚菌子實體菌蓋生長勢都較好,至2015年12月17日時菌蓋長為2.7~5.1 cm,菌蓋周長為10.7~15.7 cm。可以看出,在羊肚菌全生長發育期配方1的菌蓋生長都最快,菌蓋和菌蓋周長比最慢的配方4的增加了42.10%和46.73%。

表1 不同栽培種配方對羊肚菌菌蓋變化的影響
2.2不同栽培種配方對羊肚菌菌柄生長的影響表2結果顯示,研究4個栽培種配方的羊肚菌子實體菌柄生長均正常且長勢也較好,至2015年12月17日時菌柄長為4.0~5.7 cm,菌蓋周長為6.2~8.1 cm,可以看出,在整個生長發育期配方1的菌柄生長最快也最粗,配方4的菌柄生長最慢也最細。配方1的菌柄長和菌柄周長比配方4的增加42.50%和30.65%。

表2 不同栽培種配方對羊肚菌菌柄變化的影響
2.3不同栽培種配方對子實體鮮重變化的影響由表3可見,在同一生長時期,羊肚菌鮮子實體均表現出配方1的最重,配方4的最輕,4個配方的平均單株鮮重依次為配方1>配方2>配方3>配方4。2015年12月17日時子實體達到采收標準,4個配方的子實體單株鮮重都達到了最大,且配方1的最高為28.28 g,配方4的最低為9.74 g,兩者間差異極顯著,其它各配方之間差異顯著。

表3 不同栽培種配方對羊肚菌鮮重的影響

表4 不同栽培種配方對羊肚菌干重的影響
2.4不同栽培種配方對子實體干重的影響由表4可見,在同一生長時期,羊肚菌子實體單株干重配方1的最高,配方4的最低,4個配方的子實體平均單株干重依次為配方1>配方2>配方3>配方4。2015年12月17日時子實體生長達到采收標準,4個配方的子實體平均單株干重都達到了最高,且配方1的最高為3.67 g,配方4的最低為1.39 g,兩者之間差異極顯著,配方2與配方3差異不顯著,配方3與配方4差異顯著。
2.5不同栽培種配方對羊肚菌產量的影響由表5可見,4個配方中配方1羊肚菌小區采收數最多為77.09株,單株鮮、干重也都最高,產量也最高,子實體每小區產量(鮮品)為4.47 kg、干品為0.71 kg,配方4小區采收數、單株鮮、干重也都最小,產量等都比配方1低。各配方之間小區采收數、產量差異均達極顯著水平。

表5 不同栽培種配方對羊肚菌產量的影響

表6 不同栽培種配方對羊肚菌品質的影響

圖1 配方1菌霜長勢

圖2 配方1子實體長勢

圖3 配方4菌霜長勢

圖4 配方4子實體長勢
2.6不同栽培種配方對羊肚菌品質的影響由表6可見,4種培養料配方的羊肚菌灰分和粗纖維含量都是菌蓋<菌柄,且配方1最低,灰分含量和粗纖維含量菌蓋為6.07%,12.19%,菌柄為7.40%,15.27%。配方4最高,灰分含量和粗纖維含量菌蓋為6.16%,25.24%,菌柄為7.81%,15.91%。其順序為配方1<配方2<配方3<配方4,且配方1與配方4之間差異極顯著。總糖含量、粗蛋白含量和氨基酸總量都是菌蓋>菌柄,其順序為配方1>配方2>配方3>配方4,且配方1與配方4之間差異極顯著,不同栽培種配方羊肚菌品質依次為配方1>配方2>配方3>配方4。
供試的4個培養料配方中,配方1對羊肚生長的影響最大,在形態特征方面表現為菌蓋和菌柄都最長、最粗,小區子實體采收數、單株鮮重、單株干重和小區產量都最高,其順序依次為配方1>配方2>配方3>配方4。在羊肚菌子實體的品質方面配方1的羊肚菌灰分含量、粗纖維含量最少,其順序依次為配方1<配方2<配方3<配方4;而配方1的多糖、蛋白質和氨基酸總量最高,其順序依次為配方1>配方2>配方3>配方4,所以配方1羊肚菌子實體的品質較好,而配方4的羊肚菌灰分含量最多,多糖、蛋白質、粗纖維含量最少,品質較差。三級菌種不同培養料配方對羊肚菌生長及品質的影響依次為配方1>配方2>配方3>配方4。程遠輝等[19]研究表明每公頃羊肚菌最高干重135 kg,與本研究結果不一致的原因可能是出菇期的管理和配方中缺少無機鹽等因素所致。申時才等[20]認為:種植過羊肚菌的土壤比沒種植過羊肚菌的產量高,這一研究結果或許可以用來解釋為何羊肚菌子實體在栽培種培養料中加入羊肚菌基腳土后其生長更好、更健壯。
試驗表明加入羊肚菌基腳土的配方,羊肚菌子實體菌蓋、菌柄生長最好,單株鮮重、單株干重、折合每公頃鮮產量、折合每公頃干產量最高,品質也是4個配方中最好的。因此添加羊肚菌基腳土的栽培種培養料配方為羊肚菌生長的最佳配方,這為羊肚菌今后的連作研究提供了實踐依據。至于為什么在培養料中加入羊肚菌基腳土能提高羊肚菌的產量和品質的生理機理,這將是今后進一步深入研究的內容和方向。