紫丁香蘑液體培養基營養成分初探

張梅琳 徐濟責

（吉林農業科技學院，吉林132101）

紫丁香蘑（Lepista nuda）別名裸口蘑、紫晶蘑。隸屬擔子菌亞門（Basidiomycotina）、層菌綱（Hymenomycetes）、傘菌目（Agaricales）、白蘑科（Tricholomtaceae）、香蘑屬Lepista。有記載顯示紫丁香蘑與松、榛、山楊等形成外生菌根，是森林生態系統的必要組成部分[1]。紫丁香蘑主要分布于我國黑龍江、福建、青海、新疆、西藏、山西等地區，秋季在林中地上群生，有時近叢生或單生。紫丁香蘑不僅味道鮮美，還具有很高的藥用價值，用此菌抗癌試驗效果表明：對小白鼠肉瘤S180的抑制為90%，對艾氏癌的抑制率為100%[2]。該蘑菇含有維生素B1，能調節機體糖代謝。李凡[3]等對四種香蘑屬真菌子實體抗氧化活性比較分析，其中發現了紫丁香蘑子實體提取物對超氧陰離子亦有一定的清除作用。羅正明[4]等對幾種野生食用菌蛋白質的營養價值評價中提到紫丁香蘑子實體蛋白質含量較高，且氨基酸種類齊全，必需氨基酸占氨基酸總量的百分比為38.82%。

關于紫丁香蘑液體發酵培養技術的研究較少。試驗以菌絲干重為指標通過單因素試驗，篩選紫丁香蘑液體發酵的最適碳源，最適氮源，最適無機鹽。現將試驗結果初報如下。

1材料和方法

1.1供試材料菌種來源：供試紫丁香蘑菌種為吉林農業科技學院保藏，菌種編號：2016010；主要儀器和設備：電子天平，高壓蒸汽滅菌鍋，電熱恒溫鼓風干燥箱，搖床。培養基：馬鈴薯葡萄糖液體培養基（PDA）為馬鈴薯 200 g，葡萄糖20 g，水1000 mL，pH自然。120℃滅菌30 min。種子培養基為馬鈴薯 200 g，蔗糖 20，蛋白胨 4 g，加水 1000 mL，pH自然。

1.2試驗方法

1.2.1 碳源試驗 分別以蔗糖、可溶性淀粉、乳糖、麥芽糖、葡萄糖五種碳源，代替馬鈴薯葡萄糖培養基中的葡萄糖（試驗為了排除對碳源的影響，故不加入馬鈴薯）。在250 mL的錐形瓶中加入100 mL培養基，冷卻，按5%的量接種。25℃、150 r/min的恒溫搖床培養。每組五個重復，培養10 d后測定不同碳源培養基中菌絲體的生物量，并測量菌絲球的直徑：用藥勺隨機的將菌絲球從錐形瓶中撈出，放入盛有蒸餾水的干凈平板中，菌絲球處于自然狀態，用游標卡尺測量菌絲球的直徑。測量完后將菌絲球放入瓶中，然后使用定性濾紙過濾培養液，分離菌絲體和發酵液。菌絲體經蒸餾水沖洗數次，將沉淀的菌絲體于電熱恒溫鼓風干燥箱（50℃）內烘干至恒重，電子天平稱重。數據采用Spss19.0進行差異顯著性分析。

1.2.2 氮源試驗 分別以蛋白胨、牛肉膏、尿素、硝酸銨、酵母膏為供試氮源，以馬鈴薯葡萄糖液體培養基為準。以不加氮源為對照。培養基配制、接種、培養、數據觀測、記錄以及數據的分析方法同碳源試驗。

1.2.3 無機鹽試驗 不同無機鹽試驗：分別以硫酸銅、硫酸鐵、硫酸鎂、硫酸銨、硫酸鋅為供試無機鹽，以馬鈴薯葡萄糖液體培養基為標準，以不加無機鹽為對照。培養基配制、接種、培養、數據觀測、記錄以及數據的分析方法同碳源試驗。

2 結果與分析

2.1碳源對紫丁香蘑液體培養菌絲體生長的影響碳源對菌絲體生長的影響如表1。由表1顯示蔗糖為最優，日均生物增長量達到0.0115 g。其次葡萄糖、果糖、麥芽糖為碳源菌絲體生物量比較接近，在以可溶性淀粉為碳源的液體培養基中，菌絲體不生長。

表1 不同碳源對紫丁香蘑液體培養菌絲生長的影響

2.2氮源對紫丁香蘑液體培養菌絲體生長影響氮源對菌絲體生長影響見表2。試驗菌株對氮源選擇性廣泛，但菌絲的生長速度存在較大差異，其中以蛋白胨做氮源時菌絲長速最快，長勢最好，日均菌絲生物量達到0.0083 g，明顯優于其它氮源。牛肉膏次之，之后依次為酵母膏、硝酸銨。菌絲體在加尿素培養基中，不生長。

表2 不同氮源對紫丁香蘑液體培養菌絲生長的影響

2.3無機鹽對紫丁香蘑液體培養菌絲體生長影響無機鹽對紫丁香蘑菌絲生長影響見表3。由表3可知硫酸銨做無機鹽時菌絲生長速度快，硫酸鎂次之，在加入硫酸銅，硫酸鋅，硫酸鐵液體培養基中紫丁香蘑菌絲均不生長。

表3 不同無機鹽對菌絲生長結果影響

3 小結與討論

對紫丁香蘑菌絲體液體發酵培養基營養條件初步篩選結果表明，最適碳源為蔗糖，最適無機鹽為硫酸鎂，最適氮源為蛋白胨，這一結果與趙婷[5]紫丁香蘑的菌絲體培養特性及人工馴化研究中的最適碳源最適氮源研究結論相符。當培養基只加入相應碳源，排除其他有效碳源干擾的情況下，可以更準確的得到最適碳源。分析幾種氮源，蛋白胨和牛肉膏菌絲生長量相對較多，以尿素為氮源培養基中菌絲不生長，尿素在高溫條件下可以發生水解，且隨溫度升高，水解更加劇烈。因此在培養基滅菌的過程中使尿素水解，液體培養基呈弱堿性，而大多數真菌適于偏酸性，因此加入尿素不利于紫丁香蘑菌絲生長。

試驗僅對紫丁香蘑的營養要求做了初步篩選，進一步將對液體發酵液的pH、溫度、光照條件做進一步研究。試驗為紫丁香蘑的液體菌種培養和菌絲的發酵工藝提供參考。