鹽酸莫西沙星注射液的溶血、過敏及刺激試驗

王莉芳，李曉春，徐長根

(陜西省食品藥品檢驗所，陜西 西安 710065)

莫西沙星是人工合成的含有8-甲氧基的第4代氟喹諾酮類抗菌藥物，其抗菌譜廣、抗菌能力強，在保留了第3代抗革蘭陰性菌活性的 基礎上，增強了抗革蘭陽性菌、厭氧菌的活性[1]，尤其是對難治性和對 B-內酰胺類抗菌藥物耐藥的病原體，具有較強的抗菌作用 。有病例使用莫西沙星注射液后發生過敏反應，過敏性休克，四肢及軀干見大片紅色丘疹，并發肺部感染。為進一步了解和評價鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液安全性，本文對其溶血、過敏及刺激性進行研究。

1 材料

1.1 藥物與試劑

250 mL:含莫西沙星0.4 g氯化鈉2.0 g；

陰性對照品：0.9%氯化鈉注射液 市售。

1.2 實驗動物

家兔：雌雄兼用，體質量2.0～2.4 kg；豚鼠：雌雄兼用，體質量：300～350 g。

1.3 試驗儀器

電子天平，德國塞多利斯公司，型號：BS2202S，分度值10mg；水合氯醛，國藥集團化學試劑有限公司，批號：20131204；甲醛溶液，國藥集團化學試劑有限公司，批號：20131118。

2 方法與結果

2.1 血管刺激性試驗[2-5]

2.1.1 供試品配制

鹽酸莫西沙星注射液的供試品溶液的配制：原液。

2.1.2 實驗

圖1 病理學檢查結果

取體質量2.0～2.4 kg健康合格、耳緣無損傷大耳白家兔4只，注射體積為5 mL/kg。采用同體左右側自身對比法給藥，4只于右側耳緣靜脈以無菌操作方法緩緩注射鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液的供試品溶液，于左側等速等量注射0.9%氯化鈉注射液。每天給藥一次，連續5天。給藥后肉眼觀察給藥局部血管有無血栓形成，周圍組織有無紅、腫、瘀血等炎癥反應。末次給藥后24 h、48 h、72 h，及恢復期14天，病理組織學檢查:于72 h處死1號、2號、3號家兔，分別于左右耳緣靜脈注射處，各取1 cm長一段靜脈血管連同周圍組織，用10%的甲醛固定48 h，脫水、透明、包埋，3μm切片。觀察有無血栓形成、內皮損傷及炎癥變化。可逆性癥狀觀察及病理組織學取樣4號1只家兔，末次給藥觀察72 h后，每天進行一般情況觀察和給藥部位血管刺激性癥狀觀察1次，連續觀察14天，觀察結束后同前述方法進行病理組織學檢查，以了解刺激性反應的可逆程度。病理學檢查結果：光學顯微鏡下觀察，兔耳給藥靜脈與對照靜脈血管均規則完整，血管壁無增厚，內皮細胞排列整齊，無血栓形成，血管周圍無明顯炎癥反應及其他病理變化，見圖1。

2.2 溶血與凝聚試驗

取兔血約20 mL，放入燒杯中，用玻璃棒輕攪10min，除去纖維蛋白原，使之成為脫纖血液。加約10倍量的0.9%氯化鈉注射液，搖勻、離心，除去上清液，沉淀的紅細胞再用0.9%氯化鈉注射液同法洗滌3次，至上清液不呈紅色為止。將所得紅細胞用0.9%氯化鈉注射液稀釋成2%的混懸液，供實驗當天使用，用時搖勻。

2.2.1 實驗方法

取試管7支，1～5號管為供試品管，6號管為陰性對照管，7號管為陽性對照管。按表4用量依次加入2%紅細胞混懸液和0.9%氯化鈉注射液或蒸餾水，混勻后，立即置37℃±0.5℃恒溫箱中進行溫育，開始每隔15min觀察一次，1h后，每隔1h觀察一次，連續觀察3 h，如溶液呈澄明紅色，表明有溶血發生，如溶液中有棕紅色或紅棕色絮狀沉淀，振搖后不分散，表明有紅細胞凝聚發生。結果見表1和圖2。

表1 鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液溶血與凝聚試驗

注：+溶血，++凝聚，-不溶血。

圖2 各管至恒溫箱溫育180min拍照

2.3 過敏性試驗[6]

鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液的供試品溶液的配制：原液。

取體重300～350g健康豚鼠24只，分為四組，每組6只。第一組為陽性對照組，注射1%新鮮雞蛋清0.5 mL/只；第二組為陰性對照組，注射0.9%氯化鈉注射液0.5 mL/只；第三組為鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液高劑量組，注射劑量為1.0 mL/只；第四組為鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液低劑量組，注射劑量為0.5 mL/只。隔日每只每次腹腔注射，共3次，進行致敏。各組分別在末次致敏后10天靜脈攻擊，第一組為陽性對照組，注射1%新鮮雞蛋清1.0 mL/只；第二組為陰性對照組，注射0.9%氯化鈉注射液1.0 mL/只；第三組為供試品高劑量組2.0 mL/只，第四組為供試品低劑量組1.0mL/只。除陽性對照組外，其余各組豚鼠均不得出現過敏反應。第一組攻擊后觀察有豎毛、呼吸困難、抽搐、虛脫，3～5min后全部死亡，結果為陽性；第二組攻擊后均無過敏反應，健康存活，結果為陰性；第三、四組攻擊后均無過敏反應，健康存活，結果為陰性。 按全身致敏性評價標準評判為“0”，過敏反應為陰性。試驗期間豚鼠體重增長良好，供試品組與陰性對照組比較未見明顯異常。未引起豚鼠的過敏性反應。

3 討論

鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液的藥理作用已有廣泛的研究報道，但對其安全性的研究還少，鹽酸莫西沙星注射液是我國于 2013 年審批上市的仿制藥品種，加上近幾年過敏反應增多，過敏反應的原因主要是合成、生產過程中引入的雜質，所以，有必要進行鹽酸莫西沙星注射液的溶血、過敏和刺激反應的研究。鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液在本實驗條件下,在臨床擬用量下，體外沒有溶血作用和凝聚反應。不引起豚鼠主動過敏反應。對兔耳血管均無刺激作用。

參考文獻

[1]朱文靜,王少華,張淑立,等.鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液治療下呼吸道感染的藥動學和藥效學研究[J].中國藥房,2013,24(22):2065-2067.

[2]國家食品藥品監督管理總局.藥物刺激性、過敏性和溶血性研究技術指導原則[EB/OL].[2014-05-13].http://www.sda.gov.cn/WS01/CL1616/101018.html.

[3]袁伯俊,廖明陽,李 波.藥物毒理學實驗方法與技術[M].北京:化學工業出版社,2007:255-256.

[4]朱玉云,高允生,成立軍,等.利巴韋林葡萄糖注射液的安全性評價[J].泰山醫學院學報,1999,20(3):199-201.

[5]李學蘭,姜隆梅,張 紅,等.乳糖酸紅霉素藥物濃度和給藥次數對血管刺激性的影響[J].泰山醫學院學報,2002,23(3):227-228.

[6]國家食品藥品監督管理總局.中藥.天然藥物免疫毒性(過敏性、光過敏性反應)研究技術指導原則[EB/OL].(2005-03-12)[2012-02-23].https://wenku.baidu.com/view/c6721524af45b307e8719725.html.