蒸發光法檢測蒙藥胡芪降脂膠囊中黃芪甲苷的含量

趙俊蘋

(內蒙古自治區呼和浩特市食品藥品檢驗所，內蒙古 呼和浩特 010020)

蒸發光法檢測蒙藥胡芪降脂膠囊中黃芪甲苷的含量

趙俊蘋

(內蒙古自治區呼和浩特市食品藥品檢驗所，內蒙古 呼和浩特 010020)

目的：建立高效液相色譜法測定胡芪降脂膠囊中黃芪甲苷含量的方法。方法： MGⅡ C18柱(5μm、4.6×250mm)， 流動相：乙睛-水(35∶65)，檢測器：蒸發光散射檢測器，柱溫30℃。結果：黃芪甲苷在0.5082～5.0825μg范圍內呈良好的線性關系。回歸方程為y=1.874x+11.20 ,r=0.9992，平均回收率為102.07%，RSD為0.95(%)。結論：本法簡便、可靠，可作為該藥的質量控制方法。

胡芪降脂膠囊;黃芪甲苷;高效液相色譜法

胡芪降脂膠囊由黃芪、當歸、蓽茇3味藥組成，是內蒙古自治區國際蒙醫醫院臨床使用處方，具有清血、降血脂、增加免疫力等功效，主治冠心病、肝炎、高血壓、高血脂等疾病。為了保證臨床用藥安全質量可控原則，對此品種進行質量標準研究。

本文參照《中國藥典》2010年版一部 “補中益氣丸(水丸)”項下蒸發光散射器檢測含量測定方法[1-2]，以黃芪甲苷作為指標成分，進行含量測定方法研究。經分析方法驗證，該方法重現性好，專屬性強，方法中其它成分對黃芪的測定無干擾，專屬性較強。結果報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器: Waters高效液相色譜儀1525，蒸發光散射檢測器(ELSD)2424，Empower 色譜工作站。

1.2 試劑與試藥：黃芪甲苷對照品(批號110781-200613，供含量測定用)中國藥品生物制品檢定所；樣品胡芪降脂膠囊(批號：20130822、20131022、20131208)、黃芪、當歸、蓽茇均由內蒙古國際蒙醫醫院提供；乙腈為色譜純，水為高純水，其它試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

2.1.1 色譜柱：色譜柱填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠，本實驗研究采用 資生堂 MGⅡ C18柱 (5μm，4.6×250mm)及Alltima C18柱(5μm ，4.6×250mm)。

2.1.2 供試品溶液提取方法：取裝量差異項下的本品內容物，研細，取3g，精密稱定，置索氏提取器中，加入甲醇適量，加熱回流提取7h，提取液回收甲醇至干，殘渣加水25mL，微熱使溶解，用乙醚輕搖洗滌2次，每次20mL，水溶液再用水飽和的正丁醇振搖提取6次，每次20mL，合并正丁醇提取液，用氨試液洗滌3次，每次40mL，正丁醇液回收溶劑至干，殘渣用甲醇溶解，轉移至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.1.3 對照品溶液的制備：取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含0.2mg的溶液，即得。

2.1.4 陰性對照試驗：按2.1.2及2.1.3項下的方法制備供試品溶液、對照品溶液，另取按處方比例并以相同工藝制備的缺黃芪的陰性對照，按供試品溶液制備法制得陰性對照溶液。在上述色譜條件下，分別精密吸取對照品溶液、陰性對照溶液、供試品溶液各20μL ，分別注入液相色譜儀，測得結果為陰性對照色譜圖中在與黃芪甲苷對照品以及供試品色譜相對應的保留時間處無色譜峰出現，表明處方中其它組分對黃芪甲苷的測定無干擾。見圖1、2、3。

2.1.5 線性關系考察：精密稱取黃芪甲苷對照品約2.032mg，置10mL 量瓶中，加甲醇使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得。(黃芪甲苷0.2033mg/mL)分別取2.5、5、10、15、20、25μL 進樣，按上述色譜條件測定，以峰面積對進樣濃度對數方程進行回歸分析，結果黃芪甲苷在0.5082～5.0825μg 范圍內呈良好的線性關系。回歸方程為y=1.874x+11.20 r=0.9992。

2.1.6 穩定性試驗 ：取同一份供試品溶液，分別在0h、2h、4h、8h、10h、18h進行測定，結果黃芪甲苷在18h內的面積積分值未超0.6%。

2.1.7 重復性試驗 ：取同一批號樣品(批號20130822)6份，各取約3g，按含量測定方法操作，測定每份樣品含量，按標準曲線對數方程計算含量。結果平均含量為0.4560mg/g，RSD為0.28%。

2.1.8 加樣回收試驗：取供試品(批號20130822，含量0.45305mg/g)6份，各約1.5g，精密稱定，置索氏提取器中，加入甲醇適量，加熱回流提取7h，提取液回收甲醇至干，殘渣加水25mL，微熱使溶解，再分別依次精密加入黃芪甲苷對照品溶液(黃芪甲苷0.3120mg/mL)2.0mL，用乙醚輕搖洗滌2次，按2.1.2項下方法操作，測定每份含量，計算回收率，結果見表1。

表1 黃芪甲苷加樣回收試驗結果

2.1.9 樣品含量測定：3批樣品測定結果見表2。

表2 樣品測定結果

3 結論

表中3批樣品測定黃芪甲苷平均含量為0.45mg/g，考慮到藥材的產地、加工以及提取，參照黃芪藥材中黃芪甲苷含量轉移，再下浮20%，初步定為本品每1g含黃芪甲苷(C41H68O14)計，不得少于0.35mg/g。

[1]常新全，丁麗霞.中藥活性成分分析手冊下冊 [M ] .學苑出版社，2002:1528.

[2]國家藥典委員會.中國藥典[S].一部.中國醫藥科技出版社，2010:781.

2016年11月8日收稿

R291.2

A

1006-6810(2017)03-0040-02