慢性房顫患者心房組織中SOCS-1和IL-23水平的動(dòng)態(tài)變化與房顫的關(guān)系

王 朋，劉 佳，倪梓元，張二偉,桑 翠，費(fèi) 瑜*

(1．長(zhǎng)春市中心醫(yī)院 ICU科,吉林 長(zhǎng)春130051；2．吉林大學(xué)第二醫(yī)院 心內(nèi)科；3．吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 腎內(nèi)科)

*通訊作者

慢性房顫患者心房組織中SOCS-1和IL-23水平的動(dòng)態(tài)變化與房顫的關(guān)系

王 朋1，劉 佳2，倪梓元3，張二偉2,桑 翠2，費(fèi) 瑜2*

(1．長(zhǎng)春市中心醫(yī)院 ICU科,吉林 長(zhǎng)春130051；2．吉林大學(xué)第二醫(yī)院 心內(nèi)科；3．吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 腎內(nèi)科)

近年來(lái)，有關(guān)炎癥與炎癥因子在房顫(AF)發(fā)病過(guò)程中的作用越來(lái)越引起人們重視。白細(xì)胞介素-23(IL-23)主要是由活化的單核巨噬細(xì)胞及樹(shù)突狀細(xì)胞分泌的炎癥細(xì)胞因子，與許多炎癥疾病有關(guān),有學(xué)者發(fā)現(xiàn)它參與了AF的病理過(guò)程[1]。細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)負(fù)調(diào)控因子-1(SOCS-1)是由炎癥因子激活JAK/STAT通路產(chǎn)生的一種炎癥因子，它反過(guò)來(lái)通過(guò)抑制該通路對(duì)炎癥反應(yīng)有負(fù)調(diào)控作用，本文對(duì)慢性AF患者心房組織中SOCS-1和IL-23水平進(jìn)行檢測(cè)，探討炎癥因子與AF的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 病例選擇 依據(jù)《赫爾辛基宣言》精神選擇20例行心外科手術(shù)患者。房顫(AF)組10例，男5例，女5例，年齡52.1±10.05歲，AF持續(xù)時(shí)間在6個(gè)月以上。竇性節(jié)律(SR)組10例，男4例，女6例，年齡41.2±18.75歲。兩組無(wú)其它心律失常病史。所有病例均行常規(guī)檢查(心電圖、胸片、心彩及相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查)，并排除糖尿病、近期感染性疾病、嚴(yán)重的肝腎功能不全、免疫結(jié)締組織性疾病、腫瘤。術(shù)前停用至少5個(gè)半衰期以上藥物(如阿司匹林、波立維、降脂)。兩組在心功能和疾病種類有可比性。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料 SOCS-1上游引物：5′-CACGCACTTCCGCACATTCC-3′，下游引物:5′-TCCAGCAGCTCGAAGAGGCA-3′，擴(kuò)增片段大小為280 bp；GAPDH上游引物：5′-CTGCACCACCAACTGCTTAG-3′，下游引物：5′-TGAAG TCAGAG GAGAC CACC-3′，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為407 bp，由生工生物工程(上海)有限公司合成。人IL-23 ELISA試劑盒(北京邦定泰克生物技術(shù)有限公司)。SOCS-1 antibody和羊抗兔二抗 (宜百康生物科技有限公司)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 在心臟停跳前取100mg右心耳組織，去除血液及脂肪組織，一部分用Masson染色法觀察形態(tài)變化，在每張切片中選取5個(gè)不同的視野，用圖像處理系統(tǒng)拍照，并經(jīng)圖像分析軟件處理，將得出數(shù)據(jù)取平均值，膠原容積積分(CVF)計(jì)算公式為：每個(gè)視野中間質(zhì)纖維化的總面積/(總的結(jié)締組織面積+心肌組織面積)。其余部分組織通過(guò)液氮瓶轉(zhuǎn)入-70℃冰箱凍存?zhèn)溆谩L-23的水平用ELISA法測(cè)定，SOCS-1蛋白及mRNA的表達(dá)用Western-blotting及RT-PCR法檢測(cè)。

2 結(jié)果

2.1 慢性AF患者心房組織形態(tài)學(xué)變化

SR組患者有排列整齊心肌細(xì)胞，心肌間質(zhì)有少量膠原纖維。AF組膠原結(jié)締組織增生明顯，正常心肌細(xì)胞排列被打亂，心肌肌束被增生組織分隔。見(jiàn)圖1、2。

圖1 SR組心房組織形態(tài)學(xué)變化(100×1) 圖2 AF組心房組織形態(tài)學(xué)變化(100×1)

2.2 兩組心房組織中IL-23 水平和CVF的變化

AF組心房組織中IL-23水平〔(24.03±4.38)pg/L〕明顯高于SR組〔(17.21±3.03)pg/L〕(P<0.05)；AF組CVF〔17.90±2.98)%〕明顯高于SR組〔(14.19±2.54)%〕(P<0.05)；AF患者心房組織中IL-23的水平與CVF呈正相關(guān)(r=0.68,P<0.05)。

2.3 兩組心房組織中SOCS-1蛋白及mRNA的表達(dá)

由表1、圖3可見(jiàn)，AF組心房組織中SOCS-1蛋白及基因表達(dá)明顯升高(P<0.05)。

表1 兩組心房組織中SOCS-1蛋白及mRNA的表達(dá)

與SR組比較，*<0.05。

圖3 兩組心房組織中SOCS-1蛋白及SOCS-1mRNA的表達(dá)

3 討論

一般來(lái)說(shuō)，IL-23與其效應(yīng)細(xì)胞上的IL-23R結(jié)合，通過(guò)激活JAK/STAT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，產(chǎn)生多種生物活性物質(zhì)，這些生物活性物質(zhì)一方面可使炎癥反應(yīng)擴(kuò)大，另一方面還可促進(jìn)MCP-1和MMPs等分泌，結(jié)果導(dǎo)致纖維結(jié)締組織增生。SOCS是炎癥因子激活JAK/STAT通路的產(chǎn)物，它的產(chǎn)生不僅對(duì)已被激活的JAK/STAT途徑有抑制作用，進(jìn)而抑制炎癥反應(yīng)[2-5]，而且還可減少M(fèi)MPs、TIMPs和粘附分子的表達(dá)，抑制纖維化的形成[6,7]。本實(shí)驗(yàn)在證明AF組膠原結(jié)締組織增生明顯，正常心肌細(xì)胞排列被打亂，心肌肌束被增生組織分隔；AF患者心房組織中IL-23水平明顯升高的同時(shí)[1,8,9]，還發(fā)現(xiàn)IL-23水平與CVF呈正相關(guān)性；AF患者SOCS-1的蛋白表達(dá)與mRNA的含量明顯高于對(duì)照組，提示IL-23水平在促成AF患者的心房結(jié)構(gòu)重構(gòu)過(guò)程中受到SOCS-1對(duì)抗，它們相互影響，相互作用使得AF得以維持。當(dāng)然目前有關(guān)兩者相互作用導(dǎo)致AF更確切機(jī)制還不十分清楚，有待于進(jìn)一步研究。

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2016-04-25)