玉屏風(fēng)散多糖對仔豬免疫力和豬瘟抗體水平的影響

胡雄貴，蔡文杰，鄧 緣，張 星，3，陳 晨，張翠永（.湖南省畜牧獸醫(yī)研究所，湖南 長沙 403；2.湖南三和生物科技有限公司，湖南 長沙 4025；3.湖南鑫廣安農(nóng)牧股份有限公司，湖南 長沙 4000）

玉屏風(fēng)散多糖對仔豬免疫力和豬瘟抗體水平的影響

胡雄貴1，2，蔡文杰1，2，鄧 緣1，張 星1，3，陳 晨1，張翠永1
（1.湖南省畜牧獸醫(yī)研究所，湖南 長沙 410131；2.湖南三和生物科技有限公司，湖南 長沙 410125；3.湖南鑫廣安農(nóng)牧股份有限公司，湖南 長沙 410100）

試驗旨在研究玉屏風(fēng)散多糖對仔豬豬瘟免疫效果和血清免疫力的影響。試驗選用初始體重相近的杜長大三元仔豬60頭，隨機分為5個處理組，每個處理組4個重復(fù)，每個重復(fù)3頭豬，試驗期21 d。試驗Ⅰ組為對照組，飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗Ⅱ組至試驗Ⅴ組分別在飼糧中添加100、200、400、600 mg/kg的玉屏風(fēng)散多糖。結(jié)果表明：1）免疫后添加200 mg/kg以上的玉屏風(fēng)散多糖的試驗Ⅲ至Ⅴ組與對照組相比豬瘟平均阻斷率有顯著差異（P<0.05），添加劑量為400 mg/kg的試驗Ⅳ組的豬瘟平均阻斷率最高，離散度最低。2）隨著玉屏風(fēng)散多糖添加量的提高，仔豬血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM含量逐漸提高。IgA含量在添加200 mg/kg時即可達到顯著差異（P<0.05），IgG和IgM達到顯著性差異的濃度分別為400和600 mg/kg。結(jié)果表明，飼糧中添加玉屏風(fēng)散多糖可增強仔豬對豬瘟的免疫效果，添加量以400 mg/kg效果最好。同時可提高仔豬血清的免疫球蛋白含量，增強機體免疫力，添加量以600 mg/kg效果最好。

玉屏風(fēng)散；仔豬；豬瘟抗體；免疫球蛋白

玉屏風(fēng)散在醫(yī)學(xué)臨床上應(yīng)用非常廣泛，涉及免疫系統(tǒng)、血液病以及消化系統(tǒng)、皮膚病等等，具有提高機體免疫力，增強抗氧化力的作用[1]。藥方由防風(fēng)30 g、黃芪60 g（蜜炙）、白術(shù)60 g組成一劑。玉屏風(fēng)提取物中的玉屏風(fēng)散多糖含黃芪多糖、白術(shù)多糖和防風(fēng)多糖等，具有廣泛的免疫增強作用[2]。在動物研究中，可加強動物機體的免疫功能、提高機體的抗氧化力，對生長性能具有促進作用[3]，但在動物生產(chǎn)中的應(yīng)用較少。本研究以斷奶仔豬為試驗對象，探索玉屏風(fēng)散多糖對仔豬免疫指標(biāo)和豬瘟抗體的影響，旨在為玉屏風(fēng)散多糖在畜牧生產(chǎn)中，特別是新型綠色飼料添加劑在仔豬飼養(yǎng)上的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗豬為杜長大三元雜種斷奶仔豬。玉屏風(fēng)散多糖由湖南三和生物科技有限公司提供，經(jīng)實驗室檢測，玉屏風(fēng)散多糖中總還原糖為35.13%、粗蛋白質(zhì)為17.70%、粗脂肪為0.92%、粗灰分為9.36%、水分為5.03%、粗纖維為0.67%，純度約為80%。

1.2 試驗動物及設(shè)計

采用單因素完全隨機化試驗設(shè)計，將體重相近（7.7±0.51）kg、遺傳基礎(chǔ)一致的60頭杜長大三元仔豬隨機分為5個處理組，每個處理組4個重復(fù)，每個重復(fù)3頭豬，預(yù)試期為3 d，均飼喂基礎(chǔ)飼糧，正試期為21 d。試驗Ⅰ為對照組，飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗Ⅱ至試驗Ⅴ組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加玉屏風(fēng)散多糖100、200、400、600 mg/kg。

1.3 飼養(yǎng)試驗

試驗在湖南鑫廣安農(nóng)牧股份有限公司的豬場進行，正試期開始于2016年9月1日，結(jié)束于2016年9月21日，試驗期為21 d。仔豬舍為半開放式，自由飲水，粉料飼喂，自由采食。舍內(nèi)溫度控制在28～32℃，濕度控制在60%～80%。試驗前對豬舍進行全面消毒，按照豬場常規(guī)管理對仔豬進行驅(qū)蟲與免疫接種。

1.4 豬瘟抗體和血清免疫力測定

試驗開始第1天對每頭仔豬進行豬瘟疫苗免疫，接種劑量為2頭份/頭。在試驗開始（免疫前）和試驗結(jié)束后的第2天清早進行前腔靜脈采血，試驗前采血5 mL，用于檢測豬瘟抗體水平，試驗后采血10 mL，用于豬瘟抗體和免疫球蛋白檢測。血液于4℃、3 500 r/min離心10 min，分離出血清，分裝于EP管中，－20℃保存。血清免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）的含量測定采用全自動生化分析儀，檢測試劑盒購自南京建成生物工程研究所，豬瘟病毒抗體檢測使用ELISA試劑盒，檢測試劑盒購自美國愛德士生物科技有限公司。

1.5 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析

試驗采用Excel進行前期數(shù)據(jù)統(tǒng)計，計算結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，使用SPSS 19.0軟件進行數(shù)據(jù)差異性分析，采用單因素方差分析和Duncan法進行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 玉屏風(fēng)散多糖對豬瘟抗體水平的影響

由表1可見，免疫前豬瘟阻斷率無顯著性差異（P＞0.05），離散度均值為30.3。免疫21 d后檢測豬瘟阻斷率最高為試驗Ⅳ組的（92.12±12.2）%，最低為對照組的（67.32±11.0）%，離散度最低為試驗Ⅳ組的13.87，最高為試驗Ⅰ組的23.57，均值為17.3。免疫后試驗Ⅲ至Ⅴ與試驗Ⅰ、Ⅱ組的豬瘟阻斷率有顯著差異（P＜0.05）。從以上數(shù)據(jù)分析說明，添加玉屏風(fēng)散多糖400 mg/kg對提高仔豬豬瘟抗體水平效果最好。

表1 添加不同劑量的玉屏風(fēng)散多糖對仔豬豬瘟抗體水平的影響

2.2 玉屏風(fēng)散多糖對仔豬血清免疫力的影響

玉屏風(fēng)散多糖對仔豬免疫力的影響見表2。IgA、IgG、IgM值均隨玉屏風(fēng)散多糖含量的增加而提高，且以試驗Ⅴ組最高，其中試驗Ⅲ至Ⅴ組的IgA值與試驗Ⅰ組有顯著差異（P＜0.05），試驗Ⅳ組和試驗Ⅴ組的IgG值與試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組有顯著差異（P＜0.05），試驗Ⅴ組的IgM值與試驗Ⅰ組有顯著差異（P＜0.05）。

表2 添加不同劑量的玉屏風(fēng)散多糖對仔豬血清免疫力的影響

3 討論

3.1 玉屏風(fēng)散多糖對仔豬豬瘟抗體水平的影響

玉屏風(fēng)散的主要成分為黃芪多糖、白術(shù)多糖和防風(fēng)多糖，均具有較強的免疫增強作用[4]，可有效提高仔豬機體對豬瘟、藍耳病等疫病的抗體免疫水平。楊建平[5]研究表明，在仔豬飼料中添加玉屏風(fēng)散超微粉，豬瘟抗體水平在免疫后7 d開始逐漸上升，在免疫后21 d達到最高，然后緩慢下降，以添加0.5%玉屏風(fēng)散超微粉組對提高豬瘟抗體水平效果最好。姚敬明等[6]研究發(fā)現(xiàn)用黃芪多糖直接稀釋豬瘟活疫苗可顯著提高豬瘟疫苗抗體水平，同時還可提高體內(nèi)干擾素－γ（IFN－γ）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）濃度，降低豬白細胞介素-4（IL-4）濃度，證明了在使用豬瘟疫苗免疫時添加黃芪多糖可增強仔豬免疫力，提高豬瘟免疫效果。本研究中，添加200 mg/kg以上的玉屏風(fēng)散多糖即可起到顯著增強平均阻斷率，降低離散度的作用，實際應(yīng)用中添加量為400 mg/kg效果最好。

3.2 玉屏風(fēng)散多糖對仔豬血清免疫力水平的影響免疫球蛋白是具有抗體活性的動物蛋白，主要參與體液免疫調(diào)節(jié)[7]。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明[8]，玉屏風(fēng)散對機體IgA、IgG、IgM能起免疫促進作用。特別對呼吸道患者的血清IgA水平有明顯增加作用。動物試驗研究表明，玉屏風(fēng)散多糖可顯著促進小鼠脾淋巴細胞增殖和刀豆蛋白A誘導(dǎo)脾淋巴細胞的轉(zhuǎn)化，并促進小鼠腹腔巨噬細胞的活化吞噬能力和增殖功能，從而增強機體的體液免疫效果[9-10]并可促進免疫抑制模型小鼠在病毒感染時sIgA的分泌[11]，也可提高正常小鼠機體的IgA水平[12]。本研究中，免疫球蛋白中IgA、IgG、IgM的濃度均隨玉屏風(fēng)散多糖添加量的增加而提高，其中對IgA的影響最為顯著，添加200 mg/kg即可達到顯著影響，IgG和IgM達到顯著影響的濃度分別為400和600 mg/kg，從以上數(shù)據(jù)分析，添加600 mg/kg的玉屏風(fēng)散多糖對提高仔豬免疫力水平效果最好。

4 結(jié)論

飼糧中添加玉屏風(fēng)散多糖可增強仔豬對豬瘟的免疫效果，添加量以400 mg/kg效果最好。同時可提高仔豬血清的免疫球蛋白含量，增強機體免疫力，添加量以600 mg/kg效果最好。

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（編輯：郭玉翠）

Effect of Yupingfeng San Polysaccharide on Serum Immunity Index and CSFV Antibod of Piglets

HU Xionggui1,2,CAI Wenjie1,2,DENG Yuan1,ZHANG Xing1,3,CHEN Chen1,ZHANG Cuiyong1
(1.Hu'nan Institute of Animal and Veterinary Science,Changsha 410131,China;2.Hu'nan Sanhe Biotechnology Co.,Ltd.,Changsha410125,China;3.Hu'nanXinguang'anAgriculturalHusbandryCo.,Ltd.,Changsha410100,China)

The purpose of this study was to investigate the effects of Yupingfeng san polysaccharide on serum immunity index and CSFV Antibod of piglets.The initial test of similar weight of 60 D×L×Y piglets were randomly divided into 5 treatment groups,each treatment consisted of 4 replications of 3 pigs per replicate.The test period is 21 d.GroupⅠwas the control group with basal diet,Yupingfeng san polysaccharide test groupⅡtoⅤwere supplemented with 100,200,400,600 mg/kg in the diet.The results show that:1)Add above 200 mg/kg Yupingfeng san polysaccharide compared with the control group,the average blocking rate of CSFV Antibod had significant difference(P<0.05),the additive amount was 400 mg/kg groupⅣhave highest CSFV Antibod average blocking and the lowest dispersion.2)With the increase of the amount of Yupingfeng san polysaccharide,the contents of serum immunoglobulin IgA,IgG and IgM were gradually increased.IgA content was significantly increased when the addition of 200 mg/kg(P<0.05),IgG and IgM reached a significant effect of the concentration is 400 and 600 mg/kg(P<0.05).The results show that the addition of Yupingfeng san polysaccharide can enhance the immune effect of piglets of CSFV Antibod,the diets of 400 mg/kg has the best effect.At the same time,it can improve the immune globulin content and enhance the immunity of piglets,and the diets of 600 mg/kg has the best effect.

Yupingfeng san;piglet;CSFV Antibod;immunoglobulin

S816.7

A

1002-1957(2017)02-0121-03

2017-01-19

湖南省科技計劃項目（2016NK3001）

胡雄貴（1975-），男，湖南雙峰人，副研究員，碩士，主要從事動物遺傳育種與繁殖研究工作.E-mail：59601723@qq.com